Name: PIK-75 HCl
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1205
Rating: 5 (45 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.78%

99.78

Gerelateerde doelwitten	Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Overig PI3K Inhibitoren	GDC-0077 (Inavolisib) SAR405 Quercetin (Sophoretin) LY294002 XL147 analogue Tersolisib (STX-478) Buparlisib (BKM120) 740 Y-P (PDGFR 740Y-P) GO-203 TFA Eganelisib (IPI-549)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving
human MV4-11 cells	Cytotoxic assay	72 h	Cytotoxicity against human MV4-11 cells after 72 hrs by CellTiter-Glo assay, IC50=0.003 μM
human NZOV9 cells	Proliferation assay		Antiproliferative activity against human NZOV9 cells, IC50=0.066 μM
human NZB5 cells	Proliferation assay		Antiproliferative activity against human NZB5 cells, IC50=0.069 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	488.74	Formule	C₁₆H₁₄BrN₅O₄S.HCl	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	372196-77-5	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	CC1=C(C=C(C=C1)[N+](=O)[O-])S(=O)(=O)N(C)N=CC2=CN=C3N2C=C(C=C3)Br.Cl

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 98 mg/mL (200.51 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 9 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.150mg/ml (0.31mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	0.150mg/ml (0.31mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	PI3K and DNA-PK inhibitor.
Targets/IC₅₀/Ki	DNA-PK (Cell-free assay) 2 nM p110α (Cell-free assay) 5.8 nM p110γ (Cell-free assay) 76 nM p110δ (Cell-free assay) 0.51 μM
In vitro	PIK-75 vertoont een indrukwekkende potentie en isovormspecificiteit voor p110α, terwijl de corresponderende IC50-waarden 1300 nM, 76 nM en 510 nM zijn voor andere PI3K-isovormen, p110β, -γ en -δ, respectievelijk. Bovendien is PIK-75 bij binding aan gezuiverd p110α een niet-competitieve remmer met betrekking tot ATP met een K_i van 36 nM en competitief met betrekking tot het substraat PI met een K_i van 2,3 nM. PIK-75 vertoont ook een krachtige remming van DNA-PK. PIK-75 (1 μM) vermindert de celoverleving door de mitochondriale activiteit significant te verlagen in ongestimuleerde niet-astmatische gladde spiercellen van de luchtwegen (ASM), astmatische ASM-cellen en longfibroblasten. Terwijl in TGFβ-gestimuleerde ASM-cellen PIK75 alleen de mitochondriale activiteit verlaagt in astmatische cellen zonder effecten in niet-astmatische cellen. Een recente studie toont aan dat PIK-75 (10 nM) TNF-α-geïnduceerde CD38 mRNA-expressie remt en TNF-α-geïnduceerde ADP-ribosylcyclase-activiteit significant vermindert in humane gladde spiercellen van de luchtwegen.
Kinase Assay	Remmingsassays
Kinase Assay	De PI3K-remmer PIK-75 wordt opgelost in 10 mM dimethylsulfoxide en bewaard bij -20°C tot gebruik. De PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl₂ met 180 μM fosfatidylinositol, waarbij de reactie wordt gestart door de toevoeging van 100 μM ATP (bevat 2,5 μCi [γ-³²P]ATP). Na een incubatie van 30 minuten bij kamertemperatuur wordt de enzymreactie gestopt door de toevoeging van 50 μL 1 M HCl. Fosfolipiden worden vervolgens geëxtraheerd met 100 μL chloroform/methanol [1:1 (v/v)] en 250 μL 2 M KCl, gevolgd door vloeistofscintillatietelling. Remmers worden verdund in 20% (v/v) dimethylsulfoxide om een concentratie- versus remmingscurve van de enzymactiviteit te genereren, die vervolgens wordt geanalyseerd met behulp van Prism versie 5.00 voor Windows om de IC50 te berekenen. Voor kinetische analyse wordt een luminescentieassay gebruikt die het ATP-verbruik meet. De PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl₂ met PI en ATP in verschillende concentraties. Na een incubatie van 60 minuten bij kamertemperatuur wordt de reactie gestopt door de toevoeging van 50 μL Kinase-Glo, gevolgd door nog eens 15 minuten incubatie. De luminescentie wordt vervolgens afgelezen met een Fluostar plaatlezer. De resultaten worden geanalyseerd met Prism.
In vivo	In het ErbB3WT-tumormodel vermindert PIK-75 de in vitro chemotactische respons op HRGβ1 en verlaagt het pAkt-niveaus met 40%. Bovendien vermindert PIK-75 significant de tumorcelmobiliteit en in vivo invasie in primaire ErbB3WT-tumoren. Bij CD1-mannetjesmuizen leidt PIK-75 tot ernstige beperkingen in de insulinetolerantietest (ITT) en glucosetolerantietest (GTT), en een toename in glucoseproductie tijdens een pyruvaattolerantietest (PTT).
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/ [2] # [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/ [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	PMID
Western blot	p-AKT / AKT MYCN / p-rpS6 p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / PARP / Survivin / XIAP	23077605
Growth inhibition assay	Cell viability	24366069
Immunofluorescence	Ac-tubulin	23873844