Home Cell Cycle Aurora Kinase Remmer MK-5108

alleen voor onderzoeksdoeleinden

MK-5108 Aurora Kinase Remmer

Cat.nr.: S2770

MK-5108 (VX-689) is een zeer selectieve Aurora A-remmer met een IC50 van 0,064 nM in een celvrije assay en is 220- en 190-voudig selectiever voor Aurora A dan Aurora B/C, terwijl het TrkA remt met minder dan 100-voudige selectiviteit. Deze verbinding induceert Autophagy. Fase 1.
MK-5108 Aurora Kinase Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 461.94

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.17%
99.17

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
BL21 (DE3) Rosetta Function assay 30 mins Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM. 27391133
HeLa Kyoto Function assay 20 hrs Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM. 27391133
HCC1143 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM. 28918096
AU565 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM. 28918096
MCF7 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM. 28918096
HCC1806 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM. 28918096
CAL851 Antiproliferation assay Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM. 28918096
HeLa Function assay 16 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM. 28918096
HeLa Function assay 32 mg/kg 2 days Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM. 28918096
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL Function assay 120 mins Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM. ChEMBL
HeLaS3 Cytotoxicity assay 3 days Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM. ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 461.94 Formule

C22H21ClFN3O3S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1010085-13-8 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen VX-689 Smiles C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

MK-5108 inhibits Aurora-A activity in an ATP-competitive manner. This compound shows robust selectivity against the other family kinases Aurora-B (220-fold) and Aurora-C (190-fold) in the biochemical assay. It also reveals high selectivity for Aurora-A over other protein kinases. The compound inhibits only one kinase (TrkA) with <100-fold selectivity. It may be more Aurora-A selective than MLN8054. Consistent with the induction of pHH3-positive cells, this chemical induces accumulation of cells in the G2-M phase. It inhibits the proliferation of tumor cells including HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 and CAL85-1 with an IC50 of 0.42 μM, 0.45 μM, 0.52 μM, 0.56μM and 0.74 μM, respectively. This compound decreases cell viability in a dose-dependent fashion in all three cell lines including LEIO285, LEIO505 and SK-LSM1 cells with an IC50 of approximately 100 nM. Incubation with it in LEIO285 increases the proportion of cells in G2/M at 48 and 72 hours post-treatment. The compound significant increases in Caspase 3/7 activity when compared to DMSO-treated control cultures at both time points. In LEIO505 cells, it leads to more cells accumulating at G2/M phases at 24 hours but not 48 hours or 72 hours.  
Kinase Assay
Biochemische kinase assays
Recombinant His-getagd humaan Aurora-A-eiwit wordt tot expressie gebracht in Escherichia coli en gezuiverd met een HisTrap HP-kolom. Gezuiverd recombinant humaan Aurora-B- en Aurora-C-eiwit worden gekocht. Experimenten worden in vijfvoud uitgevoerd in 96-well platen. De Aurora-A-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 0,1 ng per well Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 en 0,2 mM EDTA bij 30°C gedurende 40 minuten. Om de remmingswijze van MK-5108 voor Aurora-A te onderzoeken, worden de IC50-waarden van deze verbinding bepaald in aanwezigheid van verschillende ATP-concentraties. Vervolgens wordt de IC50-waarde uitgezet als functie van de ATP-concentratie om het effect van de ATP-concentratie op de IC50-waarde van deze chemische stof te analyseren. De Aurora-B-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 5,0 ng per well Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 en 0,2 mM EDTA bij 30 °C gedurende 20 minuten. De Aurora-C-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 15 ng per well Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)2, 1 mM (±) DTT en 1 mM EGTA bij 30°C gedurende 20 minuten. Nadat de kinasereacties zijn beëindigd door toevoeging van 2,0% fosforzuur, wordt Tetra-Kemptide of Kemptide op de MultiScreen-PH-plaat gevangen. Wells worden vijf keer gewassen met 0,64% fosforzuur en vervolgens gecontroleerd op radioactiviteit in een vloeistofscintillatieteller.
In vivo

MK-5108 induces pHH3-positive cells at doses of 16 mg/kg and 32 mg/kg. Plasma concentration of this compound at 8 mg/kg and 16 mg/kg are 1.7 μM and 4.4 μM, respectively. This compound treatment results in the induction of pHH3 in tumor and skin tissues, which starts at 2 hours and reachs a maximum at 4 hours. This chemical treatments at 15 mg/kg and 30 mg/kg results in significant tumor growth inhibition with the change in mean tumor volume for the treatment group as a percentage of the mean change in the control group (%T/C) of 10% and −6% at day 11, and 17% and 5% at day 18, respectively. It is well tolerated at both doses, with minimal reduction in body weight. This compound also exhibits significant antitumor activity through intermittent dosing in nude rats bearing SW48 tumors, it at 15 mg/kg and 45 mg/kg causes dose-dependent tumor growth inhibition with a %T/C of 35% and 7% at day 10, and 58% and 32% at day 27, respectively.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC
S2770-WB1
29262328
Growth inhibition assay Cell viability
S2770-viability1
24756365