Name: PP2 (AGL 1879)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7008
Rating: 5 (128 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.49%

99.49

Gerelateerde doelwitten	EGFR VEGFR JAK PDGFR FGFR HIF FLT FLT3 HER2 Bcr-Abl
Overig Src Inhibitoren	WH-4-023 Saracatinib (AZD0530) SU6656 PP1 Src Inhibitor 1 Tolimidone (MLR-1023) UM-164 1-Naphthyl PP1(1-NA-PP1) RK 24466 Myristic Acid

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
A549	Growth inhibition assay			Growth inhibition of human A549 cells, IC50 = 0.01 μM.	28814374
T-cells	Function assay			Inhibition of adhesion kinase in human T cells, IC50 = 0.6 μM.	18077363
T-cells	Function assay			Inhibition of tyrosine phosphorylation in human T cells, IC50 = 0.6 μM.	18077363
SH-SY5Y	Antiproliferative assay		72 hrs	Antiproliferative activity against human SH-SY5Y cells assessed as cell viability after 72 hrs by XTT assay, IC50 = 6.1 μM.	21856155
Saos2	Cytotoxicity assay		48 hrs	Cytotoxicity against human Saos2 cells after 48 hrs by MTT assay, IC50 = 8.07 μM.	23932070
SaOS2	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human SaOS2 cells assessed as cellular viability, IC50 = 8.1 μM.	17929792
A431	Function assay			Inhibitory effect on phospho-Src/nonphospho after EGF (100 uM) stimulation of A431 cells (21), IC50 = 17 μM.	15109642
MEG01	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human MEG01 cells, IC50 = 17 μM.	18257513
A431	Function assay			Inhibitory effect on phospho-Src (Tyr416) after EGF (100 uM) stimulation of A431 cells (38), IC50 = 22 μM.	15109642
K562	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human K562 cells, IC50 = 25 μM.	18257513
A431	Antiproliferative assay			Tested for antiproliferative activity against human A431 cells, IC50 = 32 μM.	15109642
A431	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against A431 cells, IC50 = 32.2 μM.	16509573
KU812	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human KU812 cells, IC50 = 45 μM.	18257513
A431	Function assay	10 uM		Inhibition of Src autophosphorylation of Y419 in A431 cells at 10 uM	16509573
8701-BC	Proapoptotic assay	10 uM		Proapoptotic activity against 8701-BC cells at 10 uM by PARP assay	16509573
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	301.77	Formule	C₁₅H₁₆ClN₅	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	172889-27-9	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	AG 1879,AGL 1879			Smiles	CC(C)(C)N1C2=NC=NC(=C2C(=N1)C3=CC=C(C=C3)Cl)N

