Home Cell Cycle ROCK Remmer Y-27632 Dihydrochloride

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Y-27632 Dihydrochloride ROCK Remmer

Cat.nr.: S1049

Y-27632 2HCl is een selectieve ROCK1 en ROCK2-remmer met een Ki van 140 nM en 300 nM in een celvrije test, vertoont een >200-voudige selectiviteit ten opzichte van andere kinasen, waaronder PKC, cAMP-afhankelijke proteïnekinase, MLCK en PAK.
Y-27632 Dihydrochloride ROCK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 320.26

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.89%
99.89

Producten die vaak samen worden gebruikt met Y-27632 Dihydrochloride

SB202190

This compound and SB202190, along with other small molecule inhibitors, generate inducible mesenchymal stromal/stem cells (MSCs)-like cells (iMSCs) from human primary dermal fibroblasts.

SB431542

This compound and SB431542 combination reverses the mesenchymal actin cytoskeleton stress fibers induced by TGF-β1 in TGF-β1 knockout mice cells (mTEC-KO).

CHIR-99021 (Laduviglusib)

It and CHIR99021 collectively reduce the expression of adipogenic genes in both wild-type (WT) and PKP2mut cardiac myocytes (CMs).

MG132

This compound reduces P-IκBα polyubiquitination caused by TNFα with MG132 pre-treatment in MYLA cells.

Z-VAD-FMK

It and Z-VAD-FMK block membrane blebbing and nucleus condensation induced by H2O2 in PC12 cells.

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
Salivary gland stem cells Function Assay 10 µM 7 d Reduces SGSC senescence 25804560
HT22 Cytotoxic Assay 10 µM 13 h Protects against glutamate-induced neuronal death 22810835
Swiss3T3 Colony-forming Assay 10 µM 13 d Increases prostate cell colony-forming activity 21464902
TSGH 8301 Migration Assay 20 µM 1 h Increases cell migration 19896475
Cynomolgus monkey embryonic stem cells Cytotoxic Assay 20 µM 24 h Promotes cyES cell survival 18940855
PC 12 Function Assay 10 μM 24 h Attenuates catecholamine biosynthesis 16219424
C2C12 Function Assay 10 μM 6 h Prevents the serine phosphorylation of IRS-1 induced by insulin and/or TNF-α 16267124
Pancreatic acinar cells Function Assay 10 μM 70 min Potentiates CCK-stimulated pancreatic enzyme secretion 12745080
Rat hepatic stellate cells Function Assay 30 μM 48 h Diminishes the phosphorylation of Erk2, and decreases new DNA synthesis 10845663
LNCaP Growth Inhibition Assay 25 μM 17 h Does not inhibit cell growth 10720471
PC3 Growth Inhibition Assay 25 μM 17 h Does not inhibit cell growth 10720471
PC3 Migration Assay 25 μM 1 h Inhibits the BMFB-CM and the EGF-stimulated migration 10720471
PC3 Function Assay 25 μM 1 h Induces morphological changes 10720471
Rat Vascular Smooth Muscle Cells Function Assay 10 μM 2 h Inhibits angiotensin II-induced hypertrophy 10642317
Stellate Cell Function Assay 25 μM 15 min Inhibits formation of F-actin stress fibers and phosphorylation of myosin light chain 10600496
Neonatal rat ventricular myocytes Function Assay 10 μM 48 h Inhibits ET-1-induced increases in protein synthesis, cell size and myofibrillar organization 10386613
LS174T Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Moderately inhibits cell growth 10021386
HCT116 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
HCT15 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
SW620 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Src-2 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Src-1 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
NIH3T3 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Src-4 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Src-1 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Ras-4 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
Ras-2 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
mNET1-e Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
mNET1-d Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
Dbl-e Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Moderately inhibits cell growth 10021386
Dbl-d Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Strongly inhibits cell growth 10021386
NIH3T3 Growth Inhibition Assay 10 μM 18 d Does not inhibit cell growth 10021386
Mesothelial cells from rat mesentery Invasive Assay 30 μM 20 h Blocks invasive activity 9930872
CCL39 Function Assay 30 μM 30 min Completely abolishes activation of Na-H exchanger NHE1 by integrins 9693382
HeLa Function Assay 10 μM 30 min Inhibits the formation of stress fibers and the assembly of vinculin-containing focal adhesions 9668072
N1E-115 Function Assay 10 μM 2 h DMSO Inhibits the assembly of microtubules and intermediate filaments to form extended processes 9647654
Swiss 3T3 cells Function Assay 10 μM 2 h DMSO Inhibits the assembly of microtubules and intermediate filaments to form extended processes 9647654
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 320.26 Formule

C14H21N3O.2HCl

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 129830-38-2 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC(C1CCC(CC1)C(=O)NC2=CC=NC=C2)N.Cl.Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 64 mg/mL (199.83 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : 64 mg/mL

Ethanol : 4 mg/mL

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ROCK1 (p160ROCK)
(Cell-free assay)
140 nM(Ki)
ROCK2
(Cell-free assay)
300 nM(Ki)
In vitro

