alleen voor onderzoeksdoeleinden

D-Luciferin Potassium Salt Dyes remmer

Cat.nr.S6580

D-luciferine is het natuurlijke substraat van het enzym luciferase (Luc), dat de productie van het typische geelgroene licht van vuurvliegjes katalyseert. De 560 nm chemiluminescentie van deze reactie piekt binnen enkele seconden, met een lichtopbrengst die evenredig is met de luciferaseconcentratie wanneer het substraat luciferine in overmaat aanwezig is. Het luciferase (luc)-gen is een populair reportergen voor onderzoek en screeningsmethoden. Chemiluminescente technieken zijn vrijwel achtergrondvrij, waardoor het luc-reportergen ideaal is voor het detecteren van lage niveaus van genexpressie. Naast zijn rol als reporter van genexpressie, wordt luciferase vaak gebruikt in een extreem gevoelige test voor ATP.
D-Luciferin Potassium Salt Dyes remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 318.41

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.97%
99.97

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht 318.41 Formule

C11H7KN2O3S2

Opslag (vanaf de datum van ontvangst) 3 years -20°C(in the dark) powder
CAS-nr. 115144-35-9 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)[O-].[K+]

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

Water : 39 mg/mL

DMSO : 5 mg/mL (15.7 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

In vitro

1.Voorbeeldprotocol voor in vitro bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 100 mM (100-200X) Luciferine stockoplossing in steriel water. Goed mengen. Onmiddellijk gebruiken, of eenmalige aliquots maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 0,5-1 mM werkoplossing van D-Luciferin in voorverwarmd weefselkweekmedium.
c) Aspireer medium uit gekweekte cellen.
d) Voeg de Luciferine werkoplossing toe aan de cellen en incubeer de cellen gedurende 5-10 minuten bij 37℃ vlak voor beeldvorming.
2.Voorbeeldprotocol voor in vivo bioluminescente beeldvormingsassays
a) Bereid een 15 mg/mL Luciferine stockoplossing in DPBS, zonder Mg2+ en Ca2+. Goed mengen.
b) Filtreer de oplossing steriel door een 0,2 μm filter. Onmiddellijk gebruiken, of eenmalige aliquots maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
c) Injecteer de luciferine intraperitoneaal (i.p.) 10-15 minuten voor beeldvorming met 150 mg/kg (of 10 μL/g luciferine stockoplossing) van het dierlijk lichaamsgewicht.
Opmerking: Een kinetische studie van luciferine moet voor elk dierenmodel worden uitgevoerd om de piek signaaltijd te bepalen.
3.Voorbeeldprotocol voor luciferine reporterassays
a) Bereid een 100 mM Luciferine stockoplossing in steriel water. Onmiddellijk gebruiken, of eenmalige aliquots maken en bewaren bij -20℃, vermijd vries-dooi cycli, vermijd blootstelling aan licht.
b) Bereid een 1 mM werkoplossing van D-Luciferin met 3 mM ATP, 1 mM DTT en 15 mM MgSO4 in 25 mM tricine buffer pH 7.8.
c) Pipetteer 5-10 μL cellelysaat in een microplaat. Gebruik lyse reagens of buffer zonder lysaat als blanco.
d) Prime luminometer met luciferine werkoplossing.
e) Injecteer 200 μL luciferine werkoplossing zonder vertraging en met een integratietijd van 10 seconden.

Referenties

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

Voer uw naam in.
Voer uw e-mailadres in. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.