Name: Agerafenib (CEP-32496)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S8015
Rating: 5 (6 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S801501 DMSO]9 mg/mL]false]Water]Insoluble]false]Ethanol]Insoluble]false Zuiverheid: 99.19%

Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
COA
NMR
HPLC
SDS
Datasheet

99.19

Gerelateerde doelwitten	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Overig Raf Inhibitoren	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 RAF265 (CHIR-265)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of LCK in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of PDGFRbeta in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cKit in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Ret in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.002μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of Abl1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.003μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of VEGFR2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.008μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CSF1R in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.009μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EPHA2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of BRAF V600E mutant in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.014μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of EGFR in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.022μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of wild type BRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.036μM.	22168626
COLO205	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO205 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.036μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of CRAF in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.039μM.	22168626
A375	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human A375 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, IC50=0.078μM.	22168626
A375	Function assay		2 hrs	Inhibition of BRAF V600E mutant-mediated MEK phosphorylation in human A375 cells after 2 hrs, IC50=0.082μM.	22168626
HCC827	Function assay			Displacement of [3H]-cyclopamine from SMO V404M mutant in gefitinib resistant human HCC827 cells by scintillation counting, Ki=0.1878μM.	28787156
COLO679	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human COLO679 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.211μM.	22168626
HT144	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HT144 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.228μM.	22168626
SK-MEL-28	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human SK-MEL-28 cells expressing BRAF V600E mutant after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.454μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of cMET in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=0.513μM.	22168626
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human HCT116 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=0.669μM.	22168626
Hs578T	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human Hs578T cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.736μM.	22168626
DU145	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human DU145 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=2.911μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of JAK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=4.7μM.	22168626
PC3	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human PC3 cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.257μM.	22168626
LNCAP	Cytotoxicity assay		72 hrs	Cytotoxicity against human LNCAP cells expressing wild type BRAF after 72 hrs by cell titer blue assay, EC50=6.631μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK1 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=7.1μM.	22168626
HEK293	Function assay		1 hr	Inhibition of MEK2 in human HEK293 cells after 1 hr by competition binding assay, Kd=8.3μM.	22168626
COLO205	Antitumor assay	10 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 10 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	30 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 30 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
COLO205	Antitumor assay	100 mg/kg	14 days	Antitumor activity against human COLO205 cells xenografted in athymic nude mouse at 100 mg/kg, po bid for 14 days	22168626
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	517.46	Formule	C₂₄H₂₂F₃N₅O₅	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1188910-76-0	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	RXDX-105			Smiles	CC(C)(C1=CC(=NO1)NC(=O)NC2=CC(=CC=C2)OC3=NC=NC4=CC(=C(C=C43)OC)OC)C(F)(F)F

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 9 mg/mL (17.39 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	15% Captisol Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	10.000mg/ml (19.33mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, take 10 mg of this product, add it to 1 ml of 15% Captisol clear solution, and mix evenly to form a uniform suspension. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	High binding affinity for both BRAF (V600E) mutation and related c-Raf, but no significant affinity for other kinases of MAPK pathway.
Targets/IC₅₀/Ki	c-Kit 2 nM(Kd) LCK 2 nM(Kd) PDGFRβ 2 nM(Kd) RET 2 nM(Kd) Abl1 3 nM(Kd) VEGFR2 8 nM(Kd) CSF-1R 9 nM(Kd) B-Raf (V600E) 14 nM(Kd) EphA2 14 nM(Kd) EGFR 22 nM(Kd) B-Raf 36 nM(Kd) C-Raf 39 nM(Kd) c-Met 513 nM(Kd)
In vitro	Agerafenib (CEP-32496) remt de proliferatie van A375-cellen (BRAF^V600E) met een EC50 van 78 nM. Het vertoont een gevoeliger cytotoxiciteit voor tumorcellijnen (A375, SK-MEL-28, Colo-205, Colo-679 en HT-144) die mutante BRAF tot expressie brengen dan voor die welke wildtype BRAF tot expressie brengen (HCT116, Hs578T, LNCaP, DU145 en PC-3). Deze verbinding remt de mitogeen-geactiveerde proteïne (MAP)/extracellulaire signaal-gereguleerde (ER) kinase (MEK)-fosforylering (pMEK) in menselijke melanoom (A375) en colorectale kanker (Colo-205) cellijnen met IC50-waarden van respectievelijk 78 nM en 60 nM.
Kinase Assay	Bindingsassay
Kinase Assay	Kinasen worden geproduceerd en weergegeven op T7-fagen of door expressie in HEK-293-cellen en getagd met DNA. Bindingsreacties worden bij kamertemperatuur gedurende 1 uur uitgevoerd en de fractie van kinase die niet gebonden is aan de testverbinding wordt bepaald door vangst met een geïmmobiliseerde affiniteitsligand en kwantificering door kwantitatieve PCR. Elke kinase wordt individueel getest tegen Agerafenib (CEP-32496). Kd-waarden voor deze verbinding worden bepaald met behulp van elf seriële 3-voudige verdunningen en gepresenteerd als gemiddelde waarden van dubbele experimenten. De variabiliteit tussen individuele waarden is minder dan 2-voudig.
In vivo	Agerafenib (CEP-32496) vertoont een goede stabiliteit in microsomale preparaten van muizen-, honden-, apen- en mensenlever, met gemeten intrinsieke klaringswaarden van <23 (μL/min)/mg en t_1/2 > 60 min in alle assays. Dit middel (30 mg/kg, oraal, BID) vertoont tumorstasis en een 40% incidentie van gedeeltelijke tumorregressies (PR's) in het Colo-205 xenograft muismodel, terwijl de 100 mg/kg dosisgroep zowel tumorstasis als een 80% incidentie van PR's vertoont. Het (30 mg/kg, oraal, BID) leidt tot een 50% en 75% remming van genormaliseerde pMEK in tumorlysaten op respectievelijk 2 uur en 6 uur na toediening, terwijl een dosis van 55 mg/kg resulteert in een 75% tot 57% remming van pMEK van 2 uur tot 10 uur na toediening in het Colo-205 xenograft muismodel. Het is oraal biologisch beschikbaar in meerdere preklinische soorten (>95% bij ratten, honden en apen). Dit middel (100 mg/kg) resulteert in remming van pMEK en pERK en aanhoudende tumorstasis en regressies in BRAF(V600E) coloncarcinoom xenografts in naakte muizen.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22168626/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22319199/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Growth inhibition assay	Cell viability		31695841
Western blot	p-RET / RET / p-PLCγ / PLCγ / p-ERK / ERK / p-MEK / MEK		28011461

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Agerafenib (CEP-32496) Raf remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 517.46