Name: MK-5108
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2770
Rating: 5 (40 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.17%

99.17

Gerelateerde doelwitten	CDK HSP PD-1/PD-L1 ROCK Wee1 DNA/RNA Synthesis Microtubule Associated Ras KRas Casein Kinase
Overig Aurora Kinase Inhibitoren	Hesperadin Barasertib-HQPA (AZD2811) Alisertib (MLN8237) Tozasertib (VX-680) ZM 447439 MLN8054 Danusertib (PHA-739358) TCS7010 (Aurora A Inhibitor I) AMG-900 PHA-680632

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
BL21 (DE3) Rosetta	Function assay		30 mins	Inhibition of His-tagged human Aurora A kinase (122 to 40 residues) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) Rosetta cells using biotinylated STK2 substrate incubated for 30 mins by HTRF assay, IC50 = 0.000064 μM.	27391133
HeLa Kyoto	Function assay		20 hrs	Inhibition of Aurora A kinase autophosphorylation at Thr288 in human HeLa Kyoto cells incubated for 20 hrs, IC50 = 0.3 μM.	27391133
HCC1143	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1143 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.42 μM.	28918096
AU565	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human AU565 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.45 μM.	28918096
MCF7	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human MCF7 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.52 μM.	28918096
HCC1806	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human HCC1806 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.56 μM.	28918096
CAL851	Antiproliferation assay			Antiproliferation activity against human CAL851 cells assessed as inhibition of cell proliferation, IC50 = 0.74 μM.	28918096
HeLa	Function assay	16 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 16 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 1.7 μM.	28918096
HeLa	Function assay	32 mg/kg	2 days	Plasma concentration in F344/N Jcl-rnu rat xenografted with luciferase expressing human HeLa cells at 32 mg/kg, po BID for 2 days, Cp = 4.4 μM.	28918096
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
OHS-50	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL	Function assay		120 mins	Inhibition of human N-terminal His-tagged Aurora A expressed in Escherichia coli BL21-Codon-Plus(DE3)-RIL cells using 5-carboxy-fluorescein-y-aminobutyric acid-Ala-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly-NH2 as substrate after 120 mins by fluorescence polarization as, IC50 = 0.00054 μM.	ChEMBL
HeLaS3	Cytotoxicity assay		3 days	Cytotoxicity against human HeLaS3 cells assessed as cell growth inhibition after 3 days by WST-8 assay, IC50 = 1.26 μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	461.94	Formule	C₂₂H₂₁ClFN₃O₃S	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1010085-13-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	VX-689			Smiles	C1CC(CCC1OC2=C(C(=CC=C2)Cl)F)(CC3=NC(=CC=C3)NC4=NC=CS4)C(=O)O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 92 mg/mL (199.16 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	0.5% methylcellulose 1 0.2% Tween 80 Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	10.000mg/ml (21.65mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 0.5% methylcellulose+0.2% Tween 80 clear solution, and mix evenly to make it a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	Aurora A (Cell-free assay) 0.064 nM
In vitro	MK-5108 remt de Aurora-A-activiteit op een ATP-competitieve manier. Deze verbinding vertoont een robuuste selectiviteit tegen de andere familiekinasen Aurora-B (220-voudig) en Aurora-C (190-voudig) in de biochemische assay. Het onthult ook een hoge selectiviteit voor Aurora-A boven andere proteïnekinasen. De verbinding remt slechts één kinase (TrkA) met een <100-voudige selectiviteit. Het kan Aurora-A-selectiever zijn dan MLN8054. Consistent met de inductie van pHH3-positieve cellen, induceert deze chemische stof accumulatie van cellen in de G2-M-fase. Het remt de proliferatie van tumorcellen, waaronder HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 en CAL85-1 met een IC50 van respectievelijk 0,42 μM, 0,45 μM, 0,52 μM, 0,56μM en 0,74 μM. Deze verbinding vermindert de cellevensvatbaarheid dosisafhankelijk in alle drie de cellijnen, inclusief LEIO285, LEIO505 en SK-LSM1-cellen, met een IC50 van ongeveer 100 nM. Incubatie ermee in LEIO285 verhoogt het aandeel cellen in G2/M op 48 en 72 uur na behandeling. De verbinding veroorzaakt significante verhogingen in Caspase 3/7-activiteit vergeleken met DMSO-behandelde controleculturen op beide tijdstippen. In LEIO505-cellen leidt het tot meer cellen die zich ophopen in de G2/M-fasen op 24 uur, maar niet op 48 uur of 72 uur.
Kinase Assay	Biochemische kinase assays
Kinase Assay	Recombinant His-getagd humaan Aurora-A-eiwit wordt tot expressie gebracht in Escherichia coli en gezuiverd met een HisTrap HP-kolom. Gezuiverd recombinant humaan Aurora-B- en Aurora-C-eiwit worden gekocht. Experimenten worden in vijfvoud uitgevoerd in 96-well platen. De Aurora-A-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)₄R-NH₂], 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 0,1 ng per well Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)₂ en 0,2 mM EDTA bij 30°C gedurende 40 minuten. Om de remmingswijze van MK-5108 voor Aurora-A te onderzoeken, worden de IC50-waarden van deze verbinding bepaald in aanwezigheid van verschillende ATP-concentraties. Vervolgens wordt de IC50-waarde uitgezet als functie van de ATP-concentratie om het effect van de ATP-concentratie op de IC50-waarde van deze chemische stof te analyseren. De Aurora-B-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH₂), 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 5,0 ng per well Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)₂ en 0,2 mM EDTA bij 30 °C gedurende 20 minuten. De Aurora-C-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per well [γ-³³P]-ATP, 15 ng per well Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)₂, 1 mM (±) DTT en 1 mM EGTA bij 30°C gedurende 20 minuten. Nadat de kinasereacties zijn beëindigd door toevoeging van 2,0% fosforzuur, wordt Tetra-Kemptide of Kemptide op de MultiScreen-PH-plaat gevangen. Wells worden vijf keer gewassen met 0,64% fosforzuur en vervolgens gecontroleerd op radioactiviteit in een vloeistofscintillatieteller.
In vivo	MK-5108 induceert pHH3-positieve cellen bij doses van 16 mg/kg en 32 mg/kg. De plasmaconcentratie van deze verbinding bij 8 mg/kg en 16 mg/kg bedraagt respectievelijk 1,7 μM en 4,4 μM. Deze verbindingbehandeling resulteert in de inductie van pHH3 in tumor- en huidweefsels, die begint na 2 uur en een maximum bereikt na 4 uur. Deze chemische behandelingen bij 15 mg/kg en 30 mg/kg resulteren in een significante tumorremming met de verandering in het gemiddelde tumorvolume voor de behandelingsgroep als percentage van de gemiddelde verandering in de controlegroep (%T/C) van 10% en −6% op dag 11, en 17% en 5% op dag 18, respectievelijk. Het wordt goed verdragen bij beide doses, met minimale vermindering van het lichaamsgewicht. Deze verbinding vertoont ook significante antitumoractiviteit door intermitterende dosering bij naakte ratten met SW48-tumoren; bij 15 mg/kg en 45 mg/kg veroorzaakt het dosisafhankelijke tumorremming met een %T/C van 35% en 7% op dag 10, en 58% en 32% op dag 27, respectievelijk.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-Aurora A / Aurora-A / N-MYC		29262328
Growth inhibition assay	Cell viability		24756365

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

MK-5108 Aurora Kinase remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 461.94