Name: RAF265 (CHIR-265)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2161
Rating: 5 (24 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.98%

99.98

Gerelateerde doelwitten	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Overig Raf Inhibitoren	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 PLX8394 (Plixorafenib, FORE8394)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
SK-MEL-28	Growth inhibition assay			Growth inhibition of SK-MEL-28 cells, IC50=0.14μM.	21576023
MALME-3M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of MALME-3M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of A375M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human A375 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
Malme-3M	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human Malme-3M cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
WM-1799	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human WM-1799 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
MALME-3M	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human MALME-3M cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
A375	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human A375 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
WM1799	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human WM1799 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
SK-MEL-28	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human SK-MEL-28 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.14μM.	26396681
SK-MEL-28	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human SK-MEL-28 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.16μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg		fCmin in mouse xenografted with human A375M cells at 100 mg/kg, po q2d, fCmin=0.5μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q24 after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q2d after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	30 to 100 mg/kg	4 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 30 to 100 mg/kg, po q2d measured after 4 hrs post-third dose by Western blot analysis	26396681
A375M	Antitumor assay	10 to 100 mg/kg	30 days	Antitumor activity against human A375M cells xenografted in mouse assessed as tumor regression at 10 to 100 mg/kg, po q2d measured up to 30 days	26396681
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for LAN-5 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=9.19μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=14.64μM.	ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	518.41	Formule	C₂₄H₁₆F₆N₆O	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	927880-90-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CN1C2=C(C=C(C=C2)OC3=CC(=NC=C3)C4=NC=C(N4)C(F)(F)F)N=C1NC5=CC=C(C=C5)C(F)(F)F

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (192.89 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 33 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	30.000mg/ml (57.87mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	VEGFR2 (Cell-free assay) 30 nM(EC50) B-Raf (Cell-free assay) 3 nM-60 nM
In vitro	RAF265 (CHIR-265) remt C-Raf, wildtype B-Raf en mutant (V600E) B-Raf. Deze verbinding blokkeert effectief de fosforylering van Raf's downstream substraten MEK en ERK in cellen en doodt ook melanoom- en colorectale kankercellijnen die B-Raf-mutaties bevatten, onafhankelijk van de PTEN-mutatiestatus. Raf kinase-remming door dit middel in mutante B-Raf melanoom-cellijnen veroorzaakt celcyclusarrest en induceert apoptosis, wat het effect van Raf RNAi in deze cellen nabootst. Het remt ook potent de fosforylering van VEGFR2 en de proliferatie van VEGF-gestimuleerde hMVEC. In HT29- en MDAMB231-cellen vertoont deze chemische stof remmende activiteit met een IC20 van respectievelijk 1 tot 3 μM en een IC50 van 5 tot 10 μM. Hoewel het leidt tot een significante afname van de clonogene overleving in alle geteste cellijnen, wat betekent dat deze verbinding een dominant effect induceert op de clonogene overleving. Toevoeging van dit middel aan RAD001 in HCT116-cellen zou kunnen leiden tot een matig verminderde AKT-, S6-eiwit- en 4EBP1-fosforylering. Het vermindert de eiwitspiegel van Bcl-2 aanzienlijk en is sterk remmend in CM- en NCI-H727-cellen, terwijl het geen effect heeft op de TRAIL-gevoeligheid van BON1- en GOT1-cellen. Proteïnekinase D3 (PRKD3) dat bij knock-down de celdoding door deze verbinding in A2058-melanoomcellen zou kunnen verbeteren, wat de reactivering van MAPK-signalering voorkomt, PARP-splitsing induceert, caspase-activiteit verhoogt, de celcyclusprogressie onderbreekt en de kolonieformatie remt.
Kinase Assay	Testprotocol
Kinase Assay	Raf en Mek worden gecombineerd in 2 × eindconcentraties in assaybuffer (50 mM Tris, pH 7,5, 15 mM MgCl₂, 0,1 mM EDTA en 1 mM DTT) en gedoseerd met 15 μL per putje in polypropyleen assayplaten. Achtergrondniveaus worden bepaald in putjes die Mek en DMSO bevatten zonder Raf. Aan de Raf/Mek-bevattende putjes wordt 3 μL van 10 × van deze verbinding, verdund in 100% DMSO, toegevoegd. De RAF kinase-activiteitsreactie wordt gestart door de toevoeging van 12 μL per putje van 2,5 × ³³P-ATP verdund in assaybuffer. Na 45-60 minuten worden de reacties gestopt met de toevoeging van 70 μL stopreagens (30 mM EDTA). Filtratieplaten worden 5 minuten voorbevochtigd met 70% ethanol en vervolgens gespoeld door filtratie met wasbuffer. Monsters (90 μL) uit de reactieputjes worden vervolgens overgebracht naar de filtratieplaten. De filtratieplaten worden 6 × gewassen met wasbuffer met behulp van een Millipore filtratieapparaat. De platen worden gedroogd en 100 μL per putje scintillatievloeistof wordt toegevoegd. De CPM wordt vervolgens bepaald met behulp van een Wallac Microbeta 1450-lezer.
In vivo	RAF265 (CHIR-265) vertoont 71% tot 72% TVI% (tumorvolume-inhibitiepercentage) in HCT116-xenografts bij 12 mg/kg. De combinatie van deze verbinding en RAD001 vertoont een verbeterde antitumoractiviteit met een verhoogde T10 (tijd om een relatief tumorvolume van 10 keer het initi jele tumorvolume te bereiken) en tumorgroeivertraging. De combinatie van RAD001 en deze chemische stof verbetert ook significant de activering van caspase-3 in HCT116 en MDAMB231, maar niet in A549-xenografts. Deze verbinding remt de FDG (2-deoxy-2-[¹⁸F]fluoro-d-glucose)-accumulatie en verlaagt de tumorvolumes in A375M-xenografts bij een orale dosis van 100 mg/kg.
Referenties	[1] http://www.aacrmeetingabstracts.org/cgi/content/meeting_abstract/2008/1_Annual_Meeting/4876 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20124452/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21317202/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21527556/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21390189/

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT01352273	Completed	Advanced Solid Tumors	Array Biopharma now a wholly owned subsidiary of Pfizer\|Array BioPharma	June 2011	Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

RAF265 (CHIR-265) Raf remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 518.41