Name: RO4929097 (RG-4733)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1575
Rating: 5 (125 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.77%

99.77

Gerelateerde doelwitten	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease DPP Tyrosinase HIV Protease Serine Protease
Overig Secretase Inhibitoren	DAPT LY411575 Nirogacestat (PF-03084014) Dibenzazepine (YO-01027) Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MK-0752 MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
U87	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
U87 R1	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
MGG4	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
MGG6	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
MGG8	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
MGG23	Cell Viability Assay	30 μM	4 d		decreases cell viability	24495907
SUM149	Cell Viability Assay	0-10 μM	72 h		inhibits cell growth dose dependently	22547109
Sum190	Cell Viability Assay	0-10 μM	72 h		inhibits cell growth dose dependently	22547109
WM35	Function Assay	10 uM	24 h	DMSO	decreases the levels of NOTCH downstream target HES1	21980408
WM98.1	Function Assay	10 uM	24 h	DMSO	decreases the levels of NOTCH downstream target HES1	21980408
WM115	Function Assay	10 uM	24 h	DMSO	decreases the levels of NOTCH downstream target HES1	21980408
WM983A	Function Assay	10 uM	24 h	DMSO	decreases the levels of NOTCH downstream target HES1	21980408
WM3248	Function Assay	10 uM	24 h	DMSO	decreases the levels of NOTCH downstream target HES1	21980408
WM35	Growth Inhibition Assay	10 uM	0-18 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	21980408
WM98.1	Growth Inhibition Assay	10 uM	0-18 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	21980408
WM115	Growth Inhibition Assay	10 uM	0-18 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	21980408
WM983A	Growth Inhibition Assay	10 uM	0-18 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	21980408
WM3248	Growth Inhibition Assay	10 uM	0-18 d	DMSO	inhibits cell growth time dependently	21980408
A673	qHTS assay					29435139
DAOY	qHTS assay					29435139
BT-37	qHTS assay					29435139
BT-12	qHTS assay					29435139
OHS-50	qHTS assay					29435139
SJ-GBM2	qHTS assay					29435139
SK-N-MC	qHTS assay					29435139
NB-EBc1	qHTS assay					29435139
LAN-5	qHTS assay					29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	469.4	Formule	C₂₂H₂₀F₅N₃O₃	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	847925-91-1	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	RG-4733			Smiles	CC(C)(C(=O)NCC(C(F)(F)F)(F)F)C(=O)NC1C2=CC=CC=C2C3=CC=CC=C3NC1=O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 94 mg/mL (200.25 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 50 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 95%saline Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.200mg/ml (0.43mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 4 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of saline and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	4.700mg/ml (10.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 94 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	γ secretase (Cell-free assay) 4 nM Notch (Cell-free assay) 5 nM Aβ40 (Cell-free assay) 14 nM
In vitro	RO4929097 vermindert de hoeveelheid Aβ-peptiden die in het kweekmedium van HEK293-cellen worden uitgescheiden met een EC50 van 14 nM. Deze verbinding remt de Notch-verwerking sterk met een EC50 van 5 nM in de Notch-celgebaseerde reporterassay. De potentie van deze chemische stof in celvrije en cellulaire assays ligt in het lage nanomolaire bereik met >100-voudige selectiviteit ten opzichte van 75 andere eiwitten van verschillende typen, waaronder receptoren, ionkanalen en enzymen (CEREP-panel). Na 5 dagen behandeling vermindert het de productie van ICN in menselijke NSCLC A549-cellen, wat leidt tot een afgeplat en minder getransformeerd tumorcel-fenotype in weefselkweek. Het blokkeert de Notch-verwerking in menselijke niet-kleincellige longcarcinoomcellen en vermindert de expressie van het Notch transcriptionele doelgen Hes1. Behandeling met deze verbinding onthult een twee- tot drievoudige afname van de expressie van directe Notch-doelgenen, Hes1, Hey1 