Home Cell Cycle Chk Remmer PF-477736

alleen voor onderzoeksdoeleinden

PF-477736 Chk Remmer

Cat.nr.: S2904

PF-477736 (PF-736, PF-00477736) is een selectieve, potente en ATP-competitieve Chk1-remmer met een Ki van 0,49 nM in een celvrije assay en remt ook VEGFR2, Aurora-A, FGFR3, Flt3, Fms (CSF1R), Ret en Yes. Het vertoont een ~100-voudige selectiviteit voor Chk1 ten opzichte van Chk2.
PF-477736 Chk Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 419.48

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.80%
99.80

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
TC32 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 419.48 Formule

C22H25N7O2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 952021-60-2 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen PF-736, PF-00477736 Smiles CN1C=C(C=N1)C2=C3C=NNC(=O)C4=C3C(=CC(=C4)NC(=O)C(C5CCCCC5)N)N2

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 84 mg/mL (200.24 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
0.49 nM(Ki)
VEGFR2
(Cell-free assay)
8 nM(Ki)
Fms
(Cell-free assay)
10 nM(Ki)
YES
(Cell-free assay)
14 nM(Ki)
Chk2
(Cell-free assay)
47 nM(Ki)
In vitro

PF-477736 (128 nM) abrogates the camptothecin-induced DNA damage checkpoint in a dose-dependent manner in CA46 and HeLa cells. This compound effectively abrogates the -induced S-phase arrest with a corresponding increase in apoptotic cell populations in HT29 cells. This chemical (540 nM) enhances -induced cytotoxicity in a time- and dose-dependent manner in HT29 cells. It potentiates the growth-inhibitory activity of a panel of chemotherapeutic agents across a broad spectrum of p53-deficient human cancer cell lines in the MTT assay. Addition of this compound (360 nM) to -arrested cells induces a dramatic increase in the intensity of H2AX phosphorylation, reflecting a greater number of γ-H2AX molecules near sites of DNA damage. This chemical (0.5 nM) selectively blocks p73 and P53 phosphorylation in presence of curcumin in HL-60 cells. It (360 nM) suppresses -induced phosphorylation of histone H3 (Ser10) and Cdc25C (Ser216) and potentiates apoptosis in COLO205 cells. This compound (250 nM) combined with MK-1775 has marked synergistic cytotoxic activity in OVCAR-5 cells. It (250 nM) combined with MK-1775 causes accumulation of cells with a DNA content between 2N and 4N in OVCAR-5 cells. This chemical (250 nM) combined with MK-1775 causes premature mitosis before the end of DNA replication, with damaged DNA leading to apoptotic cell death in OVCAR-5 cells.

Kinase Assay
Bindingstest
De assay wordt uitgevoerd in een 96-wells plaat gedurende 20 minuten bij 30℃ in 0,1 mL assaybuffer met 50 mM TRIS pH 7,5, 0,4 M NaCl, 4 mM PEP, 0,15 mM NADH, 28 eenheden lactaatdehydrogenase/mL, 16 eenheden pyruvaatkinase/mL, 3 mM DTT, 0,125 mM Syntide-2, 0,15 mM ATP en 25 mM magnesiumchloride. Assays worden geïnitieerd met 1 nM CHK1 kinase domein. De remming van CHK1 activiteit wordt bepaald door initiële snelheden te meten in aanwezigheid van variërende concentraties van deze verbinding. De gegevens worden geanalyseerd met Enzyme Kinetic en Excel software en aangepast aan een kinetisch model voor competitieve remming om een Ki-waarde te verkrijgen. De kinase-selectiviteit van deze chemische stof wordt geëvalueerd door screening bij 1 μM of 10 μM tegen een panel van ongeveer 100 proteïnekinasen.
In vivo

PF-477736 (4 mg/kg i.v.) results in terminal half-life (T1/2) of 2.9 hours, AUC of 5.72 μg×hr/mL and CLp of 11.8 mL/min/kg in rats. This compound dose-dependently enhances the antitumor activity of a maximum tolerated dose in the Colo205 xenograft mouse model. This chemical (12 mg/kg) induces an increase in the phosphorylation of histone H3 (Ser10) and of phospho-histone H2AX in the Colo205 xenograft mouse model. This compound (15 mg/kg i.p.) enhances induced tumor growth inhibition and tumor growth delay in COLO205 and MDA-MB-231 xenograft models. This chemical (10 mg/kg once daily i.p.) combined with MK-1775 (30 mg/kg twice a day oral) leads to greater tumor growth inhibition in mice bearing OVCAR-5 xenografts.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22713237/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S2904-viability1
29167438
Western blot p-ATM / γ-H2AX p-53 / p-p53 / p21 / MDM2
S2904-WB2
31362335
Immunofluorescence p-p53
S2904-IF1
31362335

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT00437203 Terminated
Neoplasms
Pfizer
 December 2006 Phase 1

Veelgestelde vragen (Frequently Asked Questions)

Vraag 1:
Can you advise the vehicle suggested for S2904: 2% DMSO/40% PEG 300 at 5mg/ml, is it a suspension or clear solution? I wanted to know how to dissolve it for an i.p. injection in mice.

Antwoord:
It can dissolve in 2% DMSO/40% PEG 300 at 5mg/ml as a clear solution. If you are going to use this kind of vehicle, please dissolve this compound in DMSO clearly first, then add PEG300, then water.