PIK-75 HCl

CatalogusnummerS1205 Batch:S120502

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C16H14BrN5O4S.HCl
Moleculair gewicht 488.74 CAS-nr. 372196-77-5
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 3 mg/mL (6.13 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.150mg/ml (0.31mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 0.150mg/ml (0.31mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 3 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving PIK-75 HCl is een p110α-remmer met een IC50 van 5,8 nM (200 keer potenter dan p110β), isoform-specifieke mutanten bij Ser773, en remt ook potent DNA-PK met een IC50 van 2 nM in celvrije assays.
Doelen
DNA-PK
(Cell-free assay)		 p110α
(Cell-free assay)		 p110γ
(Cell-free assay)		 p110δ
(Cell-free assay)
2 nM 5.8 nM 76 nM 0.51 μM
In vitro PIK-75 vertoont een indrukwekkende potentie en isovormspecificiteit voor p110α, terwijl de corresponderende IC50-waarden 1300 nM, 76 nM en 510 nM zijn voor andere PI3K-isovormen, p110β, -γ en -δ, respectievelijk. Bovendien is PIK-75 bij binding aan gezuiverd p110α een niet-competitieve remmer met betrekking tot ATP met een Ki van 36 nM en competitief met betrekking tot het substraat PI met een Ki van 2,3 nM. PIK-75 vertoont ook een krachtige remming van DNA-PK. PIK-75 (1 μM) vermindert de celoverleving door de mitochondriale activiteit significant te verlagen in ongestimuleerde niet-astmatische gladde spiercellen van de luchtwegen (ASM), astmatische ASM-cellen en longfibroblasten. Terwijl in TGFβ-gestimuleerde ASM-cellen PIK75 alleen de mitochondriale activiteit verlaagt in astmatische cellen zonder effecten in niet-astmatische cellen. Een recente studie toont aan dat PIK-75 (10 nM) TNF-α-geïnduceerde CD38 mRNA-expressie remt en TNF-α-geïnduceerde ADP-ribosylcyclase-activiteit significant vermindert in humane gladde spiercellen van de luchtwegen.
In vivo In het ErbB3WT-tumormodel vermindert PIK-75 de in vitro chemotactische respons op HRGβ1 en verlaagt het pAkt-niveaus met 40%. Bovendien vermindert PIK-75 significant de tumorcelmobiliteit en in vivo invasie in primaire ErbB3WT-tumoren. Bij CD1-mannetjesmuizen leidt PIK-75 tot ernstige beperkingen in de insulinetolerantietest (ITT) en glucosetolerantietest (GTT), en een toename in glucoseproductie tijdens een pyruvaattolerantietest (PTT).
Kenmerken PI3K- en DNA-PK-remmer.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Remmingsassays

    De PI3K-remmer PIK-75 wordt opgelost in 10 mM dimethylsulfoxide en bewaard bij -20°C tot gebruik. De PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl2 met 180 μM fosfatidylinositol, waarbij de reactie wordt gestart door de toevoeging van 100 μM ATP (bevat 2,5 μCi [γ-32P]ATP). Na een incubatie van 30 minuten bij kamertemperatuur wordt de enzymreactie gestopt door de toevoeging van 50 μL 1 M HCl. Fosfolipiden worden vervolgens geëxtraheerd met 100 μL chloroform/methanol [1:1 (v/v)] en 250 μL 2 M KCl, gevolgd door vloeistofscintillatietelling. Remmers worden verdund in 20% (v/v) dimethylsulfoxide om een concentratie- versus remmingscurve van de enzymactiviteit te genereren, die vervolgens wordt geanalyseerd met behulp van Prism versie 5.00 voor Windows om de IC50 te berekenen. Voor kinetische analyse wordt een luminescentieassay gebruikt die het ATP-verbruik meet. De PI3K-enzymactiviteit wordt bepaald in 50 μL van 20 mM HEPES, pH 7,5, en 5 mM MgCl2 met PI en ATP in verschillende concentraties. Na een incubatie van 60 minuten bij kamertemperatuur wordt de reactie gestopt door de toevoeging van 50 μL Kinase-Glo, gevolgd door nog eens 15 minuten incubatie. De luminescentie wordt vervolgens afgelezen met een Fluostar plaatlezer. De resultaten worden geanalyseerd met Prism.

