Home Cell Cycle ROCK Remmer Ripasudil hydrochloride dihydrate

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Ripasudil hydrochloride dihydrate ROCK Remmer

Cat.nr.S7995

Ripasudil hydrochloride dihydrate is een potente ROCK-remmer met een IC50 van respectievelijk 51 nM en 19 nM voor ROCK1 en ROCK2, gebruikt voor de behandeling van glaucoom en oculaire hypertensie.
Ripasudil hydrochloride dihydrate ROCK Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 395.88

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S799501 Water]79 mg/mL]false]DMSO]26 mg/mL]false]Ethanol]5 mg/mL]false Zuiverheid: 99.22%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datasheet
99.22

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 395.88 Formule

C15H18FN3O2S.Cl H.2 H2 O

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 887375-67-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen K-115 hydrochloride dihydrate Smiles CC1CNCCCN1S(=O)(=O)C2=CC=CC3=CN=CC(=C32)F.O.O.Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

Water : 79 mg/mL

DMSO : 26 mg/mL (65.67 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
ROCK2
(Cell-free assay)
19 nM
ROCK1
(Cell-free assay)
51 nM
In vitro

In trabeculaire netwerk (TM) cellen van apen induceert Ripasudil retractie en afronding van celkernen, evenals verstoring van actinebundels. In endotheelcellen van het kanaal van Schlemm (SCE) vermindert Ripasudil significant de transendotheliale elektrische weerstand (TEER), verhoogt de transendotheliale flux van FITC-dextran en verstoort de cellulaire lokalisatie van ZO-1 expressie.

Kinase Assay
Kinase-remmingstest
ROCK 1 (0,75 ng/μL) en ROCK 2 (0,5 ng/μL) worden geïncubeerd met verschillende concentraties K-115, Y-27632 of HA-1077 bij 25 °C gedurende 90 min in 50 mmol/L Tris-HCl buffer (pH 7,5) met 100 mmol/L KCl, 10 mmol/L MgCl2, 0,1 mmol/L EGTA, 30 μmol/L Long S6 Kinase Substrate peptide en 1 μmol/L ATP in een totaal volume van 40 μL. PKACα, PKC en CaMKIIα worden ook geïncubeerd met verschillende concentraties K-115, Y-27632 of HA-1077. PKACα (0,0625 ng/μL) wordt geïncubeerd bij 25 °C gedurende 30 min in 40 mmol/L Tris-HCl buffer (pH 7,5) met 20 mmol/L MgCl2, 1 mg/mL BSA, 5 μmol/L Kemptide peptide substraat en 1 μmol/L ATP in een totaal volume van 40 μL. PKC (0,025 ng/μL) wordt geïncubeerd bij 25 °C gedurende 80 min in 20 mmol/L Tris-HCl buffer (pH 7,5) met 20 mmol/L MgCl2, 0,4 mmol/L CaCl2, 0,1 mg/mL BSA, 0,25 mmol/L EGTA, 25 ng/mL fosfatidylserine, 2,5 ng/mL diacylglycerol, 0,0075% Triton-X-100, 25 μmol/L DTT, 10 μmol/L Neurogranin (28–43) peptide substraat en 1 μmol/L ATP in een totaal volume van 40 μL. CaMKIIα (0,025 ng/μL) wordt geïncubeerd bij 25 °C gedurende 90 min in 50 mmol/L Tris-HCl buffer (pH 7,5) met 10 mmol/L MgCl2, 2 mmol/L CaCl2, 0,04 mg/mL BSA, 16 μg/mL gezuiverd calmoduline uit rundertestikels, 500 μmol/L DTT, 50 μmol/L Autocamitide 2 en 1 μmol/L ATP in een totaal volume van 40 μL. Na incubatie wordt 40 μL Kinase-Glo Luminescent Kinase Assay oplossing toegevoegd en gedurende 10 min bij 25 °C gelaten, waarna de Relatieve Licht Eenheden (RLU) worden gemeten met een luminometer. De RLU zonder testverbinding wordt ingesteld op 100% (controlewaarde), en die zonder enzym en verbinding wordt ingesteld op 0% (normale waarde). De reactiesnelheid (% van controle) wordt vervolgens berekend uit de RLU met toevoeging van elke concentratie testverbindingen, en de 50% remmende concentraties (IC50) worden bepaald door logistische regressieanalyse met behulp van SAS.
In vivo

Bij albinokonijnen en apen vermindert topische toediening van Ripasudil de intraoculaire druk (IOP) significant, met een maximale IOP-reductie van 8,55 mmHg en 4,36 mmHg bij respectievelijk 0,5% en 0,4%.

Ripasudil (1 mg/kg dagelijks, p.o.) oefent een neuroprotectief effect uit op retinale ganglioncellen (RGC) na opticus zenuwletsel (NC) door oxidatieve stress te onderdrukken via routes waarbij de Nox-familie betrokken is in een muismodel.

Referenties

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT04621136 Completed
Retinopathy of Prematurity
Kyushu University
 November 1 2020 Phase 1|Phase 2