Name: Gedatolisib (PKI-587)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2628
Rating: 5 (30 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.09%

99.09

Gerelateerde doelwitten	Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A PDK
Overig PI3K Inhibitoren	GDC-0077 (Inavolisib) SAR405 Quercetin (Sophoretin) LY294002 XL147 analogue Tersolisib (STX-478) Buparlisib (BKM120) 740 Y-P (PDGFR 740Y-P) GO-203 TFA Eganelisib (IPI-549)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving
MDA-MB-361 cells	Cytotoxicity assay		Cytotoxicity against human MDA-MB-361 cells, IC50=0.004 μM
PC3MM2 cells	Cytotoxicity assay		Cytotoxicity against human PC3MM2 cells, IC50=0.0131 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt T308 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting, IC50=0.008 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt S473 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting, IC50=0.01 μM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of eNOS phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of PARS40 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of GSK3 kinase phosphorylation in human MDA-MB-361 cells by Western blotting
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of mTOR TORC1 kinase activity in human MDA-MB-361 cells assessed as suppression of p70S6K phosphorylation at < 30 nM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of mTOR TORC1 kinase activity in human MDA-MB-361 cells assessed as suppression of 4EBP1 phosphorylation at < 30 nM
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt T308 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 36 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Inhibition of Akt S473 phosphorylation in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 36 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Induction of PARP cleavage in human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model upto 18 hrs
MDA-MB-361 cells	Function assay		Antitumor activity against human MDA-MB-361 cells xenografted mouse model assessed as reduction in tumor volume at 20 mg/kg, iv on day 1, 5, 9
SF9 insect cells	Function assay	2 h	Inhibition of human PI3Kalpha expressed in SF9 insect cells after 2 hrs by fluorescence polarization assay, IC50=0.0004 μM
SF9 insect cells	Function assay	2 h	Inhibition of human PI3Kgamma expressed in SF9 insect cells after 2 hrs by fluorescence polarization assay, IC50=0.011μM
MDA-MB-361 cells	Growth inhibition assay	72 h	Growth inhibition of human MDA-MB-361 cells after 72 hrs, IC50=0.003 μM
human PC3 cells	Growth inhibition assay	72 h	Growth inhibition of human PC3 cells after 72 hrs, IC50=0.011 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	615.73	Formule	C₃₂H₄₁N₉O₄	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1197160-78-3	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	PF-05212384			Smiles	CN(C)C1CCN(CC1)C(=O)C2=CC=C(C=C2)NC(=O)NC3=CC=C(C=C3)C4=NC(=NC(=N4)N5CCOCC5)N6CCOCC6

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 3 mg/mL (4.87 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 1 mg/mL

