alleen voor onderzoeksdoeleinden

SC79 Akt activator

Cat.nr.S7863

SC79 is een hersendoordringbare Akt-fosforyleringsactivator en een remmer van Akt-PH-domeintranslocatie.
SC79 Akt activator Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 364.78

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: >97%
97

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
A549 Apoptosis assay 5 μmol/L SC80 blocks vitexin-induced apoptosis 30797236
HeLa Function assay decreased the number of autophagosomes induced by HVJ-E in cells 30534001
SH-SY5Y Function assay 10 μM 30 min pre-treatment with SC79 (10 μM) largely attenuated H2O2-induced survival reduction 29560097
Sertoli Function assay 5.5 µM 30 min up-regulate the PFOS-induced down-regulation of p-Akt1 T308 and p-Akt1 S473 28439067
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 364.78 Formule

C17H17ClN2O5

Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 305834-79-1 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CCOC(=O)C1=C(OC2=C(C1C(C#N)C(=O)OCC)C=C(C=C2)Cl)N

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 73 mg/mL (200.12 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 36 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
Akt
In vitro

SC79 onderdrukt PHAKTM-GFP-plasmamembraantranslocatie en versterkt de fosforylering van alle drie Akt-isoformen in HEK293-, HeLa-, HL60-, NB4- en HsSulton (B-cel)-cellen. Deze verbinding vermindert neuronale excitotoxiciteit en voorkomt beroerte-geïnduceerde neuronale celdood. Het herstelt de proliferatie van BRAT1-knockdowncellen en vermindert de productie van superoxide in mitochondriën van MitoSox-positieve cellen.

Kinase Assay
Cytosolische fosforylering van Akt
Hela-cellen worden 1 uur lang serumarm gemaakt en gedurende 30 minuten behandeld met IGF (100 ng/mL) of SC79 (4 μg/mL). Cellen worden gelyseerd in lysisbuffer die 250 mM sucrose, 20 mM HEPES, 10 mM KCl, 1,5 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA bevat, aangevuld met protease-inhibitoren. Cellen worden meerdere keren door een 25G-naald gehaald en gedurende 20 minuten op ijs bewaard. Op dit punt wordt het totale cellysaat afgenomen. Cellysaten worden gedurende 30 minuten gecentrifugeerd bij 100.000 g. Het supernatant wordt verzameld als de cytosolische fractie. Het pellet wordt gewassen met lysisbuffer en vertegenwoordigt de membraanfractie. Totaal cellysaat, cytosolische en membraanfracties worden gescheiden door SDS-PAGE en geanalyseerd op fosfo-Akt (S473), totale Akt, tubuline (cytosolische marker) en Orai1 (membraanmarker) met behulp van western blotting.
In vivo

In het muismodel van permanente focale cerebrale ischemie maakt SC79 (0,04 mg/g, i.p.) de cytosolische activering van Akt mogelijk en recapituleert het de primaire cellulaire functie van Akt-signalering, resulterend in een verhoogde neuronale overleving.

Referenties

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-mTOR / mTOR / pAKT / AKT / P62 / Bcl-2 / Bax / LC3 / Cleaved PARP p-Akt / Akt / p-GSK3β / GSK3β / β-catenin / Cyclin D1 p4EBP1 / 4EBP1 / pS6 / RPS6 / ESRP1 / ESRP2
S7863-WB1
30301881

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.