alleen voor onderzoeksdoeleinden

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chemisch

Cat.nr.S6928

Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC, Fluorescein isothiocyanate isomeer I, 5-FITC) is een fluorescerende probe die geconjugeerd kan worden aan weefsel en eiwitten.
Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) Dyes chemisch Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 389.38

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S692801 DMSO]78 mg/mL]false]Ethanol]10 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 98.88%
  • Geciteerd in Nature Medicine vanwege de topkwaliteit
  • COA
  • NMR
  • SDS
  • Datasheet
98.88

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 389.38 Formule

C21H11NO5S

Opslag (vanaf de datum van ontvangst) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-nr. 3326-32-7 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen Fluorescein isothiocyanate isomer I, 5-FITC Smiles OC1=CC2=C(C=C1)C3(OC(=O)C4=C3C=CC(=C4)N=C=S)C5=C(O2)C=C(O)C=C5

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 78 mg/mL (200.31 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 10 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

In vitro

1.Eiwitvoorbereiding
1) Om het beste labelings effect te verkrijgen, gelieve de eiwit (antilichaam) concentratie van 2 mg/mL te bereiden.
2) De pH-waarde van de eiwitoplossing dient 8.5 ± 0.5 te zijn. Indien de pH lager is dan 8.0, dient 1M natriumbicarbonaat gebruikt te worden voor aanpassing.
3) Indien de eiwitconcentratie lager is dan 2 mg/ml, zal de labelings efficiëntie aanzienlijk verminderd zijn. Om de beste labelings efficiëntie te verkrijgen, wordt aanbevolen dat het uiteindelijke eiwitconcentratiebereik 2-10 mg/mL is.
4) Het eiwit moet zich in de buffer bevinden zonder primair amine (zoals Tris of glycine) en ammoniumion, anders wordt de labelings efficiëntie beïnvloed.
2.Kleurstofvoorbereiding
Voeg watervrij DMSO toe aan het flesje Fluorescein-5-isothiocyanate (FITC) om een 10 mM stockoplossing te maken. Goed mengen door pipetteren of vortexen.
3.Berekening van de kleurstofdosering
De benodigde hoeveelheid van deze verbinding voor de reactie is afhankelijk van de hoeveelheid te labelen eiwit, en de optimale molaire verhouding ervan tot eiwit is ongeveer 10.
Voorbeeld: stel dat het benodigde marker eiwit 1 mL 2 mg/mL IgG (MW=150.000) is, gebruik dan 1 mL DMSO om 1 mg FITC op te lossen, het benodigde volume is 40 μL.
4.Conjugatiereactie uitvoeren
1) Een goed volume vers bereide 10 mg/mL FITC wordt langzaam toegevoegd aan 0.5 mL eiwitmonster. In oplossing voorzichtig schudden om te mengen, dan kort centrifugeren om het monster onderin de reactiebuis te verzamelen. Niet goed mengen om denaturatie en inactivatie van eiwitmonsters te voorkomen.
2) De reactiebuisjes werden op een donkere plaats geplaatst en voorzichtig geïncubeerd bij kamertemperatuur gedurende 60 minuten met tussenpozen. Gedurende 10-15 minuten de reactiebuisjes meerdere malen voorzichtig omkeren om de twee reactanten volledig te mengen en de bar efficiëntie te verhogen.
5.Conjugatie zuiveren
Het volgende protocol is een voorbeeld van kleurstof-eiwitconjugaat zuivering met behulp van een Sephadex G-25 kolom.
1) Bereid de Sephadex G-25 kolom voor volgens de instructies van de fabrikant.
2) Breng het reactiemengsel (van ""Conjugatiereactie uitvoeren"") aan op de bovenkant van de Sephadex G-25 kolom.
3) Voeg PBS (pH 7.2-7.4) toe zodra het monster net onder het bovenste harsoppervlak loopt.
4) Voeg meer PBS (pH 7.2-7.4) toe aan het gewenste monster om de kolomzuivering te voltooien.
Combineer de fracties die het gewenste kleurstof-eiwitconjugaat bevatten.

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Werving Aandoeningen Sponsor/medewerkers Startdatum Fasen
NCT05312411 Recruiting
Osteosarcoma
Seattle Children''s Hospital|Umoja BioPharma Inc.
May 20 2022 Phase 1
NCT02743468 Completed
Polymorphism|Lung Inflammation
National Institute of Environmental Health Sciences (NIEHS)|National Institutes of Health Clinical Center (CC)
January 8 2019 --
NCT02878083 Terminated
ULCERATIVE COLITIS
Nantes University Hospital|Takeda|Mauna Kea Technologies|Institut National de la Santé Et de la Recherche Médicale France
January 11 2017 Not Applicable

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.