Home Cytoskeletal Signaling Kinesin Remmer SB743921 HCl

alleen voor onderzoeksdoeleinden

SB743921 HCl Kinesin Remmer

Cat.nr.: S2182

SB743921 is een kinesin spindle protein (KSP)-remmer met een Ki van 0,1 nM, bijna geen affiniteit voor MKLP1, Kin2, Kif1A, Kif15, KHC, Kif4 en CENP-E. Fase 1/2.
SB743921 HCl Kinesin Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 553.52

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.34%
99.34

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 553.52 Formule

C31H33N2O3.HCl

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 940929-33-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CC1=CC=C(C=C1)C(=O)N(CCCN)C(C2=C(C(=O)C3=C(O2)C=C(C=C3)Cl)CC4=CC=CC=C4)C(C)C.Cl

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (180.66 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : 46 mg/mL

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
KSP (MX1 cells)
0.06 nM
KSP (Colo205 cells)
0.07 nM
KSP
0.1 nM(Ki)
KSP (SKOV3 cells)
0.2 nM
KSP (MV522 cells)
1.7 nM
KSP (P388 cells)
14.4 nM
In vitro
The Ki of SB 743921 for human and mouse KSP is 0.1 nM and 0.12 nM, respectively, while the Ki of SB 743921 for other kinesins including MKLP1, Kin2 is more than 70 μM. SB 743921 blocks assembly of a functional mitotic spindle, thereby causing cell cycle arrest in mitosis and subsequent cell death. SB-743921 has improved potency over ispinesib in both biochemical and cellular assays.
Kinase Assay
Biochemische test
De motordomeinen van KSP (aminozuren 1–360) worden tot expressie gebracht in Escherichia coli BL21(DE3) als COOH-terminale 6-His-fusie-eiwitten. Bacteriepellets worden gelyseerd in een microfluidizer met een lysisbuffer [50 mM Tris-HCl; 50 mM KCl, 10 mM imidazole, 2 mM MgCl2, 8 mM β-mercaptoethanol, 0,1 mM ATP (pH 7,4)], en eiwitten worden gezuiverd met behulp van Ni-NTA-agarose-affiniteitschromatografie, met een elutiebuffer bestaande uit 50 mM PIPES, 10% sucrose, 300 mM imidazole, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, mM β-mercaptoethanol en 0,1 mM ATP (pH 6,8). Steady-state metingen van ATPase-activiteit worden uitgevoerd met een pyruvaatkinase-lactaatdehydrogenase-detectiesysteem dat de verschijning van ADP koppelt aan de oxidatie van NADH. Absorbantieveranderingen worden gemonitord bij 340 nm. Alle biochemische experimenten worden uitgevoerd in PEM25-buffer [25 mM Pipes/KOH (pH 6,8), 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA] aangevuld met 10 μM SB 743921 voor experimenten met microtubuli. De snelheden van ADP-afgifte worden gemeten in een stopped-flow apparaat; de afname van fluorescentie van MANT-ATP wordt gemonitord. De snelheden van Pi-afgifte worden gemeten in een stopped-flow apparaat, met behulp van bacterieel fosfaatbindend eiwit gemodificeerd met 7-diethylamino-3-((((2 maleimidyl)ethyl)amino)carbonyl)coumarin (MDCC) kleurstof. Ki-schattingen van KSP-remmers worden geëxtraheerd uit de dosis-responscurves, met expliciete correctie voor enzymconcentratie. Tubulinepolymerisatie door veranderingen in extinctie bij 340 nm te meten, wordt gemonitord. De test wordt uitgevoerd in volumes van 100 μL in 96-wells half-area microtiterplaten, met behulp van een microplaatlezer met de incubatietemperatuur ingesteld op 37 °C.
In vivo
SB-743921 is greater efficacy in vivo against P388 leukemia. SB-743921 has significant efficacy in a broad spectrum of tumor models differing from that of taxanes. SB-743921 is shown to have activity against advanced human tumor xenografts Colo205 (complete regressions), MCF-7, SK-MES, H69, OVCAR-3 (complete and partial regressions), and HT-29, MX-1, MDA-MB-231, A2780 (tumor growth delay). SB-743921 doesn't cause the neuropathy often associated with the tubulin agents.
Referenties

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT00343564 Completed
Non-Hodgkin''s Lymphoma|Hodgkin''s Disease
Cytokinetics
 April 2006 Phase 1|Phase 2