GW843682X

CatalogusnummerS2880 Batch:S288001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C22H18F3N3O4S
Moleculair gewicht 477.46 CAS-nr. 660868-91-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 95 mg/mL (198.96 mM)
Ethanol 3 mg/mL (6.28 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving GW843682X is een selectieve, ATP-competitieve remmer van PLK1 en PLK3, met IC50's van respectievelijk 2,2 nM en 9,1 nM, en is tevens >100-voudig selectief tegen ~30 andere kinasen.
Doelen
PLK1
(in MTT assay)		 PLK3
(in MTT assay)
2.2 nM 9.1 nM
In vitro

GW 843682X is een submicromolaire remmer van de proliferatie van de meeste tumorcellen in kweek, met een opmerkelijke uitzondering: PC-3, een prostaatcarcinoomcellijn. GW 843682X is ook selectief voor tumorcellen vergeleken met normale diploïde fibroblasten (HDF), met een >10-voudig verschil in potentie. GW 843682X is equipotent (ongeveer 200 nmol/L) tegen MES-SA/DX5 en de ouderlijn MES-SA, wat suggereert dat de verbinding niet effectief wordt verwijderd door de P-glycoproteïne effluxpomp in de cel. GW 843682X remt dosisafhankelijk de fosforylering van Ser15-p53 door PLK1 in HeLa-cellen die het tet-induceerbare chimerische p53-PLK1-eiwit tot expressie brengen. GW 843682X verbetert de uitgroei van HDF-cellen met 30% bij 3,3 μM en kan de uitgroei van H460 verbeteren bij de laagste concentratie van 0,37 μM. GW 843682X resulteert in een sterke G2-M-arrestatie bij 3 μM en zeer weinig G2-M-arrestatie wordt waargenomen bij 1 μM in HDF-cellen. GW 843682X (3 μM) vertoont een verminderde G2-M-arrestatie, maar er is een toename in het sub-2N DNA-gehalte in H460-cellen. GW 843682X (0,5 μM) resulteert in cellen die groter zijn dan de onbehandelde H460-cellen en meerdere kernen hebben. GW 843682X remt PLK1, PLK2, PLK3 en PLK4 met Ki-waarden van respectievelijk 4,8 nM, 3,8 nM, 8 nM en 0,163 μM. GW 843682X (1 μM) interfereert met de lokalisatie van endogeen MyoGEF bij de centrale spoel in HeLa-cellen. GW 843682X (1 μM) verstoort de lokalisatie van GFP-MyoGEF-wt (GFP-WT), GFP-MyoGEF-T574A (GFP-T574A) en GFP-MyoGEF-T574E (GFP-T574E) naar de centrale spoel in HeLa-cellen. GW-843682X veroorzaakt identieke voortijdige midzone-assemblage en eiwitrecrutering, wat suggereert dat het effect van het medicijn specifiek is voor PLK1-remming. GW 843682X (200 nM) veroorzaakt microtubuli-bundeling en centrale spindlin- en PRC1-recruteringen in de equator in HeLa-cellen.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • In vitro Kinase Assays

    PLK1 en PLK3 worden toegevoegd aan witte 384-wells assayplaten in variabele bekende concentraties in 100% DMSO. DMSO (1–5% eindconcentratie) en EDTA (65 mM) worden gebruikt als controles. Het reactiemengsel bevat de volgende componenten bij 22°C: 25 mM HEPES (pH 7,2); 15 mM MgCl2; 1 μM ATP; 0,05 μCi/well [γ-33P]ATP (10 Ci/mmol); 1 μM substraatpeptide; 0,15 mg/mL runderserumalbumine; 1 mM DTT; en 2 nM PLK1-kinasedomein of 5 nM volledige lengte PLK3. Het reactiemengsel (10 of 20 μL) wordt snel aan elk well toegevoegd direct na de toevoeging van enzym via geautomatiseerde vloeistofhandlers en gedurende 1 tot 1,5 uur bij 22°C geïncubeerd. De 20 μL enzymatische reacties worden gestopt met 50 μL stopmix [50 mM EDTA, 4,0 mg/mL streptavidine SPA-beads in Dulbecco
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    H460 and HDF cells

  • Concentraties

    3 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    H460 cells are plated at a density of 2×103 per well, HDF cells are plated at 5×103 per well, and the drug-resistant cell line MES-SA/DX5 and its sensitive parent line MES-SA are plated at 7×103 and 6×103 per well, respectively, in a 96-well plate. These densities allow vehicle controls to grow logarithmically during the course of the 3-day assay. All cells are exposed to 3-fold dilutions of GW 843682X (30–0.00152 μM) in low-glucose DMEM containing 5% FBS, and 0.3% (v/v) DMSO (HDF cells); RPMI 1640 containing 5% FBS, and 0.3% (v/v) DMSO (H460); or McCoy's 5A containing 5% FBS, and 0.3% (v/v) DMSO (MES-SA and MES-SA/DX5).

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17267659/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17655330/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18694934/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22621898/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19421227/

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.