alleen voor onderzoeksdoeleinden

D 4476 Casein Kinase remmer

Name: D 4476
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7642
Rating: 5 (21 reviews)

Cat.nr.S7642

D 4476 is een potente, selectieve en celpermeabele CK1 (casein kinase 1) remmer met een IC50 van 200 nM en 300 nM in een celvrije test voor respectievelijk CK1 van Schizosaccharomyces pombe en CK1δ. Werkt ook als een ALK5 remmer met een IC50 van 500 nM.

D 4476 Casein Kinase remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 398.41

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.73%

99.73

Gerelateerde doelwitten	Dehydrogenase HSP Transferase P450 (e.g. CYP17) PDE phosphatase PPAR Vitamin Carbohydrate Metabolism Mitochondrial Metabolism
Overig Casein Kinase Inhibitoren	Silmitasertib (CX-4945) Silmitasertib (CX-4945) sodium salt TBB IC261 PF-670462 Ellagic Acid hydrate TTP 22 Longdaysin PF 4800567 (E/Z)-GO289

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
A375 cells	Function assay	10-80 μM	48 h		Inhibition of CK1-MDM2 complex in human A375 cells assessed as increase in p21 protein level at 10 to 80 uM after 48 hrs by immunoblotting analysis
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	398.41	Formule	C₂₃H₁₈N₄O₃	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	301836-43-1	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	C1COC2=C(O1)C=CC(=C2)C3=C(NC(=N3)C4=CC=C(C=C4)C(=O)N)C5=CC=CC=N5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 79 mg/mL (198.28 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	3.950mg/ml (9.91mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 79 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	CK1 from Schizosaccharomyces pombe 200 nM CK1δ 300 nM ALK5 500 nM
In vitro	D4476 (10 μM) remt CK1 en ALK5 effectief met activiteiten van respectievelijk ongeveer 7% en 22% ten opzichte van de controlegroep. In H4IIE hepatomacellen remt D4476 specifiek de fosforylering van de endogene forkhead box transcriptiefactor O1a (FOXO1a) op Ser322 en Ser325, zonder de fosforylering van andere plaatsen te beïnvloeden. D4476 induceert cytotoxiciteit in ANBL6, INA6 en RPMI8226 lijnen; MM1S en U266 lijnen zijn minder gevoelig; en de OPM1 lijn is volledig resistent. Hoge concentraties (50 μM) D4476 induceerden toxiciteit in alle multiple myeloma (MM) lijnen. In MM-cellen verhoogt D4476 de eiwitniveaus van TP53, P27 en FADD, evenals de celcyclusprogressie en inductie van apoptose. Behandeling van leukemie stamcellen (LSCs) met D4476 toont een zeer selectieve dodelijke werking op LSCs boven normale HSPCs.
Kinase Assay	CK1 kinase assay
Kinase Assay	Alle proteïnekinase-assays (25 μL) worden uitgevoerd bij kamertemperatuur (21℃). De assays worden gedurende 40 min uitgevoerd met een Biomek 2000 Laboratory Automation Workstation in een 96-wellsformaat. De concentraties van magnesiumacetaat en [γ-^33P]ATP (800 cpm/pmol) in de assays zijn respectievelijk 10 mM en 0,1 mM. De assays worden gestart met MgATP en gestopt door de toevoeging van 5 μL 0,5 M orthofosforzuur. Aliquoten worden vervolgens op P30-filtermats gespot, vier keer gewassen in 75 mM fosforzuur om ATP te verwijderen, één keer in methanol, vervolgens gedroogd en geteld op radioactiviteit. CK1 δ (5-20 m-eenheden), verdund in 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EGTA, 0,1% (v/v) Triton X-100, 5 mM dithiothreitol, 50% (v/v) glycerol, wordt getest tegen het peptide RRKDLHDDEEDEAMSITA in een incubatie die 20 mM Hepes, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0,1% (v/v) Triton X-100 en 0,5 mM substraatpeptide bevat.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14710188/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24962017/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24616378/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12534346/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	MDM2 / p53 / p21 / E2F-1 / pRB		19759023

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):