MK-5108

CatalogusnummerS2770 Batch:S277001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C22H21ClFN3O3S
Moleculair gewicht 461.94 CAS-nr. 1010085-13-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 92 mg/mL (199.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving MK-5108 (VX-689) is een zeer selectieve Aurora A-remmer met een IC50 van 0,064 nM in een celvrije assay en is 220- en 190-voudig selectiever voor Aurora A dan Aurora B/C, terwijl het TrkA remt met minder dan 100-voudige selectiviteit. Deze verbinding induceert Autophagy. Fase 1.
Doelen
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

MK-5108 remt de Aurora-A-activiteit op een ATP-competitieve manier. Deze verbinding vertoont een robuuste selectiviteit tegen de andere familiekinasen Aurora-B (220-voudig) en Aurora-C (190-voudig) in de biochemische assay. Het onthult ook een hoge selectiviteit voor Aurora-A boven andere proteïnekinasen. De verbinding remt slechts één kinase (TrkA) met een <100-voudige selectiviteit. Het kan Aurora-A-selectiever zijn dan MLN8054. Consistent met de inductie van pHH3-positieve cellen, induceert deze chemische stof accumulatie van cellen in de G2-M-fase. Het remt de proliferatie van tumorcellen, waaronder HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 en CAL85-1 met een IC50 van respectievelijk 0,42 μM, 0,45 μM, 0,52 μM, 0,56μM en 0,74 μM. Deze verbinding vermindert de cellevensvatbaarheid dosisafhankelijk in alle drie de cellijnen, inclusief LEIO285, LEIO505 en SK-LSM1-cellen, met een IC50 van ongeveer 100 nM. Incubatie ermee in LEIO285 verhoogt het aandeel cellen in G2/M op 48 en 72 uur na behandeling. De verbinding veroorzaakt significante verhogingen in Caspase 3/7-activiteit vergeleken met DMSO-behandelde controleculturen op beide tijdstippen. In LEIO505-cellen leidt het tot meer cellen die zich ophopen in de G2/M-fasen op 24 uur, maar niet op 48 uur of 72 uur.  
In vivo

MK-5108 induceert pHH3-positieve cellen bij doses van 16 mg/kg en 32 mg/kg. De plasmaconcentratie van deze verbinding bij 8 mg/kg en 16 mg/kg bedraagt respectievelijk 1,7 μM en 4,4 μM. Deze verbindingbehandeling resulteert in de inductie van pHH3 in tumor- en huidweefsels, die begint na 2 uur en een maximum bereikt na 4 uur. Deze chemische behandelingen bij 15 mg/kg en 30 mg/kg resulteren in een significante tumorremming met de verandering in het gemiddelde tumorvolume voor de behandelingsgroep als percentage van de gemiddelde verandering in de controlegroep (%T/C) van 10% en −6% op dag 11, en 17% en 5% op dag 18, respectievelijk. Het wordt goed verdragen bij beide doses, met minimale vermindering van het lichaamsgewicht. Deze verbinding vertoont ook significante antitumoractiviteit door intermitterende dosering bij naakte ratten met SW48-tumoren; bij 15 mg/kg en 45 mg/kg veroorzaakt het dosisafhankelijke tumorremming met een %T/C van 35% en 7% op dag 10, en 58% en 32% op dag 27, respectievelijk.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Biochemische kinase assays

    Recombinant His-getagd humaan Aurora-A-eiwit wordt tot expressie gebracht in Escherichia coli en gezuiverd met een HisTrap HP-kolom. Gezuiverd recombinant humaan Aurora-B- en Aurora-C-eiwit worden gekocht. Experimenten worden in vijfvoud uitgevoerd in 96-well platen. De Aurora-A-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 0,1 ng per well Aurora-A in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 en 0,2 mM EDTA bij 30°C gedurende 40 minuten. Om de remmingswijze van MK-5108 voor Aurora-A te onderzoeken, worden de IC50-waarden van deze verbinding bepaald in aanwezigheid van verschillende ATP-concentraties. Vervolgens wordt de IC50-waarde uitgezet als functie van de ATP-concentratie om het effect van de ATP-concentratie op de IC50-waarde van deze chemische stof te analyseren. De Aurora-B-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 5,0 ng per well Aurora-B in 50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM Mg(OAc)2 en 0,2 mM EDTA bij 30 °C gedurende 20 minuten. De Aurora-C-assayreactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 1,0 μCi per well [γ-33P]-ATP, 15 ng per well Aurora-C in 10 mM MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM Mg(OAc)2, 1 mM (±) DTT en 1 mM EGTA bij 30°C gedurende 20 minuten. Nadat de kinasereacties zijn beëindigd door toevoeging van 2,0% fosforzuur, wordt Tetra-Kemptide of Kemptide op de MultiScreen-PH-plaat gevangen. Wells worden vijf keer gewassen met 0,64% fosforzuur en vervolgens gecontroleerd op radioactiviteit in een vloeistofscintillatieteller.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    HeLa-S3 cells

  • Concentraties

    0 μM -1 μM

  • Incubatietijd

    12 hours

  • Methode

    HeLa-S3 cells are synchronized at the G1-S phase boundary by double thymidine block with 2 mM thymidine. Cells are washed and seeded to 96-well cell culture plates. After 4 hours, an equal volume of medium containing MK-5108 is added to each well. Nocodazole (300 nM) is used as a 100% control. The cells are fixed overnight with cold methanol 12 hours after seeding. Then, the cells are stained with rabbit anti-phospho-histone H3 Ser28 antibody and then with anti-rabbit IgG-Cy5. Total nuclei are stained with 10 mg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole. Immunostained images are acquired using the IN Cell Analyzer1000 with ×10 objective lens. After acquisition of images, data are analyzed. The %pHH3-positive index is determined by measuring the %pHH3-positive cell counts per total nuclei counts for each sample, then by normalizing with respect to nocodazole-treated cells.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    SCID mice bearing HCT116 tumors