Y-27632 Dihydrochloride remt ROCK-II, terwijl het weinig activiteit vertoont tegen PKC, cAMP-afhankelijke proteïnekinase en myosine-lichte-keten-kinase (MLCK) met Ki-waarden van respectievelijk 26 μM, 25 μM en > 250 μM, evenals tegen PKA geactiveerd door een ander lid van de Rho-familie GTPase, Cdc42. Deze verbinding remt door gladde spieren gecontroleerde contractie die wordt opgewekt door verschillende agonisten, waaronder fenylefrine, histamine, acetylcholine, serotonine, endotheline en tromboxaan, met een IC50 van 0.3-1 μM door selectieve remming van Ca2+-sensibilisatie. Het onderdrukt Rho-geïnduceerde, p160ROCK-gemedieerde vorming van stressvezels in gekweekte cellen.

Deze chemische behandeling blokkeert zowel de Rho-gemedieerde activatie van actomyosine als de door LPA gestimuleerde invasieve activiteit van MM1-cellen op een concentratieafhankelijke manier.

Behandeling met deze verbinding is niet alleen voldoende om de vorming van uitbundige axonale uitlopers te initiëren, maar vergemakkelijkt ook axonale rijping tijdens de zeer vroege stadia van axonogenese, terwijl axon-elongatie grotendeels gespaard blijft.

In menselijke embryonale stamcellen (hES-cellen) vermindert deze chemische behandeling bij 10 μM aanzienlijk de door dissociatie geïnduceerde apoptose, zelfs in serumvrije suspensiecultuur (SFEB), verhoogt de kloningefficiëntie (van ~1% naar ~27%), vergemakkelijkt subklonen na gentransfer en stelt SFEB-gekweekte hES-cellen in staat om te overleven en te differentiëren tot Bf1+ corticale en basale telencefale voorlopercellen.

Kinase Assay
Fosforyleringsreacties
Het p160ROCK wordt tot expressie gebracht in COS-cellen als getagde eiwitten van volledige lengte en wordt geïmmunoprecipiteerd met behulp van anti-tag antilichamen. Het p160ROCK (30 ng) wordt geïncubeerd met 40 μM [γ-32P]ATP (3.3 Ci/mmol) en met 3 μg van ofwel histon (HF2A), gedefosforyleerd caseïne of MBP in aanwezigheid van verschillende concentraties van deze verbinding bij 30 °C in een totaal volume van 31 μL. Een aliquot van 7 μL wordt afgenomen op 0, 5, 10 en 20 minuten, gemengd met een gelijk volume van 2 × Laemmli sample buffer en aangebracht op SDS-PAGE. De gel wordt gekleurd met Coomassie Blue, gedroogd en onderworpen aan analyse door een Bioimage Analyzer BAS2000. De concentratie van deze chemische stof die nodig is om de p160ROCK-activiteit met 50% te remmen (IC50-waarde) wordt verkregen. De Ki-waarde wordt berekend volgens de vergelijking Ki = IC50/(1 + S/Km), waarbij S en Km staan voor de concentraties van en de Km-waarde voor ATP.
In vivo

Orale toediening van Y-27632 Dihydrochloride bij 30 mg/kg verlaagt de bloeddruk significant op een dosisafhankelijke manier bij spontaan hypertensieve ratten, renaal hypertensieve ratten, evenals deoxycorticosteronacetaat (DOCA)-zout hypertensieve ratten.

Wanneer deze verbinding continu wordt toegediend met een snelheid van 0,55 μL per uur via geïmplanteerde pompen gedurende 11 dagen, wordt tumorcelinvasie (MM1-cellen die Val14-RhoA tot expressie brengen in ratten) significant vertraagd.

Door ROCK te remmen, vermindert deze chemische behandeling hypoxie-geïnduceerde angiogenese en vasculaire hermodellering in de longcirculatie. Voorbehandeling met deze verbinding heeft een beschermend effect tegen tumorvorming bij albino muizen met Ehrlich-ascitescarcinoom.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17529971/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15961717/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10779382/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24905316/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western Blot p-LIMK1(Thr508) p-LIMK2(Thr505) p-Cofilin(Ser3) CDK2 KRT7 ROCK2 E-cadherin p-MLC2(Ser19)
S1049-WB1
24704720
Transwell migration assay cell migration inhibition
S1049-histogram1
27694793
Immunofluorescence Neurotoxicity Assay E-cadherin beta-catenin Phalloidin
S1049-IF1
21362567
Growth inhibition assay cell proliferation
S1049-histogram2
24523903
ELISA caspase-9
S1049-ELISA1
30320378

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
Is there any data about the Amax (maximum attraction luminosity) and extinction coefficient of it?

Antwoord:
The wavelength used to test its HPLC is 260nm, while the extinction coefficient is unknown.

Vraag 2:
Could it be used in cell culture? Do you have any reference for this application?

Antwoord:
Yes. It can be used in cell culture certainly. Here is the reference website: http://molpharm.aspetjournals.org/content/57/5/976.full.