Home PI3K/Akt/mTOR GSK-3 remmer SB415286

alleen voor onderzoeksdoeleinden

SB415286 GSK-3 remmer

Cat.nr.S2729

SB415286 is een potente GSK3α-remmer met een IC50/Ki van 78 nM/31 nM met een even effectieve remming van GSK-3β. Deze verbinding veroorzaakt MM-celgroeistop en apoptosis.
SB415286 GSK-3 remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 359.72

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S272901 DMSO]72 mg/mL]false]Ethanol]72 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.74%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datasheet
99.74

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
CHO cells Function assay Stimulation of glycogen synthase in CHO cells expressing human insulin receptor, EC50=45.6 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 359.72 Formule

C16H10ClN3O5

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 264218-23-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC=C(C(=C1)C2=C(C(=O)NC2=O)NC3=CC(=C(C=C3)O)Cl)[N+](=O)[O-]

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 72 mg/mL (200.15 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 72 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
GSK-3α
(Cell-free assay)
78 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
~78 nM
In vitro

SB 415286 remt GSK3α op een ATP-competitieve manier met een Ki van 31 nM en vertoont vergelijkbare potentie tegen GSK3β. Deze verbinding heeft weinig of geen activiteit tegen 24 andere proteïnekinasen met een IC50 > 10 μM. Het stimuleert glycogeensynthese in de Chang humane levercellijn met een EC50 van 2,9 μM, en induceert expressie van een β-catenine-LEF/TCF gereguleerd reportergen in HEK293-cellen. Het beschermt zowel centrale als perifere zenuwstelselneuronen in kweek tegen celdood geïnduceerd door verminderde PI3-kinase pathway-activiteit op een concentratie-afhankelijke manier, wat gecorreleerd is met remming van GSK-3-activiteit en modulatie van GSK-3 substraten tau en β-catenine. In L6-myotubes induceert deze chemische stof een veel grotere activering van GS (6,8-voudig) vergeleken met die veroorzaakt door insuline (4,2-voudig) of Li (4-voudig). Deze verbinding (10 μM) remt rapamycine-geïnduceerde neerwaartse regulatie van cycline D1, en blokkeert rapamycine en -geïnduceerde apoptosis, wat een cruciale rol suggereert voor GSK3β in rapamycine-gemedieerde -sensitisatie. Het voorkomt coxsackievirus-geïnduceerde celdood op een dosisafhankelijke manier via stabilisatie van β-catenine. Deze chemische stof oefent een beschermend effect uit op waterstofperoxide-geïnduceerde celdood in B65 rat neuroblastoomcellen en neuronen, terwijl lithium de toxische effecten van waterstofperoxide niet vermindert. De behandeling ervan versterkt TRAIL- en CH-11-geïnduceerde apoptosis in HepG2-cellen. Remming van GSK-3 door deze verbinding veroorzaakt multiple myeloom (MM) celgroeistop en apoptosis door activering van de intrinsieke pathway. Het vermindert de levensvatbaarheid van Neuro-2A-cellen en induceert de accumulatie van cellen in de G2/M-fase van de celcyclus en daaropvolgende apoptosis.

Kinase Assay
GSK-3 activiteitsbepaling
GSK-3 kinase activiteit wordt gemeten, in aanwezigheid van verschillende concentraties SB 415286, in een reactiemengsel met de volgende eindconcentraties: 1 nM humaan GSK3α of konijn GSK3α; 50 mM MOPS pH 7.0; 0.2 mM EDTA; 10 mM Mg-acetaat; 7.5 mM L-mercaptoethanol; 5% (w/v) glycerol; 0.01% (w/v) Tween-20; 10% (v/v) DMSO; 28 μM GS-2 peptide substraat. De GS-2 peptide sequentie komt overeen met een regio van glycogeen synthase die gefosforyleerd wordt door GSK-3. De test wordt geïnitieerd door de toevoeging van 0.34 μCi [33P]γ-ATP (IC50 bepalingen) of 2.7 μCi [33P]γ-ATP (Ki bepalingen). De totale ATP concentratie is 10 μM (IC50 bepalingen) of varieerde van 0 tot 45 μM (Ki bepalingen). Na 30 minuten incubatie bij kamertemperatuur wordt de test gestopt door de toevoeging van een derde testvolume van 2.5% (v/v) H3PO4 met 21 mM ATP. Monsters worden gespot op P30 fosfocellulosematten en deze worden zes keer gewassen in 0.5% (v/v) H3PO4. De filtermatten worden verzegeld in monstervoorraadzakken die Wallac betaplate scintillatievloeistof bevatten. De incorporatie van 33P in het substraatpeptide wordt bepaald door het tellen van de matten in een Wallac microbeta scintillatieteller.
In vivo

Toediening van SB 415286 (~10 mg/kg tweemaal daags) vermindert de omvang en de mate van de door trinitrobenzeensulfonzuur (TNBS) veroorzaakte colonontsteking bij de rat, en vermindert de daling van het lichaamsgewicht, wat verband houdt met de downregulatie van NF-κB-activiteit, betrokken bij de generatie van pro-inflammatoire mediatoren. Behandeling met deze verbinding met 1 mg/kg vertraagt de groei van Neuro-2A-cellen in vivo in naakte muizen significant.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15753396/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15905881/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16314851/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18342477/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18938143/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20920357/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21161565/

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot β-catenin / XIAP / Bcl-2 GSK-3β / p53
S2729-WB1
21161565

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.