en Heyl in SUM149 en een 3,5- tot achtvoudige afname van de expressie in SUM190-cellen. Het remt de groei van SUM149-cellen bescheiden op een dosisafhankelijke manier. Bij een concentratie van 1 μM van deze chemische stof is de groeiremming 20% voor SUM149 en 10% voor SUM190-cellen, ten opzichte van met vehikel behandelde controles. Het vermindert de productie van inflammatoire cytokines door T-cellen. Bovendien is er met deze behandeling een verschuiving ten gunste van TH2 boven TH1-cytokines. Bovendien zou de door T-celactivering geïnduceerde IL-6-productie toenemen met deze verbinding. Bij deze behandeling vertonen de geselecteerde melanoomcellijnen een neerwaartse regulatie van de NOTCH-stroomafwaartse effector HES1. Een afname van de hoeveelheid melanosferen die bij deze behandeling in primaire melanoomcellijnen worden gevormd, wordt gedetecteerd.
Kinase Assay	In vitro potentie assays
Kinase Assay	Nadat RO4929097 is gebruikt, worden de Aβ-peptiden gemeten met ECL-assays met behulp van een verscheidenheid aan anti-Aβ-antilichamen en een Origen 1.5 Analyzer. De 4G8 murine mAb bindt een epitoop in het Aβ-peptide (binnen aminozuren 18–21) dat zich onmiddellijk distaal bevindt van de α-Secretase-splijtingsplaats. De G2–10 murine mAb bindt de C-terminus die wordt blootgesteld na γ-Secretase-gemedieerde splijting om aminozuur 40 van het Aβ40-peptide te genereren. Het FCA3542 konijnenantilichaam bindt de C-terminus die wordt blootgesteld na γ-Secretase-gemedieerde splijting om aminozuur 42 van het Aβ42-peptide te genereren. De 4G8 mAb is gebiotinyleerd met biotine-LC-sulfo-N-hydroxysuccinimide-ester. De G2–10 en FCA3542 antilichamen zijn gerutenyleerd met TAG-N-hydroxysuccinimide-ester. Aβ(x-40) wordt gedetecteerd met gebiotinyleerd 4G8 en gerutenyleerd G2–10. Aβ(x-42) wordt gedetecteerd met gebiotinyleerd 4G8 en gerutenyleerd FCA3542.
In vivo	Orale injectie van 3 tot 60 mg/kg RO4929097 eenmaal daags of tweemaal daags aan naakte muizen met A549 NSCLC-xenotransplantaten gedurende 7, 14 of 21 dagen van een 21-daags schema resulteert in significante tumorgeremde groei in vergelijking met met vehikel behandelde dieren. De waarden van tumorgeremde groei variëren van 66% tot 91%. Wanneer muizen tweemaal daags worden behandeld met 60 mg/kg van deze verbinding volgens het 7+/14-schema, wekt de behandeling aanvankelijk regressie van gevestigde A549-tumoren op. Aan het einde van de 21-daagse cyclus (dag 47) is de tumorgeremde groei nog steeds 91% in vergelijking met muizen die met vehikel zijn behandeld. De remming van tumorgroei blijft langdurig en aanhoudend tot 34 dagen na de behandeling (dag 67). Op dag 67 worden deze muizen opnieuw behandeld met dezelfde dosis van deze chemische stof voor een tweede cyclus (7 dagen) tot dag 74. Belangrijk is dat de antitumorale effecten aanhouden nadat de dosering is voltooid. Deze verbinding leidt tot een verminderde expressie van genen die geassocieerd zijn met angiogenese in het A549 xenotransplantaatmodel. In tegenstelling hiermee vertoont het RO4929097-resistente H460a xenotransplantaat weinig verandering in de expressie van deze genen, wat het in vivo anti-angiogenese werkingsmechanisme van dit middel onderstreept. Voor IL6 en IL8 overexpressie tumoren heeft het geen invloed meer op angiogenese of de infiltratie van tumor-geassocieerde fibroblasten.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19773430/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22547109/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21980408/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21315665/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10801983/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	Hey1 Snail / N-cadherin / Twist / E-cadherin Akt / p-Akt / Notch / IGF1R / FBXW7 NICD / Hes1 / Hes3 / Hes5		29899322
Growth inhibition assay	Cell viability		30669546

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
How about its half-life?

Antwoord:
Its half-life is about 20 hours based on the following paper: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3869895/

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

RO4929097 (RG-4733) γ-Secretase remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 469.4