Home JAK/STAT JAK remmer AT9283

alleen voor onderzoeksdoeleinden

AT9283 JAK remmer

Cat.nr.S1134

AT9283 is een potente JAK2/3 remmer met een IC50 van 1,2 nM/1,1 nM in celvrije assays; ook potent tegen Aurora A/B, Abl1(T315I).
AT9283 JAK remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 381.43

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.82%
99.82

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
HCT116 Cytotoxicity assay 10 to 14 days Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as number of colonies after 10 to 14 days by colony forming assay, IC50=0.012μM 19143567
HCT116 Function assay 10 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 10 mg/kg, po, Cmax=0.45μM 19143567
HCT116 Function assay 5 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 5 mg/kg, iv, Cmax=4.9μM 19143567
HCT116 Function assay 20 mg/kg Cmax in BALB/c mouse bearing human HCT116 cells at 20 mg/kg, ip, Cmax=8.4μM 19143567
HT-29 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human HT-29 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.383μM 23664099
A549 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human A549 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.512μM 23664099
LoVo Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human LoVo cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=0.553μM 23664099
K562 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human K562 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=1.6μM 23664099
U937 Antitumor assay 72 hrs Antitumor activity against human U937 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50=6.7μM 23664099
BL21 (DE3) Function assay 30 mins Inhibition of His6-tagged MELK catalytic domain (1 to 340 residues) (unknown origin) expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) cells using Bcl-GL as substrate measured after 30 mins in presence of [gamma32P]ATP by liquid scintillation counting method, IC50=0.685μM 28351607
Sf9 Function assay Binding affinity to N-terminal TEV-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH1 domain (840 to 1132 residues) expressed in baculovirus-infected Sf9 cells by ITC assay, Kd=0.011μM 28626521
Sf9 Function assay Binding affinity to C-terminal thrombin-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH2 pseudokinase domain (536 to 812 residues) W659A/W777A/F794H mutant expressed in baculovirus-infected Sf9 cells by ITC assay, Kd=1.323μM 28626521
Sf9 Function assay 10 uM 60 mins Displacement of BODIPY-ATP from C-terminal thrombin-cleavable hexa-histidine tagged human JAK2 JH2 pseudokinase domain (536 to 812 residues) W659A/W777A/F794H mutant expressed in baculovirus-infected Sf9 cells at 10 uM after 60 mins by high-throughput flu 28626521
HCT116 Function assay Inhibition of Aurora B kinase in human HCT116 cells assessed as reduction in polyploid phenotype, IC50=0.03μM 28918096
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
BT-37 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
U-2 OS qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
SK-N-SH qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
fibroblast cells qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for control Hh wild type fibroblast cells 29435139
Rh41 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh41 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells 29435139
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 381.43 Formule

C19H23N7O2

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 896466-04-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1CC1NC(=O)NC2=C(NN=C2)C3=NC4=C(N3)C=C(C=C4)CN5CCOCC5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 76 mg/mL (199.25 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 25 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
JAK3
(Cell-free assay)
1.1 nM
JAK2
(Cell-free assay)
1.2 nM
Aurora A
(Cell-free assay)
~3.0 nM
Aurora B
(Cell-free assay)
~3.0 nM
Abl1 (T315I)
(Cell-free assay)
4 nM
GSK-3β
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
FGFR2
(Cell-free assay)
1-10 nM
VEGFR3/FLT4
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
Mer
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RET
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RSK2
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
RSK3
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
TYK2
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
YES
(Cell-free assay)
1 nM-10 nM
Abl (Q252H)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
DRAK1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR1 (V561M)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR2 (N549H)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FGFR3
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
VEGFR1/FLT1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
FLT3
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PDGFRα (D842V)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PDK-1
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
PKCμ
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
RSK4
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
Src (T341M)
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
VEGFR2
(Cell-free assay)
10 nM-30 nM
In vitro

AT9283 leidt tot een duidelijk polyploïd fenotype door de activiteit van Aurora B kinase in HCT116 cellen te remmen met een IC50 van 30 nM. Bovendien produceert deze verbinding ook een potente remming van de HCT116 kolonieformatie.

Kinase Assay
Aurora A en Aurora B Kinase Assays
Assays voor Aurora A en B worden uitgevoerd in een DELFIA-formaat. Aurora A enzym wordt geïncubeerd met AT9283 en 3 μM cross-tide substraat (biotine-CGPKGPGRRGRRRTSSFAEG) in 10 mM MOPS, pH 7, 0,1 mg/mL BSA, 0,001% Brij-35, 0,5% glycerol, 0,2 mM EDTA, 10 mM MgCl2, 0,01% β-mercapto-ethanol, 15 μM ATP en 2,5% DMSO. Aurora B enzym wordt geïncubeerd met deze verbinding, 3 μM van het bovengenoemde substraat in 25 mM Tris, pH 8,5, 5 mM MgCl2, 0,1 mg/mL BSA, 0,025% Tween-20, 1 mM DTT, 15 μM ATP en 2,5% DMSO. Reacties mogen 60 minuten en 45-90 minuten respectievelijk voor Aurora A en Aurora B plaatsvinden, voordat ze met EDTA worden afgevangen. De reactiemengsels worden vervolgens overgebracht naar een neutravidine-gecoate plaat, en gefosforyleerd peptide wordt gekwantificeerd door middel van een fosfo-specifiek antilichaam en een met europium gelabeld secundair antilichaam met behulp van tijd-opgeloste fluorescentie (excitatie, 337 nm; emissie, 620 nm). IC50-waarden voor de controleverbindingen zijn 92 nM (Aurora A assay) en 17 nM (Aurora B).
In vivo

Bij HCT116 menselijke coloncarcinoom xenograft dragende muizen, resulteert AT9283-behandeling (15 mg/kg en 20 mg/kg) gedurende 16 dagen in een significante tumorgoei-remming van respectievelijk 67% en 76%. Bovendien vertoont deze verbinding ook een significant langere halfwaardetijd in tumoren (2,5 uur) vergeleken met plasma (0,5 uur) en een bescheiden orale biologische beschikbaarheid bij muizen (Fp.o. = 24%).

Referenties

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Growth inhibition assay Cell viability
S1134-viability1
21430070

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT01145989 Completed
Multiple Myeloma
NCIC Clinical Trials Group|Astex Pharmaceuticals Inc.|Canadian Cancer Trials Group
 February 15 2011 Phase 2
NCT00443976 Completed
Non-Hodgkins Lymphoma|Unspecified Adult Solid Tumor Protocol Specific
NCIC Clinical Trials Group|Astex Pharmaceuticals Inc.|Canadian Cancer Trials Group
 January 30 2007 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.