Water : Insoluble

DMSO : 10 mg/mL (16.24 mM) Verwarmd met een waterbad van 50°C; Geultrasoneerd;
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	2.500mg/ml (4.06mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 50 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	PI3Kα (Cell-free assay) 0.4 nM mTOR (Cell-free assay) 1.6 nM PI3Kγ (Cell-free assay) 5.4 nM
In vitro	Gedatolisib (PKI-587) vertoont een krachtige remmende activiteit tegen PI3K-α, PI3K-γ en mTOR met IC50 van respectievelijk 0,4 nM, 5,4 nM en 1,6 nM. Bovendien vertoont het ook zijn potentie tegen de meest voorkomende mutante vormen van PI3Kα, met name de H1047R en E545K met IC50 van respectievelijk 0,6 nM en 0,6 nM. Gecorreleerd met de onderdrukking van fosforylering van PI3K/mTOR-signaalroute-eiwitten, veroorzaakt deze verbinding tumorgroei-inhibitie in MDA-361 en PC3-MM2 cellijnen met IC50 van respectievelijk 4 nM en 13,1 nM.
Kinase Assay	PI3K en mTOR kinase assay
Kinase Assay	Enzymassays worden uitgevoerd in fluorescentiepolarisatie (FP)-formaat, aangepast van het Echelon K-1100 PI3K FP assay kit protocol. Humane klasse I PI3K's en PI3K-α mutanten (E545K en H1047R) worden geproduceerd in Sf9 of gekocht van Upstate Biotech. GST-GRP1 (murien) wordt geproduceerd in Escherichia coli en geïsoleerd door GST-Sepharose. Assaybuffers zijn reactiebuffer [20 mM HEPES (pH 7,1), 2 mM MgCl₂, 0,05% CHAPS en 0,01% β-mercapto-ethanol] en stop-/detectiebuffer [100 mM HEPES (pH 7,5), 4 mM EDTA, 0,05% CHAPS]. De FP-reactie wordt 30 minuten bij kamertemperatuur uitgevoerd in 20 μL reactiebuffer die 20 μM fosfatidylinositol 4,5-bisfosfaat (PIP2), 25 μM ATP en <4% DMSO bevat. De FP-reactie wordt gestopt met 20 μL stop-/detectiebuffer (10 nM probe en 40 nM GST-GRP), en na 2 uur worden gegevens verzameld met behulp van een Envision plaatlezer. De routine assays met gezuiverd FLAG-TOR (FL en 3.5) worden in 96-well platen als volgt uitgevoerd. Enzymen worden eerst verdund in kinase assay buffer (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycerofosfaat, 10 mM MnCl₂, 0.5 mM DTT, 0.25 μM microcystine LR, en 100 μg/mL BSA). Aan elk putje wordt 12 μL van het verdunde enzym kort gemengd met 0.5 μL testremmer of controlevoertuig dimethylsulfoxide (DMSO), waarbij de testremmer Gedatolisib (PKI-587) is. De kinase-reactie wordt geïnitieerd door 12.5 μL kinase assay buffer met ATP en His6-S6K toe te voegen om een eindreactievolume van 25 μL te verkrijgen dat 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP, en 1.25 μM His6-S6K bevat. De reactieplaat wordt 2 uur geïncubeerd (lineair bij 1-6 uur) bij kamertemperatuur onder zacht schudden en vervolgens beëindigd door 25 μL stopbuffer (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA, en 20 mM EGTA) toe te voegen.
In vivo	Behandeling met Gedatolisib (PKI-587) met 25 mg/kg i.v. bij naakte muizen leidt tot een lage plasmaklaring (7 (mL/min)/kg), een hoog verdelingsvolume (7,2 L/kg) en een lange halfwaardetijd (14,4 uur). In het MDA-361 xenograftmodel produceert het een krachtige antitumorale werkzaamheid met de minimaal effectieve dosis (MED) van 3 mg/kg tegen MDA-361 tumoren en de maximaal getolereerde enkele dosis (MTD) van 30 mg/kg. Terwijl in het H1975 (niet-kleincellig longcarcinoom, mutante EGFR [L858R, T790M]) xenograftmodel, dit compound van 25 mg/kg gedurende 7 weken resulteert in 90% overleving van de behandelde groep.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20166697/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22261591/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Growth inhibition assay	Cell viability		29978469
Western blot	p-AKT / p-mTOR / p-p70S6K / p-S6K / p-4E-BP1 / AKT / mTOR / p70S6K / S6K / 4EBP1 TSC1 / TSC2 / Raptor		29978469

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT02438761	Terminated	Therapy-related Acute Myeloid Leukemia and Myelodysplastic Syndrome\|Acute Myeloid Leukemia in Relapse\|de Novo Acute Myeloid Leukemia at Diagnostic	Institut Curie\|Fondation ARC\|National Cancer Institute France	August 31 2015	Phase 2
NCT02069158	Completed	Breast Cancer\|NSCLC\|Ovary Cancer\|Endometrial Cancer\|Small Cell Lung Cancer (SCLC)\|Head and Neck (HNSCC)	Cristiana Sessa\|Oncology Institute of Southern Switzerland	April 2014	Phase 1
NCT01420081	Terminated	Endometrial Neoplasms	Pfizer	January 19 2012	Phase 2

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Gedatolisib (PKI-587) PI3K remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 615.73