Home PI3K/Akt/mTOR PI3K remmer Apitolisib (GDC-0980)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

Apitolisib (GDC-0980) PI3K remmer

Cat.nr.S2696

Apitolisib (GDC-0980, RG7422, GNE 390) is een krachtige klasse I PI3K-remmer voor PI3Kα/β/δ/γ met een IC50 van respectievelijk 5 nM/27 nM/7 nM/14 nM in celvrije assays. Het werkt ook als een mTOR-remmer met een Ki van 17 nM in een celvrije assay, en is zeer selectief ten opzichte van andere PIKK-familiekinasen. Deze verbinding activeert autophagy en Apoptosis gelijktijdig in alvleesklierkankercellen. Fase 2.
Apitolisib (GDC-0980) PI3K remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 498.6

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.76%
99.76

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
insect cells Function assay 30 mins Inhibition of human recombinant mTOR expressed in insect cells assessed as phosphorylation of recombinant (GFP)-4-EBP1 measured after 30 mins by fluorescence polarization assay, Ki=0.017μM 21981714
PC3 Function assay Inhibition of PIK3 gamma-mediated Akt phosphorylation at Ser473 in human PC3 cells by ELISA, IC50=0.036μM 21981714
MCF7.1 Antiproliferative assay Antiproliferative activity against human MCF7.1 cells expressing HER2 gene after overnight incubation by CellTiter-Glo luminescence assay, IC50=0.255μM 21981714
PC3 Antiproliferative assay Antiproliferative activity against human PC3 cells after overnight incubation by CellTiter-Glo luminescence assay, IC50=0.307μM 21981714
PC3 Antitumor assay 1 mg/kg 14 days Antitumor activity against human PC3 cells xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as delay in tumor growth at 1 mg/kg, po qd for 14 days 21981714
MCF7-neo Antitumor assay 1 mg/kg 22 days Antitumor activity against human MCF7-neo cells expressing HER2 gene xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as delay in tumor growth at 1 mg/kg, po qd for 22 days 21981714
PC3 Antitumor assay Antitumor activity against human PC3 cells xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as tumor regression at maximum tolerated dose 21981714
MCF7-neo Antitumor assay Antitumor activity against human MCF7-neo cells expressing HER2 gene xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as tumor regression at maximum tolerated dose 21981714
PC3 Antitumor assay 14 days Antitumor activity against human PC3 cells xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as tumor stasis at maximum tolerated dose measured on day 14 21981714
MCF7-neo Antitumor assay 22 days Antitumor activity against human MCF7-neo cells expressing HER2 gene xenografted in athymic nu/nu mouse assessed as tumor stasis at maximum tolerated dose measured on day 22 21981714
PC3 Function assay 10 mg/kg 6 hrs Inhibition of mTORC2 in human PC3 cells xenografted mouse assessed as reduction of phosphorylated Akt level at 10 mg/kg, po after 6 hrs 23199076
PC3 Function assay 10 mg/kg 6 hrs Inhibition of mTORC1 in human PC3 cells xenografted mouse assessed as reduction of phosphorylated p70S6K level at 10 mg/kg, po after 6 hrs 23199076
insect cells Function assay 30 mins Inhibition of human recombinant mTOR (1360 to 2549 residues) expressed in insect cells assessed as inhibition of GFP-labeled 4-EBP1 phosphorylation at Thr-37/46 residues incubated for 30 mins by FRET assay, Ki=0.017μM 27096040
PC3 Antiproliferative assay 3 days Antiproliferative activity against human PC3 cells after 3 days by CellTitre-Glo assay, EC50=0.31μM 27096040
VERO-E6 Toxicity assay 48 hrs Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=0.5μM ChEMBL
VERO-E6 Function assay 48 hrs Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=2.31μM ChEMBL
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 498.6 Formule

C23H30N8O3S

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1032754-93-0 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen RG7422, GNE 390 Smiles CC1=C(SC2=C1N=C(N=C2N3CCOCC3)C4=CN=C(N=C4)N)CN5CCN(CC5)C(=O)C(C)O

