Home TGF-beta/Smad TGF-beta/Smad Remmer SB431542

alleen voor onderzoeksdoeleinden

SB431542 TGF-beta/Smad Remmer

Cat.nr.S1067

SB431542 is een potente en selectieve remmer van ALK5 met een IC50 van 94 nM in een celvrije test, 100 keer selectiever voor ALK5 dan p38 MAPK en andere kinasen.
SB431542 TGF-beta/Smad Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 384.39

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.99%
99.99

Producten die vaak samen worden gebruikt met SB431542

LDN-193189

This compound and LDN-193189, along with other small molecules, reduce the expression of epithelial-mesenchymal cell transition (EMT) marker genes and effectively inhibit fibrosis of liver cells.

Y-27632 Dihydrochloride

This compound and Y-27632 2HCl combination reverse the mesenchymal actin cytoskeleton stress fibers induced by TGF-β1 in TGF-β1 knockout mice cells (mTEC-KO).

DMH1

This compound and DMH1 combined use regulates the two TGF-β signaling pathways independently in human-induced pluripotent stem cells (hiPSCs).

SU 5402

This compound and SU5402 block NODAL and FGF9 signalling that allows germ cells to differentiate in Emx2-knockdown testes in vitro.

CHIR-99021 (Laduviglusib)

It and Laduviglusib suppress the gene expressions of pluripotent-related transcription factors and epithelial‑mesenchymal transition (EMT)-related genes to various levels in HeLa cells.

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HEK293T Function Assay 10 μM 22 h DMSO Inhibits TGBR2 signaling in human HEK293T cells assessed as Inhibition of SMAD activation with IC50 of 0.066μM 23130626
H1299 Migration Assay 1 μM 12-24 h DMSO Induces antimigratory activity against human H1299 cells assessed as Inhibition of cell migration with IC50 of 0.5μM 24417479
HaCaT Function Assay 3.2-50 μM 15 min DMSO Inhibits TGFbeta receptor in human HaCaT cells assessed as Smad phosphorylation with IC50 of 0.172μM 20919678
HepG2 Function Assay 12 h DMSO Inhibits TGFR-1 in human HepG2 cells expressing PAI-luciferase with IC50 of 0.25μM 19914068
CHO-HIR Function Assay 0.01-3 μM 2 h DMSO Inhibits TGFbeta-induced downstream transcriptional activation of ALK5 expressed in CHO-HIR cells assessed as intracellular translocation of EGFP-Smad2 with IC50 of 0.35μM 24055046
Sf9 Function Assay 2 h DMSO Inhibits human recombinant ALK5 phosphorylation expressed in Sf9 cells with IC50 of 1.542μM 17552507
C32 Function Assay 10 μM 20h Inhibits Trypanosoma cruzi Y infection-induced TGFbeta signaling in mink C32 cells at 10 uM 17526757
Mouse embryo cardiomyocytes Function Assay 10 μM 1 h Inhibits invasion of Trypanosoma cruzi Y in mouse embryo cardiomyocytes assessed as pathogen infection at 10 uM 17526757
Mouse embryo cardiomyocytes Function Assay 10 μM 1 h Inhibits TGF-beta-1-induced Smad2 phosphorylation in mouse embryo cardiomyocytes at 10 uM 17526757
Mouse embryo cardiomyocytes Function Assay 10 μM 1 h Inhibits Trypanosoma cruzi Dm28C infection-induced Smad2 phosphorylation in mouse embryo cardiomyocytes at 10 uM 17526757
Trypanosoma cruzi trypomastigotes Antimicrobial Assay 10 μM 4 h Induces antitrypanosomal activity against Trypanosoma cruzi trypomastigotes assessed as effect on parasite morphology at 10 uM 17526757
Mouse cardiomyocytes Antimicrobial Assay 10 μM 4 h Induces antitrypanosomal activity against Trypanosoma cruzi Y in mouse cardiomyocytes assessed as reduction of intracellular amastigotes at 10 uM 17526757
Mouse cardiomyocytes Antimicrobial Assay 10 μM 96 h Induces antitrypanosomal activity against Trypanosoma cruzi Y in mouse cardiomyocytes assessed as Inhibition of trypomastigote release at 10 uM 17526757
HaCaT Function Assay 0.05 μM 2 h DMSO Does not inhibit TGF-beta induced ALK5 activity in HaCaT cells assessed as p3TP-luciferase reporter activity at 0.05 uM 17552507
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 384.39 Formule

