alleen voor onderzoeksdoeleinden

Hoechst 33342 Dyes Chemisch

Cat.nr.: S0485

Hoechst 33342 (Pibenzimol, bisBenzimide H 33342, HOE 33342, HO342) is een membraandoorlatende fluorescerende kleurstof die levende cellen kan kleuren. Deze verbinding bindt zich aan adenine-thymine-rijke gebieden van DNA in de kleine groef en verhoogt de fluorescentie aanzienlijk. Hierdoor kunnen de kern in interfase-cellen en chromosomen in mitotische cellen gemakkelijk worden gevisualiseerd.
Hoechst 33342 Dyes Chemisch Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 452.55

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.94%
99.94

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 452.55 Formule

C27H28N6O

Opslag (vanaf de datum van ontvangst) 3 years -20°C powder
CAS-nr. 23491-52-3 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen Pibenzimol, bisBenzimide H 33342, HOE 33342, HO342 Smiles CCOC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=C(N2)C=C(C=C3)C4=NC5=C(N4)C=C(C=C5)N6CCN(CC6)C

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

Water : 90 mg/mL

DMSO : 10 mg/mL (22.09 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
DNA
In vitro

1.1 Bereiding van de stockoplossing
Los 10 mg Hoechst 33342 op in 5 ml DMSO
Opmerking: Het wordt aanbevolen om de stockoplossing bij 4 °C of -20 °C te bewaren, uit de buurt van licht, en herhaalde vries-dooicycli te vermijden.
1.2 Bereiding van deze werkoplossing
Verdun de stockoplossing in serumvrij celkweekmedium of PBS om een uiteindelijke concentratie van 10 μg/ml van deze chemische werkoplossing te verkrijgen.
Opmerking: Pas de concentratie van deze werkoplossing aan op basis van de feitelijke situatie.
1. Celfarvingen
2.1 Suspensiecellen (6-wells-plaat)
a. Centrifugeer gedurende 3-5 minuten bij 1000 g bij 4 °C en gooi vervolgens het supernatant weg. Was tweemaal met PBS, telkens gedurende 5 minuten. De celdichtheid is 1×106/ml.
b. Voeg 1 ml werkoplossing toe en incubeer vervolgens 3-10 minuten bij kamertemperatuur.
c. Centrifugeer 3-4 minuten bij 400 g bij 4 °C en gooi vervolgens het supernatant weg.
d. Was tweemaal met PBS, telkens 5 minuten.
e. Resuspendeer de cellen met serumvrij celkweekmedium of PBS. Observatie met fluorescentiemicroscopie of flowcytometrie.
2.2 Hechtende cellen
a. Kweek hechtende cellen op steriele dekglaasjes.
b. Verwijder het dekglaasje uit het medium en zuig overtollig medium op.
c. Voeg 100 μL werkoplossing toe, schud voorzichtig om de cellen volledig te bedekken en incubeer vervolgens 3-10 minuten bij kamertemperatuur.
d. Was tweemaal met medium, telkens 5 minuten. Observatie met fluorescentiemicroscopie of flowcytometrie.

Referenties