Home PI3K/Akt/mTOR PI3K Remmer PF-04691502

alleen voor onderzoeksdoeleinden

PF-04691502 PI3K Remmer

Cat.nr.: S2743

PF-04691502 (PF4691502) is een ATP-competitieve PI3K(α/β/δ/γ)/mTOR dubbele remmer met een Ki van 1,8 nM/2,1 nM/1,6 nM/1,9 nM en 16 nM in celvrije assays, met weinig activiteit tegen Vps34, AKT, PDK1, p70S6K, MEK, ERK, p38 of JNK. Deze verbinding induceert apoptose. Fase 2.
PF-04691502 PI3K Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 425.48

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.96%
99.96

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
human BT20 cells Function assay Inhibition of AKT phosphorylation at Ser 473 in human BT20 cells, IC50=0.013 μM
human SKOV3 cells Proliferation assay 3 days Antiproliferative activity against human SKOV3 cells after 3 days by CellTiter-Glo assay, IC50=0.29 μM
human U87MG cells Proliferation assay 4 days Antiproliferative activity against human U87MG cells after 4 days by CellTiter-Glo assay, IC50=0.52 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 425.48 Formule

C22H27N5O4

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 1013101-36-4 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen PF4691502 Smiles CC1=C2C=C(C(=O)N(C2=NC(=N1)N)C3CCC(CC3)OCCO)C4=CN=C(C=C4)OC

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 14 mg/mL (32.9 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PI3Kδ
(Cell-free assay)
1.6 nM(Ki)
PI3Kα
(Cell-free assay)
1.8 nM(Ki)
PI3Kγ
(Cell-free assay)
1.9 nM(Ki)
PI3Kβ
(Cell-free assay)
2.1 nM(Ki)
P-Akt (S473)
(Cell-free assay)
3.8 nM
P-Akt (T308)
(Cell-free assay)
7.5 nM
mTOR
(Cell-free assay)
16 nM(Ki)
In vitro

PF-04691502 potently inhibits recombinant class I PI3K and mTOR in biochemical assays and suppresses transformation of avian fibroblasts mediated by wild-type PI3K γ, δ, or mutant PI3Kα. In PIK3CA-mutant and PTEN-deleted cancer cell lines, this compound reduces phosphorylation of AKT T308 and AKT S473 (IC(50) of 7.5-47 nM and 3.8-20 nM, respectively) and inhibits cell proliferation (IC(50) of 179-313 nM). It inhibits mTORC1 activity in cells as measured by PI3K-independent nutrient stimulated assay, with an IC(50) of 32 nM and inhibits the activation of PI3K and mTOR downstream effectors including AKT, FKHRL1, PRAS40, p70S6K, 4EBP1, and S6RP. Short-term exposure to this chemical predominantly inhibits PI3K, whereas mTOR inhibition persists for 24 to 48 hours. This compound induces cell cycle G(1) arrest, concomitant with upregulation of p27 Kip1 and reduction of Rb.

Kinase Assay
Kinase Assay
De fluorescentiepolarisatie-assay voor ATP-competitieve remming wordt als volgt uitgevoerd: mPI3Kα-verdunningsoplossing (90 nM) wordt bereid in verse assaybuffer (50 mM Hepes pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.05% CHAPS) en op ijs bewaard. De enzymreactie bevat 0,5 nM muis-PI3Kα (p110α/p85α-complex gezuiverd uit insectencellen), 30 μM PIP2, PF-04691502 (0, 1, 4 en 8 nM), 5 mM MgCl2 en 2-voudige seriële verdunningen van ATP (0–800 μM). Het uiteindelijke dimethylsulfoxide is 2,5%. De reactie wordt geïnitieerd door de toevoeging van ATP en na 30 minuten beëindigd met 10 mM EDTA. In een detectieplaat worden 15 µL detector/probe-mengsel dat 480 nM GST-Grp1PH-domein en 12 nM TAMRA-gelabeld fluorescerend PIP3 in assaybuffer bevat, gemengd met 15 µL kinasereactiemengsel. De plaat wordt 3 minuten geschud en 35 tot 40 minuten geïncubeerd alvorens te lezen op een LJL Analyst HT.
In vivo

Antitumor activity of PF-04691502 is observed in U87 (PTEN null), SKOV3 (PIK3CA mutation), and non-small cell lung carcinoma xenografts. This compound inhibits tumor growth at 7 days by 72%. FDG-PET imaging revealed that it reduces glucose metabolism dramatically. Tissue biomarkers of PI3K/mTOR pathway activity, p-AKT (S473), and p-RPS6 (S240/244), are also dramatically inhibited following its treatment.

Referenties

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-AKT / p-ERK p-S6 / S6
S2743-WB1
23826249
Growth inhibition assay Cell viability
S2743-viability1
28029662

Informatie over klinische proeven (Clinical Trial Information)

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2018-10-29)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT01347866 TERMINATED
Advanced Cancer
Pfizer
 2011-10 PHASE1
NCT01658176 WITHDRAWN
Breast Neoplasms
Pfizer
 2013-01 PHASE2
NCT01420081 TERMINATED
Endometrial Neoplasms
Pfizer
 2012-01-19 PHASE2
NCT01658176 Withdrawn
Breast Neoplasms
Pfizer
 2013-01 Phase 2
NCT01430585 TERMINATED
Early Breast Cancer (Phase 2); Advanced Breast Cancer (Phase 1b)
Pfizer
 2012-03 PHASE2
NCT01420081 Terminated
Endometrial Neoplasms
Pfizer
 2012-01-19 Phase 2