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 9 mg/mL (29.82 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 4 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	4%DMSO 1 corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	2.500mg/ml (8.28mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 40uL 62.5mg/ml clear DMSO stock solution to 960uL corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	1.250mg/ml (4.14mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50μL of clarified DMSO stock solution of 25mg/ml to 400μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 500μL of ddH2O to adjust the volume to 1mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	LCK (Cell-free assay) 4 nM Fyn (Cell-free assay) 5 nM
In vitro	PP2 remt Src door te binden aan een gebied van het molecuul dat niet overlapt met het ATP-bindingsdomein. Deze verbinding (20 μM) induceert 40-50% groeiremming van HT29-cellen, deze concentratie vermindert de Src-activiteit al na 1 uur en handhaaft een 35% remming van de Src-activiteit gedurende 2 dagen. Het (100 mM) verlaagt de Src-activiteit van HT29-cellen op een dosisafhankelijke manier. Deze chemische stof (1 mM-100 mM) veroorzaakt een dosisafhankelijke groeiremming van menselijke darmkankercellen (HT29, SW480 en PMCO1), leverkankercellen (PLC/PRF/5, KYN-2, Li7 en HepG2) en borstkankercellen (MCF-7, MDA-MB-468 en BT-474). Het (20 μM) verhoogt de aggregatie significant in de meeste kankercellen (HT29, SW480, PMCO1, PLC/PRF/5, KYN-2, Li7, MCF-7 en MDA-MB-468) op een E-cadherine-afhankelijke manier. Deze verbinding (20 μM) versterkt de E-cadherine-expressie en verhoogt ook sterk de associatie van E-cadherine met het actine-cytoskelet in kankercellen. Het (20 μM) verhoogt de expressie van α-catenine, β-catenine en γ-catenine in HT29-cellen, terwijl in PLC/PRF/5- en MCF-7-cellen het totale eiwitniveau van α-catenine niet verandert, maar de niveaus van β-catenine en γ-catenine licht toenemen. Deze remmer remt de proliferatie van twee baarmoederhalskankercellen (HeLa en SiHa) op een tijd- en dosisafhankelijke manier. Het (10 μM) downreguleert de expressieniveaus van pSrc-Y416, pEGFR-Y845 en -Y1173 in HeLa- en SiHa-cellen. Deze chemische stof (10 μM) zou celcyclusarrest kunnen moduleren door p21(Cip1) en p27(Kip1) in zowel HeLa- als SiHa-cellen op te reguleren en de expressie van cycline A en cycline-afhankelijke kinase-2, -4 (Cdk-2, -4) in HeLa en van cycline B en Cdk-2 in SiHa te downreguleren.
Kinase Assay	Immuuncomplex enzymassays
Kinase Assay	Het met zuur behandelde enolase wordt 1:20 verdund met 1× PBS alvorens 100 μL/putje te aliquoteren in een Nunc 96-well hoge eiwitbinding assayplaat. De assayputjes worden vervolgens geaspireerd; geblokkeerd met 0,5% runderserum, 1× PBS gedurende 1 uur bij 37 ℃; en daarna vijf keer gewassen met 300 μL 1× PBS/putje. De bron van Lck is ofwel LSTRA-cellen of Lck uitgedrukt in HeLa-cellen met behulp van een vaccinia-expressiesysteem. FynT wordt uitgedrukt in HeLa-cellen met behulp van het vaccinia-systeem. Cellen (12,5×10⁶/mL) worden gelyseerd in lysisbuffer, en de lysaten worden geklaard door centrifugatie bij 14.000 cpm gedurende 15 min bij 4 ℃ in een Eppendorf-buis. De geklaarde lysaten worden vervolgens geïncubeerd met de juiste anti-kinase antilichaam bij 10 μg/mL gedurende 2 uur bij 4 ℃. Proteïne A-Sepharose-kralen worden toegevoegd aan het antilichaam/lysaat-mengsel bij 250 μL/mL en gedurende 30 min bij 4 ℃ geïncubeerd. De kralen worden vervolgens tweemaal gewassen in 1 mL lysisbuffer en tweemaal in 1 mL kinasebuffer (25 mM HEPES, 3 mM MnCl₂, 5 mM MgCl₂ en 100 μM natriumorthovanadaat) en opnieuw gesuspendeerd tot 50% (w/v) in kinasebuffer. Vijfentwintig microliter van de kralensuspensie wordt toegevoegd aan elk putje van de enolase-gecoate 96-well hoge eiwitbinding plaat, samen met een geschikte concentratie van deze verbinding en [γ-³²P]ATP (25 μL/putje van een 200 μCi/mL oplossing in kinasebuffer). Na incubatie gedurende 20 min bij 20 ℃, wordt 60 μL kokende 2× oplosbuffer met 10 mM ATP aan de assayputjes toegevoegd om de reacties te beëindigen. Dertig microliter van de monsters wordt uit de putjes verwijderd, 5 min gekookt en op een 7,5% SDS-polyacrylamidegel geladen. De gels worden vervolgens gedroogd en blootgesteld aan Kodak X-AR-film. Voor kwantificering worden films gescand met behulp van een Molecular Dynamics laserscanner, en de optische dichtheid van de belangrijkste substraatband, enolase p46, wordt bepaald. In aanvullende experimenten voor het meten van de activiteit van deze chemische stof tegen Lck, wordt de assayplaat gewassen met twee wascycli op een Skatron-harvester met behulp van 50 mM EDTA, 1 mM ATP. Scintillatievloeistof (100 μL) wordt vervolgens aan de putjes toegevoegd, en de ³²P-incorporatie wordt gemeten met behulp van een micro-β-teller.
In vivo	PP2 (5 mg/kg/dag) induceert een zekere vertraging in de groeisnelheid van de primaire tumoren ten opzichte van de controle behandeld met vehikel bij SCID-muizen geïnoculeerd met HT29-cellen in de milt. Deze verbinding induceert een zekere vertraging in de groeisnelheid van de primaire tumoren ten opzichte van de controle behandeld met vehikel bij SCID-muizen geïnoculeerd met HT29-cellen in de milt. Deze chemische stof vermindert significant het relatieve levergewicht en het levermetastasevolume in vergelijking met de controles bij SCID-muizen geïnoculeerd met HT29-cellen in de milt. Met deze verbinding (1,5 mg/kg i.p.) behandelde ratten vertonen een reductie van ongeveer 50% van de infarctgrootte op T2-gewogen MRI en in TTC-kleuring in vergelijking met controles bij ratten met focale ischemische hersenbeschadiging. Deze chemische stof resulteert in een betere neurologische score dan controles bij ratten met focale ischemische hersenbeschadiging.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8557675/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12606029/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12114449/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21052789/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15285775/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-PI3K / PI3K / p-AKT / AKT / Bcl-2 / Caspase-3 p-Src / Src / p-MAPK / MAPK		30250573
Immunofluorescence	β-catenin FAK / p-FAK		18566211

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT03842371	Unknown status	Sepsis Syndrome	West China Hospital	February 11 2019	--
NCT02407626	Terminated	Myocardial Ischemia	Triemli Hospital\|University of Alberta	September 2015	Not Applicable
NCT02315287	Unknown status	Type 2 Diabetes	Seoul National University Bundang Hospital	September 2014	Phase 4

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
Could you please suggest me the in vivo details about the dilution to reduce the amount of DMSO to 1 to 5% for it?

Antwoord:
For in vivo study, we recommend to use 4% DMSO +Corn oil up to 2.5 mg/ml for it.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PP2 (AGL 1879) Src remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 301.77