Home MAPK Raf Remmer Avutometinib (Ro5126766, CH5126766)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) RAF/MEK-remmer

Cat.nr.S7170

Avutometinib(RO5126766,CH5126766,VS 6766, CKI-27, R-7304, RG-7304) is een dubbele RAF/MEK-remmer met een IC50 van respectievelijk 8,2 nM, 19 nM, 56 nM en 160 nM voor BRAF V600E, BRAF, CRAF en MEK1. Fase 1.
Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) Raf Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 471.46

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.54%
99.54

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HCT116 cell Function assay 96 h Inhibition of human HCT116 cell growth after 96 hrs by counting kit-8 analysis, IC50=0.04 μM 24900832
human C32 cells Growth inhibition assay Growth inhibition of human C32 cells harboring R-Raf V600E mutant, IC50=0.047 μM 24900832
human PANC1 cells Function assay 10 μM 1 h Inhibition of MEK1 in human PANC1 cells assessed as reduction in pErk1/2 level at 10 uM after 1 hr by Western blotting analysis 25766633
human A549 cells Function assay 10 μM 1 h Inhibition of MEK1 in human A549 cells assessed as reduction in pErk1/2 level at 10 uM after 1 hr by Western blotting analysis 25766633
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 471.46 Formule

C21H18FN5O5S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 946128-88-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen RO5126766,CH5126766,VS 6766, CKI-27, R-7304, RG-7304 Smiles CC1=C(C(=O)OC2=C1C=CC(=C2)OC3=NC=CC=N3)CC4=C(C(=NC=C4)NS(=O)(=O)NC)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 94 mg/mL (199.38 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
BRAF V600E
(cell-free assay)
8.2 nM
BRAF
(cell-free assay)
19 nM
CRAF
(cell-free assay)
56 nM
MEK1
(cell-free assay)
160 nM
In vitro

In HCT116 KRAS-mutante colorectale kankercellen vermindert CH5126766 significant de niveaus van gefosforyleerd MEK en gefosforyleerd ERK. CH5126766 remt RAF-kinase door te binden aan MEK1 en zorgt ervoor dat MEK een dominant negatieve remmer van RAF wordt. In Raf- of RAS-mutante cellijnen SK-MEL-28, SK-MEL-2, MIAPaCa-2, SW480, HCT116 en PC3-cellen remt CH5126766 de celgroei met een IC50 van respectievelijk 65, 28, 40, 46 en 277 nM. In twee melanoomcellijnen met de BRAF V600E- of NRAS-mutatie induceert RO5126766 G1-celcyclusarrest gepaard gaande met opregulatie van de CDK-remmer p27 en neerregulatie van cycline D1.

Kinase Assay
MEK- en RAF-kinase-enzymassays
De remmende activiteiten tegen CRAF-, BRAF- of BRAF V600E-enzymen worden gemeten door kwantificatie van fosforylering van inactieve K97R MEK1 [MEK1] door recombinante RAF-eiwitten [BRAF: B-RAF wt, BRAF V600E: B-RAF V600E of CRAF: Raf-1] met Europium-anti-MEK1/2 (pSer218/222) antilichaam en SureLight allophycocyanine-anti-6his antilichaam door meting van tijdopgeloste fluorescentie (TRF). Remming van MEK1 wordt geëvalueerd door een gekoppelde assay met actief MEK1 (MEK1 S218E/S222E) en inactief gedefosforyleerd ERK2 (MAP kinase 2/Erk 2). De fosforylering van een fluorescent gelabeld peptidesubstraat (FAM-Erktide, IPTTPITTTYFFFK-5FAM-COOH) door ERK2 wordt gekwantificeerd met behulp van de IMAP FP Screening Express Kit.
In vivo

In een HCT116 (G13D KRAS) muisxenograftmodel remt CH5126766 (25 mg/kg, p.o.) de ERK-signaalafgifte effectiever dan een standaard MEK-remmer die MEK-fosforylering induceert en heeft het een potente antitumoractiviteit. In de HCT116 (K-ras) en COLO205 (B-raf) mutante xenografts veroorzaakt CH5126766 (0,3 mg/kg) significante dalingen in [18 F]FDG-opname. In het SK-MEL-2 xenograftmodel onderdrukt RO5126766 ook de tumorgroei.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-MEKR / MEK / p-ERK / ERK / p27 / ppRB / pRB / Cyclin D1 / Cyclin E
S7170-WB1
25422890

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT06104488 Recruiting
Refractory Cancer|CNS Tumors|CNS Tumor Adult|CNS Tumor Childhood|MAP Kinase Family Gene Mutation|NF1|Plexiform Neurofibroma|Low-grade Glioma|Optic Pathway Gliomas|Neuroblastoma|Primary Brain Tumor|Solid Tumor|Solid Tumor Adult|Solid Carcinoma|Central Nervous System Tumor
Memorial Sloan Kettering Cancer Center
 October 20 2023 Phase 1
NCT05375994 Recruiting
Non Small Cell Lung Cancer|KRAS Activating Mutation|Advanced Cancer|Metastatic Cancer|Malignant Neoplasm of Lung|Malignant Neoplastic Disease
Verastem Inc.|Mirati Therapeutics Inc.
 August 1 2022 Phase 1|Phase 2