Home PI3K/Akt/mTOR GSK-3 Remmer SB415286

alleen voor onderzoeksdoeleinden

SB415286 GSK-3 Remmer

Cat.nr.: S2729

SB415286 is een potente GSK3α-remmer met een IC50/Ki van 78 nM/31 nM met een even effectieve remming van GSK-3β. Deze verbinding veroorzaakt MM-celgroeistop en apoptosis.
SB415286 GSK-3 Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 359.72

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: S272901 DMSO]72 mg/mL]false]Ethanol]72 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.74%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datasheet
99.74

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
CHO cells Function assay Stimulation of glycogen synthase in CHO cells expressing human insulin receptor, EC50=45.6 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 359.72 Formule

C16H10ClN3O5

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 264218-23-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC=C(C(=C1)C2=C(C(=O)NC2=O)NC3=CC(=C(C=C3)O)Cl)[N+](=O)[O-]

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 72 mg/mL (200.15 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 72 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
GSK-3α
(Cell-free assay)
78 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
~78 nM
In vitro

SB 415286 inhibits GSK3α in an ATP competitive manner with Ki of 31 nM and shows similar potency against GSK3β. This compound has little or no activity against 24 other protein kinases with IC50 > 10 μ M. It stimulates glycogen synthesis in the Chang human liver cell line with EC50 of 2.9 μM, and induces expression of a β-catenin-LEF/TCF regulated reporter gene in HEK293 cells. It protects both central and peripheral nervous system neurones in culture from death induced by reduced PI3-kinase pathway activity in a concentration-dependent manner, which is correlated with inhibition of GSK-3 activity and modulation of GSK-3 substrates tau and β-catenin. In L6 myotubes, this chemical induces a much greater activation of GS (6.8-fold) compared to that elicited by insulin (4.2-fold) or Li (4-fold). This compound (10 μM) inhibits rapamycin-induced down-regulation of cyclin D1, and blocks rapamycin and -induced apoptosis, suggesting a critical role for GSK3β in rapamycin-mediated -sensitization. It prevents coxsackievirus-induced cell death in a dose-dependent manner via stabilization of β-catenin. This chemical exerts a protective effect on hydrogen peroxide-induced cell death in B65 rat neuroblastoma cells and neurons, while lithium does not attenuate the toxic effects of hydrogen peroxide. Its treatment potentiates TRAIL- and CH-11-induced apoptosis in HepG2 cells. Inhibition of GSK-3 by this compound causes multiple myeloma (MM) cell growth arrest and apoptosis through the activation of the intrinsic pathway. It decreases the viability of Neuro-2A cells, and induces the accumulation of cells in the G2/M phase of the cell cycle and subsequent apoptosis.

Kinase Assay
GSK-3 activiteitsbepaling
GSK-3 kinase activiteit wordt gemeten, in aanwezigheid van verschillende concentraties SB 415286, in een reactiemengsel met de volgende eindconcentraties: 1 nM humaan GSK3α of konijn GSK3α; 50 mM MOPS pH 7.0; 0.2 mM EDTA; 10 mM Mg-acetaat; 7.5 mM L-mercaptoethanol; 5% (w/v) glycerol; 0.01% (w/v) Tween-20; 10% (v/v) DMSO; 28 μM GS-2 peptide substraat. De GS-2 peptide sequentie komt overeen met een regio van glycogeen synthase die gefosforyleerd wordt door GSK-3. De test wordt geïnitieerd door de toevoeging van 0.34 μCi [33P]γ-ATP (IC50 bepalingen) of 2.7 μCi [33P]γ-ATP (Ki bepalingen). De totale ATP concentratie is 10 μM (IC50 bepalingen) of varieerde van 0 tot 45 μM (Ki bepalingen). Na 30 minuten incubatie bij kamertemperatuur wordt de test gestopt door de toevoeging van een derde testvolume van 2.5% (v/v) H3PO4 met 21 mM ATP. Monsters worden gespot op P30 fosfocellulosematten en deze worden zes keer gewassen in 0.5% (v/v) H3PO4. De filtermatten worden verzegeld in monstervoorraadzakken die Wallac betaplate scintillatievloeistof bevatten. De incorporatie van 33P in het substraatpeptide wordt bepaald door het tellen van de matten in een Wallac microbeta scintillatieteller.
In vivo

Administration of SB 415286 (~10 mg/kg twice daily) reduces the extent and degree of the trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS)-provoked colonic inflammation in the rat, and reduces the fall in body weight, which is related to downregulation of NF-κB activity, involved in the generation of proinflammatory mediators. Treatment with this compound at 1 mg/kg significantly delays the growth of Neuro-2A cells in vivo in nude mice.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15753396/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15905881/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16314851/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18342477/
  • [8] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18938143/
  • [9] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20920357/
  • [10] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21161565/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot β-catenin / XIAP / Bcl-2 GSK-3β / p53
S2729-WB1
21161565