Home Proteases BACE Remmer LY2811376

alleen voor onderzoeksdoeleinden

LY2811376 BACE Remmer

Cat.nr.: S1528

LY2811376 is de eerste oraal beschikbare niet-peptidische β-secretase(BACE1) remmer met een IC50 van 239 nM-249 nM, die de Aβ-secretie verlaagt met een EC50 van 300 nM, en aantoonde een 10-voudige selectiviteit te hebben voor BACE1 boven BACE2, en meer dan 50-voudige remming van andere aspartische Proteases waaronder cathepsine D, pepsine of renine. Fase 1.
LY2811376 BACE Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 320.36

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.99%
99.99

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HEK293 cells Function assay Inhibition of BACE1 in HEK293 cells expressing APPswedish mutant assessed as inhibition of amyloid beta production by ELISA, EC50=0.3 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 320.36 Formule

C15H14F2N4S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1194044-20-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC1(CCSC(=N1)N)C2=C(C=C(C(=C2)C3=CN=CN=C3)F)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

Ethanol : 64 mg/mL

DMSO : 16 mg/mL (49.94 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Kenmerken
Approximately 10-fold selectivity toward BACE1 over BACE2.
Targets/IC50/Ki
BACE1
239 nM-249 nM
Aβ
~300 nM(EC50)
In vitro
LY2811376 demonstrates concentration-dependent inhibition of hBACE1 with an IC50 of 239 and 249 nM against a small synthetic peptide or a larger chimeric protein substrate, respectively. This compound treatment yields a concentration-dependent decrease in Aβ secretion in APP-overexpressing HEK293 cells. It inhibits Aβ secretion with EC50 of ~100 nM in primary neuronal cultures of PDAPP transgenic mouse.
Kinase Assay
Bepaling van enzymatische efficiëntie
De stamoplossing voor elk FRET-peptidesubstraat wordt bereid op 30 mM in dimethylsulfoxide (DMSO). De huBACE1:Fc muBACE1:Fc-bereiding wordt geconcentreerd via YM10 Centricon. tot een uiteindelijke concentratie van ten minste 7 mg/mL. De optimale enzymconcentratie voor elk FRET-peptidesubstraat wordt individueel bepaald bij 30 μM FRET-peptidesubstraat in 50 mM ammoniumacetaat, pH 4,6, 1 mg/mL BSA en 1 mM Triton X-100. De enzymatische efficiëntie (kcat /Km) van een van de BACE1-orthologen ten opzichte van individuele FRET-peptidesubstraten bij 15, 30 en 100 μM wordt bepaald onder de optimale omstandigheden voor elk substraat. De voortgang van de reactie wordt gevolgd door een toename van het emissiesignaal bij 420 nm te meten met een excitatiegolflengte ingesteld op 320 nm, met behulp van een GEMINI-fluorescentieplaatlezer. Aminoacid geconjugeerd aminobenzoaat wordt gebruikt om het emissiesignaal in de relatieve fluorescentie-eenheden om te zetten in de molaire concentratie van het in het reactiemengsel gegenereerde product. De beginfase van de tijdsafhankelijkheidscurve wordt gefit met een lineaire functie waarvan de helling wordt gebruikt om de beginsnelheid voor huBACE1:Fc ten opzichte van elk peptidesubstraat te berekenen. De kcat /Km-waarden worden berekend uit de lineaire afhankelijkheid van de beginsnelheid van de concentratie van elk peptide.
In vivo
Administration of LY2811376 (10, 30, and 100 mg/kg doses) results in dose-dependent, significant reductions in Aβ, as well as sAPPβ and C99, the proximal cleavage products of APP proteolysis by BACE1 in APPV717F mouse model of Aβ pathology. After treatment with this compound (5 mg/kg), reductions in Aβ1-x are observed in plasma, with a maximal 85% reduction observed from 4 to 12 h after dosing in beagle dogs.
Referenties

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2009-07-15)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT00838084 COMPLETED
Alzheimer's Disease
Eli Lilly and Company
 2008-12 PHASE1
NCT00838084 Completed
Alzheimer''s Disease
Eli Lilly and Company
 2008-12 Phase 1