Name: H-89 Dihydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S1582
Rating: 5 (195 reviews)

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.48%

99.48

Gerelateerde doelwitten	PI3K Akt mTOR GSK-3 ATM/ATR DNA-PK AMPK PDPK1 PTEN PP2A
Overig PKA Inhibitoren	Dibutyryl cAMP (db cAMP/Bucladesine) sodium 8-Bromo-cAMP (8-Br-cAMP) Sodium Salt H-89 PKI 14-22 amide,myristoylated Bucladesine calcium A-3 hydrochloride Malantide CREBtide PKI(5-24)

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Concentratie	Incubatietijd	Formulering	Activiteitsbeschrijving	PMID
CHO	Growth Inhibition Assay	10 μM	1 h		inhibits 5-HT induced cAMP production decrease	12569069
SK-N-MC	Function Assay	30 μM	24 h	DMSO	reduces the down-regulation of β1-AR by isoproterenol by 50%	11705454
Sf9	Function assay				Inhibition of His-tagged human MSK1 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.12 μM.	10998351
Sf9	Function assay				Inhibition of rat ROCK2 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.27 μM.	10998351
SF9	Function assay				Inhibition of human PKBalpha expressed in SF9 cells, IC50 = 2.6 μM.	10998351
OVCAR8	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human OVCAR8 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24508830
OVCAR8	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human OVCAR8 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM.	24389511
HL60	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HL60 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 11.4 μM.	24389511
PC3M	Function assay				Inhibition of GSK3-beta in human PC3M cells by ELISA, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human U87MG cells by SRB assay, IC50 = 15 μM.	18345609
U87MG	Antiproliferative assay		96 hrs		Antiproliferative activity against human U87MG cells after 96 hrs by SRB assay, IC50 = 15 μM.	20151677
HCT116	Cytotoxicity assay		72 hrs		Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24508830
HCT116	Antiproliferative assay		72 hrs		Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM.	24389511
PC3M	Function assay		96 hrs		Inhibition of PC3M cells by SRB assay after 96 hrs, GI50 = 18 μM.	17451235
PC3M	Growth inhibition assay				Growth inhibition of human PC3M cells by SRB assay, IC50 = 18 μM.	18345609
LS174T	Function assay	20 uM	6 hrs		Inhibition of PGE2-stimulated TCF/LEF transactivation in human LS174T cells at 20 uM measured after 6 hrs by dual luciferase reporter gene assay	27736063
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	519.28	Formule	C₂₀H₂₀BrN₃O₂S.2HCl	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	130964-39-5	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	C1=CC2=C(C=CN=C2)C(=C1)S(=O)(=O)NCCNCC=CC3=CC=C(C=C3)Br.Cl.Cl

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : 10 mg/mL

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.63mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	PKA (Cell-free assay) 48 nM(Ki) S6K1 (Cell-free assay) 80 nM PKG (Cell-free assay) 0.48 μM(Ki)
In vitro	H89 2HCl is een potente PKA (cAMP-afhankelijke) proteïne kinase A-remmer met een K_i van 48 nM, vertoont een 10-voudige selectiviteit ten opzichte van PKG, en vertoont een >500-voudige selectiviteit ten opzichte van PKC, MLCK, calmodulin kinase II en caseïne kinase I/II. Voorbehandeling van de cellen met deze verbinding (30 μM) 1 uur vóór de toevoeging van forskolin remt de forskoline-geïnduceerde eiwitfosforylering op een dosisafhankelijke manier aanzienlijk. Deze verbinding remt ook verschillende andere kinasen met IC50-waarden van respectievelijk 80, 120, 135, 270, 2600 en 2800 nM voor S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα en MAPKAP-K1b. Het heeft ook activiteit bij sommige cellulaire receptoren en ionkanalen, waaronder Kv1.3 K⁺-kanalen, β1AR en β2AR.
Kinase Assay	PKA enzymactiviteit
Kinase Assay	cAMP-afhankelijke proteïnekinase-activiteit wordt geanalyseerd in een reactiemengsel dat, in een eindvolume van 0,2 ml, 50 mM Tris-HC1 (pH 7,0), 10 mM magnesiumacetaat, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP of afwezigheid van cAMP, 3,3-20 μM [γ-³²P]ATP (4 × 10⁵ cpm), 0,5 μg van het enzym, 100 μg histone H2B, en elk compound, zoals aangegeven, bevat.
In vivo	H89 veroorzaakt duidelijke modificaties van eiwitfosforylering, waarbij de meest robuuste veranderingen in fosforylering fructose-1,6-bifosfatase, heterogeen nucleair ribonucleoproteïne (hnRNP), NSFL1 cofactor p47 zijn, die allemaal potentieel regulerende verbanden hebben met cAMP/PKA.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2156866/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10998351/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17214602/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18523239/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16687476/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	p-eNOS / T-eNOS / p-PKA p-GPIbβ / GPIbβ / p-BAD p-S6K1 / p-rpS6 / p-GSK3β		31035633
Immunofluorescence	p-eNOS / eNOS iNOS / NFκB p65 myopodin		30513637

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

H-89 Dihydrochloride PKA remmer

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 519.28