Home Transmembrane Transporters CFTR remmer CFTRinh-172

alleen voor onderzoeksdoeleinden

CFTRinh-172 CFTR remmer

Cat.nr.S7139

CFTRinh-172 (CFTR inhibitor 172) is een spanningsonafhankelijke, selectieve CFTR-remmer met een Ki van 300 nM, die geen effecten vertoont op MDR1, ATP-gevoelige K+-kanalen, of een reeks andere transporters.
CFTRinh-172 CFTR remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 409.4

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.66%
99.66

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
rat FRT cells Function assay Inhibition of human wild type CFTR expressed in rat FRT cells assessed as chloride current by short-circuit current measurements, IC50=0.38 μM 18691893
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 409.4 Formule

C18H10F3NO3S2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 307510-92-5 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen CFTR inhibitor 172 Smiles C1=CC(=CC(=C1)N2C(=O)C(=CC3=CC=C(C=C3)C(=O)O)SC2=S)C(F)(F)F

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 82 mg/mL (200.29 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
CFTR
(in human airway cells)
300 nM(Ki)
In vitro

CFTRinh-172 remt de CFTR-gemedieerde Cl- transport dosis- en tijdsafhankelijk, en remt effectief de CFTR-activering door meerdere soorten agonisten of activators. Deze verbinding, als een selectieve CFTR-kanaalremmer, schakelt ook de Cl− stroom in de acinaire en ductale cellen van de traanklier van het konijn volledig uit. Het induceert ook ROS-productie, mitochondriaal falen en activering van de NF-κB signaalroute, onafhankelijk van CFTR-remming.

Kinase Assay
Screeningprocedures
De assays worden uitgevoerd met behulp van een op maat gemaakt screeningsysteem bestaande uit een 3 meter lange robotarm, een CO2-incubator, een plaatwasser, een vloeistofbehandelingswerkstation, een barcodelezer, een ontdekselstation en twee FLUOstar-fluorescentieplaatlezers, elk uitgerust met twee spuitpompen en HQ500/20X (500 ± 10 nm) excitatie- en HQ535/30M (535 ± 15 nm) emissiefilters. Het robotsysteem is geïntegreerd met behulp van SAMI versie 3.3 software, aangepast voor twee plaatlezers. Aangepaste software is geschreven in Microsoft VBA (Visual Basic for Applications) om basislijn-gesubtraheerde, genormaliseerde fluorescentiehellingen (die halide-influxsnelheden geven) te berekenen uit opgeslagen gegevensbestanden. De assay wordt opgezet door de incubator (37°C, 90% luchtvochtigheid, 5% CO2) te laden met 40–60 96-well platen die de FRT-cellen bevatten, en een carrousel te laden met 96-well platen die testverbindingen en wegwerppipettips bevatten. Om de assay te starten, wordt elke put van een 96-well plaat driemaal gewassen in PBS (300 μl/wassing), waarbij 50 μL PBS achterblijft. Tien microliter van een CFTR-activerende cocktail (5 μM forskoline, 100 μM IBMX, 25 μM apigenine in PBS) wordt toegevoegd, en na 5 minuten wordt één testverbinding (0,5 μL van 1 mM DMSO-oplossing) aan elke put toegevoegd om een uiteindelijke concentratie van 10 μM te verkrijgen. Na 10 minuten worden de 96-well platen overgebracht naar een plaatlezer voor fluorescentie-assay. Elke put wordt individueel geanalyseerd op CFTR-gemedieerd I– transport door fluorescentie continu (200 ms per punt) gedurende 2 seconden (basislijn) en vervolgens gedurende 12 seconden na snelle (<0,5 seconden) toevoeging van 165 μL isosmolaire PBS waarin 137 mM Cl– werd vervangen door I–.
In vivo

CFTRinh-172 (20 µg/6 uur) schakelt de V. cholerae-geïnduceerde intestinale vloeistofsecretie volledig uit zonder de groei van V. cholerae in vivo te beïnvloeden.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23826402/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.