Home DNA Damage/DNA Repair PPAR Antagonist GW9662

alleen voor onderzoeksdoeleinden

GW9662 PPARγ Antagonist

Cat.nr.: S2915

GW9662 is een selectieve PPAR-antagonist voor PPARγ met een IC50 van 3,3 nM in een celvrije assay, met ten minste 10- tot 600-voudige functionele selectiviteit in cellen met PPARγ versus PPARα en PPARδ.
GW9662 PPAR Antagonist Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 276.68

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.94%
99.94

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
293H Function assay 30 mins Antagonist activity at human PPARgamma expressed in 293H cells assessed as reduction in transcriptional response preincubated for 30 mins followed by addition and measured after 16 hrs by reporter gene-based FRET assay, EC50=0.002μM 31294974
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 276.68 Formule

C13H9ClN2O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 22978-25-2 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC=C(C=C1)NC(=O)C2=C(C=CC(=C2)[N+](=O)[O-])Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 55 mg/mL (198.78 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PPARγ
(Cell-free assay)
3.3 nM
PPARα
(Cell-free assay)
32 nM
In vitro

GW9662 binds to Cys(285) on PPARgamma which is conserved among all three PPARs. This compound acts as an antagonist of PPARgamma which is confirmed in an assay of adipocyte differentiation inhibition. It prevents activation of PPARγ and inhibits growth of human mammary tumour cell lines (MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231) with IC50 of 20 μM-30 μM, suggesting either the existence of PPARγ agonistic properties of this chemical or growth-inhibitory mechanisms independent of PPARγ. Co-treatment with this compound (10 μM) results in statistically lower viable cell numbers after 7 days in MDA-MB-231 cells. PPARγ1 ligands could suppress RANKL-induced osteoclast formation in primary murine myeloid (BMs) and RAW264.7 cells. Importantly, suppression by these ligands is reversed in a concentration-dependent fashion with this chemical (2 μM). It (2 μM) blocks IL-4 suppression of osteoclast formation in BMs. This compound (1 μM) blocks RANKL activation of NF-κB in RAW264.7 cells. GW9662 (10 μM) inhibits hormone- and agonist-induced adipogenesis of primary preadipocytes from patients with thyroid eye disease.

Kinase Assay
Bindingsassay
De humane PPARα, PPARγ en PPARδ ligandbindingsdomeinen (LBD's) worden in E. coli tot expressie gebracht als polyhistidine-gelabelde fusie-eiwitten. Receptoren worden geïmmobiliseerd op SPA-kralen door toevoeging van de gewenste receptor (15 nM) aan een slurry van streptavidine-gemodificeerde SPA-kralen (0,5 mg/mL) in assaybuffer. Het mengsel wordt ten minste 1 uur bij kamertemperatuur geëquilibreerd, waarna de kralen worden gepelleteerd door centrifugatie bij 1×103 g. De bovenstaande vloeistof wordt verwijderd en de kralen worden opnieuw gesuspendeerd in het oorspronkelijke volume verse assaybuffer met voorzichtig mengen. De centrifugatie-/resuspensieprocedure wordt herhaald, en de resulterende slurry van met receptoren gecoate kralen wordt onmiddellijk gebruikt of tot 1 week bij 4 ℃ bewaard voor gebruik. [3H]GW2443 worden gebruikt als radioliganden voor de bepaling van competitieve binding aan respectievelijk PPARα, PPARγ en PPARδ. Tenzij anders aangegeven, is de buffer die voor alle assays wordt gebruikt 50 mM HEPES (pH 7), 50 mM NaCl, 5 mM CHAPS, 0,1 mg/mL BSA en 10 mM DTT. Voor sommige experimenten wordt de HEPES (pH 7) vervangen door 50 mM Tris (pH 8).
In vivo

Pretreatment with LPS (1 mg/kg i.p.) significantly attenuates all markers of renal injury and dysfunction caused by ischemia/reperfusion (I/R) injury in rats. Most notably, this compound (1 mg/kg i.p.) abolishes the protective effects of LPS.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12519830/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16014029/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Vimentin / Slug / MMP9 / MMP2
S2915-WB1
30912275
Growth inhibition assay Cell proliferation
S2915-viability1
30912275