Celassay:[3]
  • Cellijnen

    A2780, A2780/cp70, 2780AD, HCT116, HT29, WIL, CALU-3, MCF7, PC3 and HS852 cells

  • Concentraties

    0-10 μM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    Mitochondrial activity is assessed after stimulation with TGFβ with or without inhibitors for 48 hours using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay. Harvested washed cells are resuspended in DMEM-lO% FCS and aliquoted (500 μL) into 24-well cluster plates prior to serial dilution (1:2) in duplicates. To each well, 100 μL of an appropriate MTT concentration (dissolved in PBS and filtered through a 0.2 μm filter before use to remove any blue formazan product) is added immediately after diluting the cells, which are then incubated for 3.5 hours at 37 °C. The resulting blue formazan product is solubilized overnight (16 hours) at 37 °C by the addition of 500 μL of 10% sodium dodecyl sulfate　(SDS) in 0.01 M HCl to each well. A sample (150　μL)　from each duplicate well is transferred to a 96-well　microplate, and the optical density determinedby automated spectrophotometry against a reagent blank (no　cells).　Absorbance is measured at a test wavelength of 570 nm and a reference wavelength of 690 nm. For each primary cell culture, results from three to six wells from each treatment are averaged, and data are expressed as absorbance 570 to 690 nm.
Dierstudie:[5]
  • Dierlijke modellen

    MTLn3 cells are injected into the right fourth mammary fat pad from the head of female severe-combined immunodeficient/NCr mice.

  • Doseringen

    ≤1 μM

  • Toediening

    Administered via i.p.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21778304/
  • #
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21349933/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22556157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21725367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22142257/

Klantproductvalidatie

A549 cells were treated with DMSO or PIK-75 (200 nM) for 1 h and subsequently stimulated with izTRAIL for 24 h. Long-term survival was visualized after 7 days by crystal violet staining. One of two independent experiments is shown.

Gegevens van [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

A549 cells were treated with PIK-75 (100 nM) or SNS-032 (300 nM) for the indicated times. Cells were lysed and subjected to western blotting. One representative of two independent experiments is shown.

Gegevens van [ Cell Death Differ , 2014 , 21(3), 491-502 ]

DW compounds dose-dependently and persistently blocked the PI3K/mTOR signaling pathway in RH30 cells. DW09849 persistently inhibited PI3K signaling. RH30 cells treated with 0.1 uM DW09849 or PIK-75 were harvested at indicated times (0, 0.25, 0.75, 1.5, 3, 6, 12, and 24 hours). Western blot analyses were conducted to detect the indicated proteins. Data shown are representative of three independent experiments. Con, concentration.

Gegevens van [ J Pharmacol Exp Ther , 2014 , 348(3), 432-41 ]

<p>Knockdown of BRCA1 sensitizes cells to PI3K/AKT pathway inhibitors. MCF7 cells transfected with either BRCA1-siRNA or control-siRNA were treated with increasing amounts of inhibitors targeting the PI3K/AKT pathway for 48 h in triplicate. Viable cells were measured by MTT assay.</p>

Gegevens van [ Mol Carcinog , 2012 , 52, 667-75 ]

Sellecks PIK-75 HCl Is geciteerd door 46 Publicaties

Lysosomal PIP3 revealed by genetically encoded lipid biosensors [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2025, 122(13):e2426929122] PubMed: 40127277
The mevalonate pathway contributes to breast primary tumorigenesis and lung metastasis [ Mol Oncol, 2024, 10.1002/1878-0261.13716] PubMed: 39119789
PIK Your Poison: The Effects of Combining PI3K and CDK Inhibitors against Metastatic Cutaneous Squamous Cell Carcinoma In Vitro [ Cancers (Basel), 2024, 16(2)370] PubMed: 38254859
Pharmacological Targeting of Androgen Receptor Elicits Context-Specific Effects in Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer [ Cancer Res, 2023, 83(3):456-470] PubMed: 36469363
MDM2 antagonists promote CRISPR/Cas9-mediated precise genome editing in sheep primary cells [ Mol Ther Nucleic Acids, 2023, 31:309-323] PubMed: 36726409
Reciprocal regulation of Daxx and PIK3CA promotes colorectal cancer cell growth [ Cell Mol Life Sci, 2022, 79(7):367] PubMed: 35718818
The Lectin LecB Induces Patches with Basolateral Characteristics at the Apical Membrane to Promote Pseudomonas aeruginosa Host Cell Invasion [ mBio, 2022, 13(3):e0081922] PubMed: 35491830
PIK-75 overcomes venetoclax resistance via blocking PI3K-AKT signaling and MCL-1 expression in mantle cell lymphoma [ Am J Cancer Res, 2022, 12(3):1102-1115] PubMed: 35411248
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Isthmin-1 is an adipokine that promotes glucose uptake and improves glucose tolerance and hepatic steatosis [ Cell Metab, 2021, S1550-4131(21)00326-0] PubMed: 34348115

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.