Name: Nirogacestat (PF-03084014)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8018
Rating: 5 (21 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.31%

99.31

Gerelateerde doelwitten	HDAC Caspase Proteasome MMP HCV Protease Cysteine Protease Tyrosinase DPP HIV Protease Serine Protease
Overig Secretase Inhibitoren	DAPT RO4929097 (RG-4733) LY411575 Dibenzazepine (YO-01027) MK-0752 Avagacestat (BMS-708163) Semagacestat (LY450139) MDL-28170 L-685,458 NGP 555

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht	489.64	Formule	C₂₇H₄₁F₂N₅O	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1290543-63-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	PF-3084014			Smiles	CCCC(C(=O)NC1=CN(C=N1)C(C)(C)CNCC(C)(C)C)NC2CCC3=C(C2)C(=CC(=C3)F)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (200.14 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 49 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	2.400mg/ml (4.90mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 48 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC₅₀/Ki	gamma-secretase (cell-free assay) 6.2 nM
In vitro	Nirogacestat (PF-03084014) remt de splitsing van de Notch-receptor in cellulaire assays met HPB-ALL-cellen die mutaties bevatten in zowel de heterodimerisatie- als de PEST-domeinen in Notch1 met een IC50 van 13,3 nM. Het reguleert de Notch-doelgenen Hes-1 en cMyc-expressie in HPB-ALL-cellen neerwaarts met een IC50 van <1 nM en 10 nM, respectievelijk, en remt de celgroei van een subset van humane T-ALL-cellijnen (HPB-ALL, DND-41, TALL-1 en Sup-T1) door inductie van celcyclusarrest en apoptose met IC50's van 30-100 nM. Deze verbinding vermindert de proliferatie van HUVEC's met een IC50 van 0,5 μM en vermindert de lumenformatie met een IC50-waarde van 50 nM. Het (1 μM) heeft geen antiproliferatief effect in MX1-cellen; het remt echter de migratie met 95%.
Kinase Assay	γ-secretase assay
Kinase Assay	Een DNA-fragment dat de aminozuren 596 - 695 van de 695-aa-isoform van APP (APP695) en de Flag-sequentie (DYKDDDDK) aan de C-terminus codeert, wordt gegenereerd door PCR-amplificatie met geschikt ontworpen oligonucleotiden en het APP695-cDNA. De Met die dient als translatie-startplaats is residu 596 van APP695 (het P1-residu met betrekking tot de β-secretase splitsingsplaats). Dit DNA-fragment wordt ingevoegd in de prokaryotische expressievector pET2-21b. Het recombinante eiwit, C100Flag, wordt overgeproduceerd in Escherichia coli [stam BL21(DE3)] en gezuiverd door Mono-Q kolomchromatografie. C100Flag (1,7 μM) wordt geïncubeerd met celmembranen (0,5 mg/mL) in aanwezigheid van CHAPSO, CHAPS (3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propaansulfonaat), of Triton X-100 (0, 0,125, 0,25, 0,5 of 1%) in buffer B (50 mM Pipes, pH 7,0; 5 mM MgCl₂; 5 mM CaCl₂; 150 mM KCl) bij 37°C. De reacties worden gestopt door toevoeging van RIPA (150 mM NaCl/1,0% NP-40/0,5% natriumdeoxycholaat; 0,1% SDS/50 mM Tris HCl, pH 8,0) en 5 min koken. De monsters worden gecentrifugeerd en de supernatantoplossingen worden geanalyseerd op de Aβ-peptiden door ECL. De Aβ40- en Aβ42-gerelateerde producten van γ-secretase-gemedieerde verwerking van C100Flag bezitten een Met aan de N-terminus en worden dus gedefinieerd als respectievelijk M-Aβ40 en M-Aβ42. Op vergelijkbare wijze wordt supernatantoplossing (0,125 mg/mL) van met CHAPSO geëxtraheerde HeLa-celmembranen (oplosbare γ-secretase) geïncubeerd met C100Flag (1,7 μM) in buffer B die 0,25% CHAPSO bevat en vervolgens geanalyseerd op M-Aβ40 en M-Aβ42 met behulp van ECL. Deze verbinding, Nirogacestat (PF-03084014), wordt gebruikt in de experimentele context.
In vivo	Nirogacestat (PF-03084014) oraal toegediend in een enkele dosis van 200 mg/kg veroorzaakt een maximale NICD-inhibitie van ~80% in xenograft HPB-ALL tumoren. Het vertoont robuuste antitumoractiviteit in deze modus met een maximale tumorremming van ~92% bij een dosis van 150 mg/kg, gepaard gaande met een significante vermindering van NICD/Notch1, tumormitotische index (Ki67), en apoptosis (geactiveerd caspase-3) kleuring. Bij 120 mg/kg induceert deze verbinding apoptosis, antiproliferatie, vermindert het zelfvernieuwend vermogen van tumorcellen, belemmert het de tumorvasculatuur en verlaagt het de metastaseactiviteit in borstkanker HCC1599 tumor-dragende muizen. De behandeling toont significante antitumoractiviteit in verschillende typen borstxenograftmodellen met een TGI-waarde van ten minste 50%.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20530712/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22806875/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10801983/

Toepassingen (Applications)

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	N1ICD / Hes-1 / Hey-1 / p-MEK / MEK / c-PARP		23402814

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT02338531	Withdrawn	Breast Cancer	Jules Bordet Institute	June 2015	Phase 2
NCT02299635	Terminated	Triple Negative Breast Neoplasms	Pfizer	February 3 2015	Phase 2
NCT02109445	Terminated	Metastatic Cancer Pancreas	Pfizer\|Academic GI Cancer Consortium (AGICC)	September 3 2014	Phase 2
NCT01876251	Terminated	Breast Cancer Metastatic	Pfizer	November 4 2013	Phase 1

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Nirogacestat (PF-03084014) γ-Secretase remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 489.64