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 27 mg/mL (54.15 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken
A potent, selective, and orally available inhibitor of PI3Kα, β, δ, γ and mTOR.
Targets/IC50/Ki
p110α
(Cell-free assay)
5 nM
p110δ
(Cell-free assay)
7 nM
p110γ
(Cell-free assay)
14 nM
mTOR
(Cell-free assay)
17 nM(Ki app)
p110β
(Cell-free assay)
27 nM
In vitro
Apitolisib (GDC-0980) vertoont potente en selectieve remmende activiteiten tegen klasse I PI3K- en mTOR-kinase versus een groot panel van kinasen, met een Ki van 17 nM voor mTOR en IC50 van respectievelijk 5 nM, 27 nM, 7 nM en 14 nM voor PI3Kα, β, δ en γ. In vitro remt deze verbinding de celproliferatie in PC3- en MCF7-cellen significant met respectievelijk IC50 van 307 nM en 255 nM. Een recente studie toont aan dat het de levensvatbaarheid van kankercellen vermindert door de celcyclus te remmen en Apoptosis te induceren met de meeste potentie in prostaat- (IC50 < 200 nM 50%, <500 nM 100%), borst- (IC50 <200 nM 37%, <500 nM 78%) en NSCLC-lijnen (IC50 <200 nM 29%, <500 nM 88%) en minder potentie in pancreas- (IC50 <200 nM 13%, <500 nM 67%) en melanoom-cellijnen (IC50 <200 nM 0%, <500 nM 33%).
Kinase Assay
Enzymatische activiteit
Apitolisib (GDC-0980) wordt geëvalueerd via enzymatische activiteitsassays voor klasse I PI3K-isoformen met behulp van een fluorescentiepolarisatiemethode die de vorming van 3,4,5-inositoltrifosfaat monitort, dat concurreert met fluorescent gelabeld PIP3 voor binding aan het GRP-1 pleckstrine homologie domeinproteïne. Een toename van het phosphatidyl inositide-3-fosfaatproduct resulteert in een afname van het fluorescentiepolarisatiesignaal wanneer de gelabelde fluorofoor wordt verdrongen van de GRP-1-proteïnebindingsplaats. Klasse I PI3K-isoformen worden tot expressie gebracht en gezuiverd als heterodimere recombinante eiwitten. PI3K-isoformen worden geanalyseerd onder initiële snelheidscondities in aanwezigheid van 10 mM Tris (pH 7.5), 25 μM ATP, 9.75 μM PIP2, 5% glycerol, 4 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.05% (v/v) Chaps, 1 mM dithiothreïtol, 2% (v/v) DMSO bij de volgende concentraties voor elke isovorm: PI3Kα,β bij 60 ng/mL; PI3Kγ bij 8 ng/mL; PI3Kδ bij 45 ng/mL. Na een assay van 30 minuten bij 25°C, worden de reacties beëindigd met een eindconcentratie van 9 mM EDTA, 4.5 nM TAMRA-PIP3 en 4.2 μg/mL GRP-1 detectorproteïne alvorens fluorescentiepolarisatie af te lezen op een Envision plaatlezer. IC50's worden berekend uit de fit van de dosis-respons-curven naar een 4-parametervergelijking. Humaan recombinant mTOR(1360−2549) wordt tot expressie gebracht en gezuiverd uit insectencellen en geanalyseerd met behulp van een Lanthascreen fluorescentie resonantie-energieoverdrachtformaat waarbij fosforylering van recombinant groen fluorescent proteïne (GFP)-4-EBP1 wordt gedetecteerd met behulp van een terbium-gelabeld antilichaam tegen fosfo-threonine 37/46 van 4-EBP1. Reacties worden geïnitieerd met ATP en uitgevoerd in aanwezigheid van 50 mM Hepes (pH 7.5), 0.25 nM mTOR, 400 nM GFP-4E-BP1, 8 μM ATP, 0.01% (v/v) Tween 20, 10 mM MnCl2, 1 mM EGTA, 1 mM dithiothreïtol en 1% (v/v) DMSO. Assays worden uitgevoerd onder initiële snelheidscondities bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten alvorens de reactie te beëindigen en product te detecteren in aanwezigheid van 2 nM Tb-anti-p4E-BP1 antilichaam en 10 mM EDTA. Dosis-respons-curven worden gefit naar een vergelijking voor competitieve strakke-binding inhibitie en de schijnbare Ki's worden berekend met behulp van de bepaalde Km voor ATP van 6.1 μM.
In vivo
Apitolisib (GDC-0980) vertoont significante antitumorale activiteit bij een dosis van 1 mg/kg door tumorgroei te vertragen in zowel PC-3 als MCF-7 neo/HER2 xenograftmodellen. Bovendien resulteert deze verbinding in tumorstase of regressies bij de maximaal getolereerde dosis van 7,5 mg/kg. Bij muizen leidt intraveneuze toediening van 1 mg/kg tot een lage klaring (Clp: 9,2 mL/min/kg, Vss: 1,7 L/kg). Terwijl orale toediening van 5 mg/kg in 80% PEG400 en van 50 mg/kg als een kristallijne suspensie in 0,5% methylcellulose/0,2% Tween-80 ook resulteert in gunstige farmacokinetische parameters.
Referenties

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S2696-viability1
25221930
Western blot p-AKT / AKT / p-S6RP / S6RP / p-4EBP / 4EBP / p-eNOS / eNOS
S2696-WB1
23814482

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT01487239 Completed
Healthy Volunteer
Genentech Inc.
 December 2011 Phase 1
NCT01455493 Completed
Endometrial Carcinoma
Genentech Inc.
 December 2011 Phase 2
NCT01442090 Completed
Renal Cell Carcinoma
Genentech Inc.
 October 2011 Phase 2
NCT01254526 Completed
Breast Cancer
Genentech Inc.
 December 2010 Phase 1
NCT00854126 Completed
Non-Hodgkin''s Lymphoma Solid Cancers
Genentech Inc.
 May 2009 Phase 1
NCT00854152 Completed
Non-Hodgkin''s Lymphoma Solid Cancers
Genentech Inc.
 March 2009 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.