Home PI3K/Akt/mTOR mTOR Remmer WAY-600

alleen voor onderzoeksdoeleinden

WAY-600 mTOR Remmer

Cat.nr.: S2689

WAY-600 is een potente, ATP-competitieve en selectieve remmer van mTOR met een IC50 van 9 nM; deze verbinding blokkeert mTORC1/P-S6K(T389) en mTORC2/P-AKT(S473) maar niet P-AKT(T308); het is selectiever voor mTOR dan PI3Kα (>100-voudig) en PI3Kγ (>500-voudig).
WAY-600 mTOR Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 494.59

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.34%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datasheet
99.34

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 494.59 Formule

C28H30N8O

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1062159-35-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
In vitro
Immune-complex kinase assay shows mTORC2-specific substrate His6-AKT or the mTORC1 substrate His6-S6K is dose dependently inhibited by WAY-600. This compound globally inhibits mTOR signaling and AKT function in cellular models dose dependently. It profoundly inhibits cap-dependent and global protein synthesis in MDA361, human breast cancer cells. This chemical shows antiproliferative effects in various cancer cell lines involving G1 cell cycle arrest and selective apoptosis. It down-regulate angiogenic factors, VEGF and HIF-1α, in U87MG, MDA361 and LNCap cells.
Kinase Assay
DELFIA-formaat van gezuiverd FLAG-TOR
De routinetesten met gezuiverd FLAG-TOR (FL en 3.5) worden als volgt uitgevoerd in 96-wells platen. Enzymen worden eerst verdund in kinase-assaybuffer (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerofosfaat, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM microcystine LR en 100 lg/mL BSA). Aan elk well wordt 12 μL van het verdunde enzym kort gemengd met 0.5 μL testremmer of controlevloeistof dimethylsulfoxide (DMSO). De kinasereactie wordt geïnitieerd door 12.5 μL kinase-assaybuffer met ATP en His6-S6K toe te voegen, om een finaal reactievolume van 25 μL te verkrijgen dat 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP en 1.25 μM His6-S6K bevat. De reactieplaat wordt 2 uur (lineair bij 1-6 uur) bij kamertemperatuur geïncubeerd met zacht schudden en vervolgens beëindigd door toevoeging van 25 μL stopbuffer (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA en 20 mM EGTA). De DELFIA-detectie van het gefosforyleerde (Thr-389) His6-S6K wordt bij kamertemperatuur uitgevoerd met behulp van een monoklonaal anti-P(T389)-p70S6K-antilichaam (1A5) gelabeld met Europium-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu per antilichaam). Vijfenveertig microliter van het beëindigde kinasereactiemengsel wordt overgebracht naar een MaxiSorp-plaat met 55 μL PBS. De His6-S6K mag 2 uur hechten, waarna de wells worden geaspireerd en eenmaal gewassen met PBS. Honderd microliter DELFIA-buffer met 40 ng/mL Eu-P(T389)-S6K-antilichaam wordt toegevoegd. De antilichaambinding wordt 1 uur voortgezet met zachte agitatie. De wells worden vervolgens geaspireerd en viermaal gewassen met PBS dat 0.05% Tween 20 (PBST) bevat. Honderd microliter DELFIA Enhancement-oplossing wordt aan elk well toegevoegd en de platen worden afgelezen in een PerkinElmer Victor model platenlezer. De verkregen gegevens worden gebruikt om de enzymatische activiteit en de enzymremming door potentiële remmers te berekenen.
Referenties