Home Cell Cycle Chk remmer CHIR-124

alleen voor onderzoeksdoeleinden

CHIR-124 Chk remmer

Cat.nr.S2683

CHIR-124 is een nieuwe en potente Chk1-remmer met een IC50 van 0,3 nM in een celvrije assay. Het vertoont een 2.000-voudige selectiviteit tegen Chk2 en 500- tot 5.000-voudig minder activiteit tegen CDK2/4 en Cdc2.
CHIR-124 Chk remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 419.91

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.48%
99.48

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells, EC50=0.08 μM
human MDA-MB-435 cells Cytotoxic assay Cytotoxicity against human MDA-MB-435 cells in presence of camptothecin
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 419.91 Formule

C23H22ClN5O

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 405168-58-3 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CN2CCC1C(C2)NC3=C(C(=O)NC4=C3C=C(C=C4)Cl)C5=NC6=CC=CC=C6N5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : Insoluble
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
0.3 nM
FLT3
(Cell-free assay)
5.8 nM
PDGFR
(Cell-free assay)
6.6 nM
GSK-3
(Cell-free assay)
23.3 nM
In vitro

CHIR-124 is een chinolone-gebaseerd klein molecuul dat structureel geen verwantschap heeft met andere bekende remmers van Chk1. Deze verbinding interageert synergetisch met topoisomerase-giften (bijv. Camptothecin of SN-38) in het veroorzaken van groeiremming in een verscheidenheid aan kankercellijnen, waaronder borstcarcinoom (MDA-MB-231 en MDA-MB-435) en coloncarcinoom (SW-620 en Colo205), die allemaal het gemuteerde p53-gen bevatten. Het heft de SN-38-geïnduceerde S- en G2-M Cell Cycle Checkpoints op en versterkt apoptose in MDA-MD-435 borstkankercellen. De opheffing van het G2-M Cell Cycle Checkpoint en de inductie van apoptose door deze chemische stof worden versterkt door het verlies van p53. Deze verbinding richt zich ook potent op andere kinasen zoals PDGFR en Flt3 met IC50 van respectievelijk 6,6 nM en 5,8 nM.

Kinase Assay
Chk1 Assay
Voor de Chk1-assay wordt het kinase-domein tot expressie gebracht in Sf9-insectencellen, en een gebiotinyleerd cdc25c-peptide dat de consensus Chk1/Chk2-fosforylatieplaats (*) (biotine-[AHX]SGSGS*GLYRSPSMP-ENLNRPR[CONH2]) bevat, wordt gebruikt als substraat. Een verdunningsreeks van CHIR-124 wordt gemengd met een kinasereactiebuffer die een uiteindelijke concentratie bevat van 30 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 2 mM DTT, 4 mM EDTA, 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM MnCl2, 0,01% runderserumalbumine, 1,35 nM CHK1-kinasedomein, 0,5 μM peptidesubstraat en 1 AM ongelabeld ATP, plus 5 nM 33Pγ-gelabeld ATP (specifieke activiteit = 2.000 Ci/mmol). Reacties en detectie van de fosfaatoverdracht worden uitgevoerd met een radioactieve methode. Reacties worden gedurende 1 tot 4 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd en het gefosforyleerde peptide wordt op streptavidine-gecoate microwellplaten, die stopreactiebuffer (25 mM EDTA [ethyleendiaminetetraazijnzuur], 50 mM HEPES, pH 7,5) bevatten, gevangen. Gefosforyleerd peptide wordt gemeten met het DELFIA TRF-systeem met behulp van een europium-gelabeld anti-fosfotyrosine antilichaam PT66. De concentratie van deze verbinding voor IC50 wordt berekend met behulp van niet-lineaire regressie met XL-Fit data-analysesoftware.
In vivo

CHIR-124 versterkt de groeiremmende effecten door het G2-M Cell Cycle Checkpoint op te heffen en tumorapoptose te verhogen in een orthotoop borstkanker-xenograftmodel.
Referenties

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.