  • Doseringen

    30 mg/kg

  • Toediening

    Oral administration

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Klantproductvalidatie

<p>MK-5108 specifically inhibits AURKA and delays mitotic exit. (a) MK-5108 inhibits AURKA but not AURKB. Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 2 h. Nocodazole and MG132 were included to prevent mitotic exit. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232 were detected with immunoblotting. Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. (b) MK-5108 prevents activation of AURKA but not AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap any cells that entered mitosis. Mitotic cells were isolated by mechanical shake off. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer. (c) MK-5108 induces a G 2 /M delay. HeLa cells were treated with the indicated concentrations of MK-5108 for 24 h. DNA contents were analyzed with flow cytometry.</p>

Gegevens van [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Effect of a selective small molecule inhibitor of AURKA on MYCN protein levels and cell viability. Western blot for MYCN protein in KNS42 cells after exposure to 0.1, 0.5 and 2.5 uM VX-689 (triangle). GAPDH is used as a loading control.

Gegevens van [ Cancer Discov , 2013 , 10.1158/2159-8290.CD-12-0426 ]

P53 expression in the 14G2a mAb-treated IMR-32 cell line and after combinatorial treatment with MK-5108 inhibitor. P53 protein content was measured in whole cell-WCE (A), cytoplasmic-CE (C) and nuclear-NE (E) extracts at 2, 6, 24 and 48 h after 14G2a addition (40 ug/ml) into culture media of IMR-32 cells, and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Mean values of three separate experiments (盨EM) obtained for the 14G2a mAb-treated cells are shown as empty bars, and calculated versus control value, set as 1 (black baseline). ANOVA shows no statistically significant changes of P53 level in time in IMR-32 WCE [F(3, 9) = 1.35, p = 0.3181]. Statistically significant changes of P53 level in time were found in CE [F(3, 6) = 53.76, p = 0.0001], and in NE [F(3, 6) = 63.17, p = 0.0001], as compared to 2 h time point. P53 expression level was measured in whole cell-WCE (B), cytoplasmic-CE (D) and nuclear-NE (F) extracts at 2 and 24 h after the 14G2a mAb treatment alone (white bars with black stripes) or in combination with MK-5108 inhibitor (black bars with white stripes), and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Below each chart representative immunoblottings are presented; C-control cells; mAb-the 14G2a mAb-treated cells; I + mAb-MK-5108 inhibitor and the mAb-treated cells. P-values for t-test were as follow: p < 0.05 (*), p < 0.01 (**), p < 0.001 (***).

Gegevens van [ Cancer Lett , 2013 , 341(2), 248-64 ]

<p>HeLa cells were first synchronized to G1/S boundary with double thymidine<br />procedure.  After the release of the secondary thymidine, the indicated<br />concentrations of VX-689 were added to the cells for 8 hrs.  The cells were<br />then treated with nocodazole to trap the mitotic cells for 4 hrs and subse-<br />quently harvested by the mechanical shake off.  Cell free extracts were<br />prepared and further analyzed by SDS-PAGE and western blotting with the<br />indicated antibodies.  The disappearance of phospho-aurora A but not<br />phospho-aurora B strongly suggested that VX-689 is a highly selective<br />aurora A kinase inhibitor.</p>

, , Ken Ma Hong Kong University of Science & Technology

Sellecks MK-5108 Is geciteerd door 41 Publicaties

Establishment, characterization, and biobanking of 36 pancreatic cancer organoids: prediction of metastasis in resectable pancreatic cancer [ Cell Oncol (Dordr), 2024, 10.1007/s13402-024-00939-5] PubMed: 38619751
Inhibition of epigenetic and cell cycle-related targets in glioblastoma cell lines reveals that onametostat reduces proliferation and viability in both normoxic and hypoxic conditions [ Sci Rep, 2024, 14(1):4303] PubMed: 38383756
Exploiting ulnerabilities induced b recurrent mutations in chondrosarcoma and giant cell tumour of bone: therapeutic targeting of the altered epigenome and be [ Leiden University The Netherlands, 2023, ] PubMed: None
Spatially distinct inputs modulate the amount of active Mitotic-phase GAP to locally restrict RhoA signaling for successful cell division [ bioRxiv, 2023, 10.1101/2023.08.08.552464] PubMed: None
Revisiting the Resazurin-Based Sensing of Cellular Viability: Widening the Application Horizon [ Biosensors (Basel), 2022, 12(4)196] PubMed: 35448256
Culture and multiomic analysis of lung cancer patient-derived pleural effusions revealed distinct druggable molecular types [ Sci Rep, 2022, 12(1):6345] PubMed: 35428753
選択的オーロラキナーゼ A 阻害剤 TAS-119 を用いたオーロラキナーゼ A 阻害剤の薬剤感受性マーカーの探索 [ , 2022, ] PubMed: none
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Multifocal Organoid Capturing of Colon Cancer Reveals Pervasive Intratumoral Heterogenous Drug Responses [ Adv Sci (Weinh), 2021, e2103360] PubMed: 34918496
Size-Selective VAILase Proteolysis Provides Dynamic Insights into Protein Structures [ Anal Chem, 2021, 93(30):10653-10660] PubMed: 34291915

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.