C22H16N4O3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 301836-41-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1OC2=C(O1)C=C(C=C2)C3=C(NC(=N3)C4=CC=C(C=C4)C(=O)N)C5=CC=CC=N5

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 77 mg/mL (200.31 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 3 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ALK4
(Cell-free assay)
ALK7
(Cell-free assay)
ALK5
(Cell-free assay)
94 nM
In vitro
SB 431542 remt de activine type I receptor ALK4 en de nodale type I receptor ALK7, die verantwoordelijk zijn voor de fosforylering van Smad2. SB 431542 heeft weinig effect op ALK1, ALK2, ALK3 en ALK6, die fosforylering van Smad1 vertonen. SB 431542 is een selectieve remmer van endogeen activine, maar heeft geen duidelijk effect op BMP-signalering. SB 431542 zou zowel Smad2/Smad4- als Smad3/Smad4-afhankelijke transcriptie kunnen induceren. In A498-cellen remt SB 431542 zowel TGF-β1-geïnduceerd collageen Iα1 als PAI-1 mRNA met een IC50 van respectievelijk 60 nM en 50 nM. Bovendien remt SB 431542 de productie van TGF-β1-geïnduceerd fibronectine-mRNA en -eiwit met een IC50 van respectievelijk 62 nM en 22 nM. SB 431542 blokkeert de TGF-β-gemedieerde groeifactoren, waaronder PDGF-A, FGF-2 en HB-EGF, wat leidt tot een toename van de proliferatie van MG63-cellen. SB 431542 remt ook TGF-β-geïnduceerde c-Myc en p21 WAF1/CIP1. SB 431542 onderdrukt significant de TGF-β-geïnduceerde G1-arrest, wat leidt tot accumulatie van cellen in de S-fase van de celcyclus in FET-, RIE- en Mv1Lu-cellen. SB 431542 remt ook de TGF-β-geïnduceerde epitheliale-mesenchymale overgang (EMT) in NMuMG- en PANC-1-cellen. SB 431542 verhoogt significant de expressie van CD86 in BM-DC's en die van CD83 binnen CD11c+ cellen die worden onderdrukt door TGF-β. SB 431542 is in staat NK-activiteit te induceren door functionele rijping en IL-12-productie van menselijke DC's.
Kinase Assay
Flashplate-assay voor ALK5
SB 431542 wordt opgelost in DMSO in een concentratie van 10 mM. Het kinase-domein van TGFβRI, van aminozuur 200 tot de C-terminus, en het volledige Smad3-eiwit worden tot expressie gebracht als N-terminale glutathion S-transferase (GST)-fusie-eiwitten in het baculovirus expressiesysteem. Eiwitten worden gezuiverd met glutathion Sepharose-korrels 4B. Basic FlashPlates worden gecoat met 0,1 M steriel gefiltreerd natriumbicarbonaat, pH 7,6, met 700 ng GST-Smad3 per 100 μL. De assaybuffer bevat 50 mM HEPES (pH 7,4), 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 1 mM DTT, 100 mM GTP, 3 μM ATP plus 0,5 μCi/well ɤ33P-ATP, en 85 ng GST-ALK5 met of zonder SB 431542. Platen worden gedurende 3 uur bij 30 °C geïncubeerd. De assaybuffer wordt verwijderd door aspiratie en de plaat wordt geteld op een Packard TopCount 96-wells scintillatieplaatlezer.
In vivo
SB 431542 triggert cytotoxische T-lymfocyt (CTL)-activiteiten in de colon-26 carcinoommodellen en zal waarschijnlijk antitumorale immunologische resultaten produceren door de alteratie van DC-functie die door TGF-β wordt onderdrukt.
Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14633705/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15967103/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21042762/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot phospho-SMAD3 / Phospho-p38 Y397 phospho-FAK pSmad2 / p-AKT / E-cadherin / vimentin / snail / slug CK18 / Fibronectin / Vimentin
S1067-WB1
17113264
Growth inhibition assay Cell viability
S1067-viability1
28125630
Immunofluorescence Smad2/3
S1067-IF2
19619490
Immunofluorescence Na+/K+-ATPase
S1067-IF1
23451286
ELISA collagen 1
S1067-ELISA1
23451286

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
I would appreciate it if you can help me in figuring out the formulation for it in vivo experiments.

Antwoord:
S1067 in 1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80 at 30 mg/ml is a suspension for oral gavage. It can also be dissolved in 2% DMSO+30% PEG 300+ddH2O at 5 mg/ml as a clear solution for IP injection.