Home Cell Cycle PLK remmer GW843682X

alleen voor onderzoeksdoeleinden

GW843682X PLK remmer

Cat.nr.S2880

GW843682X is een selectieve, ATP-competitieve remmer van PLK1 en PLK3, met IC50's van respectievelijk 2,2 nM en 9,1 nM, en is tevens >100-voudig selectief tegen ~30 andere kinasen.
GW843682X PLK remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 477.46

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S288001 DMSO]95 mg/mL]false]Ethanol]3 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.96%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datasheet
99.96

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 477.46 Formule

C22H18F3N3O4S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 660868-91-7 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 95 mg/mL (198.96 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 3 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
PLK1
(in MTT assay)
2.2 nM
PLK3
(in MTT assay)
9.1 nM
In vitro

GW 843682X is een submicromolaire remmer van de proliferatie van de meeste tumorcellen in kweek, met een opmerkelijke uitzondering: PC-3, een prostaatcarcinoomcellijn. GW 843682X is ook selectief voor tumorcellen vergeleken met normale diploïde fibroblasten (HDF), met een >10-voudig verschil in potentie. GW 843682X is equipotent (ongeveer 200 nmol/L) tegen MES-SA/DX5 en de ouderlijn MES-SA, wat suggereert dat de verbinding niet effectief wordt verwijderd door de P-glycoproteïne effluxpomp in de cel. GW 843682X remt dosisafhankelijk de fosforylering van Ser15-p53 door PLK1 in HeLa-cellen die het tet-induceerbare chimerische p53-PLK1-eiwit tot expressie brengen. GW 843682X verbetert de uitgroei van HDF-cellen met 30% bij 3,3 μM en kan de uitgroei van H460 verbeteren bij de laagste concentratie van 0,37 μM. GW 843682X resulteert in een sterke G2-M-arrestatie bij 3 μM en zeer weinig G2-M-arrestatie wordt waargenomen bij 1 μM in HDF-cellen. GW 843682X (3 μM) vertoont een verminderde G2-M-arrestatie, maar er is een toename in het sub-2N DNA-gehalte in H460-cellen. GW 843682X (0,5 μM) resulteert in cellen die groter zijn dan de onbehandelde H460-cellen en meerdere kernen hebben. GW 843682X remt PLK1, PLK2, PLK3 en PLK4 met Ki-waarden van respectievelijk 4,8 nM, 3,8 nM, 8 nM en 0,163 μM. GW 843682X (1 μM) interfereert met de lokalisatie van endogeen MyoGEF bij de centrale spoel in HeLa-cellen. GW 843682X (1 μM) verstoort de lokalisatie van GFP-MyoGEF-wt (GFP-WT), GFP-MyoGEF-T574A (GFP-T574A) en GFP-MyoGEF-T574E (GFP-T574E) naar de centrale spoel in HeLa-cellen. GW-843682X veroorzaakt identieke voortijdige midzone-assemblage en eiwitrecrutering, wat suggereert dat het effect van het medicijn specifiek is voor PLK1-remming. GW 843682X (200 nM) veroorzaakt microtubuli-bundeling en centrale spindlin- en PRC1-recruteringen in de equator in HeLa-cellen.

Kinase Assay
In vitro Kinase Assays
PLK1 en PLK3 worden toegevoegd aan witte 384-wells assayplaten in variabele bekende concentraties in 100% DMSO. DMSO (1–5% eindconcentratie) en EDTA (65 mM) worden gebruikt als controles. Het reactiemengsel bevat de volgende componenten bij 22°C: 25 mM HEPES (pH 7,2); 15 mM MgCl2; 1 μM ATP; 0,05 μCi/well [γ-33P]ATP (10 Ci/mmol); 1 μM substraatpeptide; 0,15 mg/mL runderserumalbumine; 1 mM DTT; en 2 nM PLK1-kinasedomein of 5 nM volledige lengte PLK3. Het reactiemengsel (10 of 20 μL) wordt snel aan elk well toegevoegd direct na de toevoeging van enzym via geautomatiseerde vloeistofhandlers en gedurende 1 tot 1,5 uur bij 22°C geïncubeerd. De 20 μL enzymatische reacties worden gestopt met 50 μL stopmix [50 mM EDTA, 4,0 mg/mL streptavidine SPA-beads in Dulbecco
Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22621898/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19421227/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.