Home MAPK Raf remmer LY3009120

alleen voor onderzoeksdoeleinden

LY3009120 Raf remmer

Cat.nr.S7842

LY3009120 (DP-4978) is een krachtige pan-Raf-remmer met een IC50 van respectievelijk 44 nM, 31-47 nM en 42 nM voor A-raf, B-Raf en C-Raf in A375-cellen. Deze verbinding induceert autophagy. Fase 1.
LY3009120 Raf remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 424.51

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.08%
99.08

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
A375 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A375 cells after 72 hrs by resazurin assay, IC50=0.0092μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to EphA2 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.02μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to BRAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.031μM. 25965804
A375 Function assay 72 hrs Inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells assessed as inhibition of ERK phosphorylation measured after 72 hrs by ELISA assay, IC50=0.037μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ZAK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.039μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to CRAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.042μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ARAF in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.044μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to p38 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.061μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to FYN in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.091μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to MAP3K1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.098μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to EphB4 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.1μM. 25965804
HCT116 Function assay Inhibition of KRAS G13D mutant in human HCT116 cells assessed as inhibition of ERK phosphorylation by ELISA, IC50=0.15μM. 25965804
A375 Function assay In vivo inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells xenografted in po dosed NIH nude rat assessed as plasma concentration required to inhibit ERK phosphorylation by 50%, INH=0.165μM. 25965804
HCT116 Antiproliferative assay 67 hrs Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 67 hrs by resazurin assay, IC50=0.22μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to CSK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.29μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to SRC in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.31μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to ABL in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.38μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to IRAK1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.39μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to GCN2 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.45μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to JNK in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.47μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to MAP2K5 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.8μM. 25965804
A375 Function assay 15 mins Competitive binding affinity to KHS1 in human A375 cells after 15 mins in presence of ATP analogue, IC50=0.97μM. 25965804
HCT116 Function assay <100 nM Paradoxical activation of RAS/RAF/MEK signaling pathway in human HCT116 cells expressing wild type BRAF assessed as ERK phosphorylation at <100 nM 25965804
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to B-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.031μM. 30529543
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to C-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.042μM. 30529543
A375 Function assay Inhibition of desthiobiotin-ATP acylphosphate probe binding to A-Raf in human A375 cells by MS analysis, IC50=0.044μM. 30529543
MV4-11 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human MV4-11 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.1μM. 30529543
SK-MEL-2 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SK-MEL-2 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.2μM. 30529543
A375 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human A375 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.3μM. 30529543
SW579 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human SW579 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.9μM. 30529543
HT-29 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HT-29 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=0.9μM. 30529543
HepG2 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HepG2 cells after 72 hrs by Cell-Titer Glo assay, IC50=2.6μM. 30529543
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 424.51 Formule

C23H29FN6O

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1454682-72-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen DP-4978 Smiles CC1=CC(=C(C=C1C2=C(N=C3C(=C2)C=NC(=N3)NC)C)NC(=O)NCCC(C)(C)C)F

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 20 mg/mL (47.11 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
C-Raf
(Cell-free assay)
4.3 nM
BRAF(V600E)
(Cell-free assay)
5.8 nM
BRAF WT
(Cell-free assay)
15 nM
In vitro
LY3009120 remt de celgroei van A375- en HCT116-cellen met een IC50 van respectievelijk 9,2 en 220 μM. Deze verbinding remt de tyrosinekinase KDR met een IC50 van 3,9 μM.
Kinase Assay
Kinase-activiteitsmeting met behulp van KiNativ-assays
Verbindingen worden gescreend in A375-celysaten met behulp van de ATP-gebaseerde probe bij 5 µM. IC50-waarden worden gerapporteerd in micromolaire eenheden. Celpellets worden geresuspendeerd in vier volumes lysisbuffer [25 mM Tris pH 7,6, 150 mM NaCl, 1% CHAPS, 1% Tergitol NP-40 type, 1% v/v fosfatase-inhibitorcocktail II], gesoniceerd met een tipsonicator en gehomogeniseerd met een Dounce-homogenisator. Lysaten worden geklaard door centrifugatie bij 100.000 g gedurende 30 min. De geklaarde lysaten worden gefilterd door een 0,22 μM spuitfilter en gelfilterd in reactiebuffer [20 mM Hepes pH 7,8, 150 mM NaCl, 0,1% Triton X-100, 1% v/v fosfatase-inhibitorcocktail II]. Vervolgens wordt MnCl2 aan het lysaat toegevoegd tot een eindconcentratie van 20 mM vóór de inhibitorbehandeling en probe-labeling. De uiteindelijke inhibitorconcentraties die worden gebruikt voor IC50-bepalingen zijn 10, 1, 0,1 en 0,01 μM. ATP-competitie-experimenten worden uitgevoerd bij 1.000, 100, 10 en 1 μM ATP. Alle inhibitorbehandelingen worden uitgevoerd bij kamertemperatuur.
In vivo
Bij ratten met BRAF V600E ST019VR PDX-tumoren vertoont LY3009120 (15 of 30 mg/kg, p.o.) een dosisafhankelijke tumorgeremdheid. Bij naakte ratten met A375-xenografts vertoont een orale enkelvoudige dosisbehandeling met deze verbinding (3 tot 50 mg/kg, p.o.) een dosisafhankelijke remming van phospho-ERK, met een dosis voor 50% remming van phospho-ERK (EC50) van 4,36 mg/kg, met een plasmaconcentratie om 50% remming van phospho-ERK (EC50) te bereiken van 68,9 ng/mL of 165 nM.
Referenties

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Beclin-1 / Mcl-1 / LC3 / p62 p-EGFR / EGFR / p-BRAF / BRAF / p-CRAF / CRAF / p-MEK / MEK / p-AKT / AKT
S7842-WB2
28382170

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT02014116 Terminated
Neoplasms|Neoplasm Metastasis|Melanoma|Carcinoma Non-Small-Cell Lung|Colorectal Neoplasms
Eli Lilly and Company
 November 26 2013 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
I am trying to figure out solubility of this compound for in vivo studies. I need some details on the formulation and how it is made to dissolve the chemical?

Antwoord:
It can dissolve in 4% DMSO/30% PEG 300/5% Tween 80/ddH2O at 1 mg/ml clearly, and in 0.5% CMC Na at 30 mg/ml as a suspension.