Home PI3K/Akt/mTOR Akt inhibitor AT7867

alleen voor onderzoeksdoeleinden

AT7867 Akt inhibitor

Cat.nr.: S1558

AT7867 is a potent ATP-competitive inhibitor of Akt1/2/3 and p70S6K/PKA with IC50 of 32 nM/17 nM/47 nM and 85 nM/20 nM in cell-free assays, respectively; this compound shows little activity outside the AGC kinase family.
AT7867 Akt inhibitor Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 337.85

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.97%
99.97

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 337.85 Formule

C20H20ClN3

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 857531-00-1 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CNCCC1(C2=CC=C(C=C2)C3=CNN=C3)C4=CC=C(C=C4)Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 68 mg/mL (201.27 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Akt2
(Cell-free assay)
17 nM
PKA
(Cell-free assay)
20 nM
Akt1
(Cell-free assay)
32 nM
Akt3
(Cell-free assay)
47 nM
p70 S6K
(Cell-free assay)
85 nM
RSK1
(Cell-free assay)
>100 nM
In vitro
AT7867 also inhibits structurally related AGC kinases p70S6K and PKA with IC50 of 20 nM and 85 nM, respectively. This compound shows ATP-competitive activity to Akt2 with Ki of 18 nM. It exhibits antiproliferation in cell lines with PTEN or PIK3CA mutations and shows great potent to MES-SA, MDA-MB-468, MCF-7, HCT116 and HT29 with IC50 of 0.94 μM, 2.26 μM, 1.86 μM, 1.76 μM and 3.04 μM, respectively. This chemical also suppresses the cell growth of U87MG, PC-3 and DU145 cells with IC50 of 8.22 μM, 10.37 μM and 11.86 μM, respectively. It suppresses Akt activity by inhibiting phosphorylation of GSK-3β in human tumor cells with IC50 of 2-4 μM. This compound also induces the phosphorylation of the following Akt direct substrates including proapoptotic transcription factors FKHR (FoxO1a), FKHRL1 (FoxO3a) and the downstream target S6RP in U87MG cells.
Kinase Assay
In vitro kinase assays
Kinase assays voor Akt2, PKA, p70S6K en CDK2/cycline A worden allemaal uitgevoerd in een radiometrisch filterbindingsformaat. Assays worden opgezet in aanwezigheid van AT7867. Voor Akt2 worden het Akt2-enzym en 25 μM Aktide-2T peptide (HARKRERTYSFGHHA) geïncubeerd in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM natriumorthovanadaat, 1 mM DTT, 10 μg/mL runder serumalbumine en 30 μM ATP (1,16 Ci/mmol) gedurende 4 uur. Voor PKA worden het PKA-enzym en 50 μM peptide (GRTGRRNSI) geïncubeerd in 2 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM orthovanadaat, 1 mM DTT en 40 μM ATP (0,88 Ci/mmol) gedurende 20 minuten. Voor p70S6K worden het p70S6K-enzym en 25 μM peptidesubstraat (AKRRRLSSLRA) geïncubeerd in 10 mM MOPS (pH 7), 0,2 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 0,01% β-mercaptoethanol, 0,1 mg/mL runder serumalbumine, 0,001% Brij-35, 0,5% glycerol en 15 μM ATP (2,3 Ci/mmol) gedurende 60 min. Voor CDK2 worden het CDK2/cycline A-enzym en 0,12 μg/mL histon H1 geïncubeerd in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-glycerofosfaat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM natriumorthovanadaat, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL runder serumalbumine en 45 μM ATP (0,78 Ci/mmol) gedurende 4 uur. Assayreacties worden gestopt door toevoeging van een overmaat orthofosforzuur, en het gestopte reactiemengsel wordt vervolgens overgebracht naar Millipore MAPH filterplaten en gefilterd. De platen worden vervolgens gewassen, scintillant wordt toegevoegd, en radioactiviteit wordt gemeten door scintillatietelling op een Packard TopCount. IC50-waarden worden berekend uit replicatiecurven met behulp van GraphPad Prism-software. Akt1- en Akt3-enzymassays worden uitgevoerd.
In vivo
AT7867 shows bioavailability of 44% in mice by p.o. route. This compound could increase the cleaved PARP in MES-SA xenografts at 20 mg/kg i.p. or 90 mg/kg p.o.. It significantly inhibits the tumor growth in MES-SA xenografts or U87MG xenografts with T/C of 0.37 and 0.51, respectively.
Referenties