Name: GSK-J4 Hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7070
Rating: 5 (64 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.48%

99.48

Gerelateerde doelwitten	HDAC JAK BET Histone Methyltransferase PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK
Overig Histone Demethylase Inhibitoren	SP2509 GSK-LSD1 2HCl Ladademstat (ORY-1001) Dihydrochloride JIB-04 CPI-455 HCl OG-L002 IOX1 GSK J1 ML324 CPI-455

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
CUTLL1	Growth inhibitory assay	2 μM		DMSO	affects cell growth	25132549
CUTLL1	Apoptosis assay	2 μM		DMSO	induces apoptosis	25132549
CUTLL1	Function assay	2 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	25132549
CUTLL1	Kinase assay	6 μM		DMSO	leads to increased H3K27me3	25132549
SF7761	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K27 methylation	25401693
SF8628	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K28 methylation	25401693
H3.3	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K29 methylation	25401693
SF9012	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K30 methylation	25401693
SF9402	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K31 methylation	25401693
SF9427	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K32 methylation	25401693
human astrocytes	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K33 methylation	25401693
SF7761	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K27M glioma cell growth	25401693
SF8628	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K28M glioma cell growth	25401693
H3.3	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K29M glioma cell growth	25401693
SF9012	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K30M glioma cell growth	25401693
SF9402	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K31M glioma cell growth	25401693
SF9427	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K32M glioma cell growth	25401693
human astrocytes	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K33M glioma cell growth	25401693
TG neurons	Function assay	50 μM		DMSO	inhibits HSV-1 reactivation from sensory neurons	25552720
Th17	Function assay	80 nM		DMSO	inhibits cell differentiation	25840993
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	blunts IFNγ, Il-1β, and TNFα-induced chemokine gene expression	26505193
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	induces β-cell dysfunction	26505193
ESCs	Function assay	1.8 µM		DMSO	induces DNA damage along with activation of the DNA damage response	26759175
Raw 264.7	Function assay	0.8192 µM		DMSO	inhibits TNF-α production	26776360
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K4me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K27me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
RAW264.7		0.82 uM	24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells 0.82 uM after 24 hrs by ELISA	26776360
RAW264.7			24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells after 24 hrs by ELISA	26776360
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	453.96	Formule	C₂₄H₂₇N₅O₂.HCl	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1797983-09-5	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 91 mg/mL (200.45 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 91 mg/mL

Water : 10 mg/mL

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (11.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 20%PEG300 2 5%Tween80 3 70%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	1.000mg/ml (2.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 200 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 700 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	JMJD3 (Cell-free assay) 60 nM
In vitro	GSK J4 HCl is een ethylesterderivaat van de JMJD3-selectieve histondemethylaseremmer GSK-J1 met een IC50-waarde van meer dan 50 μM in vitro. Deze verbinding wordt gebruikt om de gevolgen van demethylatie van H3K27me3 te onderzoeken. In humane primaire macrofagen remt deze chemische stof de lipopolysaccharide-geïnduceerde productie van cytokines, waaronder pro-inflammatoire tumornecrosefactor (TNF). Bovendien voorkomt het het lipopolysaccharide-geïnduceerde verlies van H3K27me3 geassocieerd met de TNF-transcriptiestartplaatsen en blokkeert het de rekrutering van RNA-polymerase II.
Kinase Assay	Histone Demethylase AlphaScreen
Kinase Assay	De remming van histondemethylasen wordt beoordeeld met behulp van de histondemethylase AlphaScreen-test (Amplified Luminescence Proximity Homogenous Assay). Deze test maakt gebruik van een gebiotinyleerd peptidesubstraat en is gebaseerd op de detectie van het productmethylmerk met behulp van een specifiek antilichaam gekoppeld aan proteïne-A-acceptorparels en een Steptavidin-donorparel om het peptide te vangen. Kortom, recombinante demethylase-enzymen worden geïncubeerd in aanwezigheid van Fe2+ in de vorm van ferroammoniumsulfaat (FAS), α-ketoglutaraat (KG) en gebiotinyleerd peptidesubstraat. L-ascorbinezuur wordt toegevoegd om een reducerende omgeving te bieden en oxidatie van Fe2+ te voorkomen. Na incubatie met peptidesubstraat wordt de aanwezigheid van het product gedetecteerd met behulp van AlphaScreen-technologie. De demethylase AlphaScreen-testen worden uitgevoerd in een 384-wells plaatformaat met witte proxiplates. Alle stappen worden uitgevoerd in assaybuffer (50 mM HEPES pH 7,5, 0,1% (w/v) BSA en 0,01 % (v/v) Tween-20). FAS wordt elke dag vers opgelost in 20 mM HCl tot een concentratie van 400 mM en verdund tot 1,0 mM in gedeïoniseerd water. Alle andere componenten worden elke dag vers opgelost in gedeïoniseerd water. Voor IC50-bepalingen wordt 5 μL assaybuffer met demethylase-enzym overgebracht naar de wells van een 384-wells proxiplate. Titraties van deze verbinding (0,1 μL) worden overgebracht naar elke well en de enzymen worden gedurende 15 minuten gepre-incubeerd met deze chemische stof (uiteindelijke concentratie DMSO is 1%). De enzymreactie wordt geïnitieerd door toevoeging van 5 μL van een substraatmengsel bestaande uit α-KG, FAS, L-ascorbinezuur en gebiotinyleerd peptidesubstraat en de reactie wordt gedurende de aangegeven tijd bij kamertemperatuur geïncubeerd. De enzymreactie wordt na de aangegeven tijd gestopt door toevoeging van 5 μL EDTA (7,5 mM eindconcentratie in assaybuffer). Streptavidin-donorparels (0,08 mg/ml) en proteïne-A-geconjugeerde acceptorparels (0,08 mg/ml) worden 1 uur gepre-incubeerd met een antilichaam tegen het productmethylmerk en de aanwezigheid van biotine-H3-product wordt gedetecteerd door toevoeging van 5 μL van de gepre-incubeerde AlphaScreen-parels (uiteindelijke concentraties van 0,02 mg/ml met betrekking tot acceptor- en donorparels). Detectie mag gedurende 1 uur bij kamertemperatuur plaatsvinden en de assayplaten worden afgelezen in een BMG Labtech Pherastar FS plaatlezer. Gegevens worden genormaliseerd naar de geen-enzymcontrole en de IC50 wordt bepaald uit de niet-lineaire regressiecurvepassing met GraphPad Prism 5.
In vivo	GSK-J4 hydrochloride is een potente duale remmer van H3K27me3/me2-demethylasen JMJD3/KDM6B en UTX/KDM6A. Het remt LPS-geïnduceerde TNF-α-productie in humane primaire macrofagen. Deze verbinding is een celpermeabel prodrug van GSK-J1.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22842901/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29227285/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK-J4 Hydrochloride H3K27 Histone Demethylase Remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 453.96