Opaganib (ABC294640) SPHK remmer

Spring naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.73%

99.73

Gerelateerde doelwitten	PD-1/PD-L1 CXCR STING AhR Immunology & Inflammation related CD markers Interleukins Anti-infection Antioxidant COX
Overig SPHK Inhibitoren	PF-543 hydrochloride SKI II K6PC-5 Defensamide (MHP) SKI-V SKI-178

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving	PMID
Sf9	Function assay		Inhibition of human recombinant SphK2 expressed in Sf9 cells assessed as radiolabeled products using 10 uM sphingosine and 10 uM gamma[32P]ATP by liquid scintillation counting, Ki=9.8μM	25643074
Sf9	Function assay	2 hrs	Inhibition of recombinant human full-length N-terminal His-tagged SK2 expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells using NBD-Sph as substrate measured after 2 hrs by fluorescence based HPLC analysis, Ki=9.8μM	30889352
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit

Molecuulgewicht	380.91	Formule	C₂₃H₂₅ClN₂O	Opslag (vanaf de datum van ontvangst)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	915385-81-8	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	C1C2CC3(CC1CC(C2)(C3)C(=O)NCC4=CC=NC=C4)C5=CC=C(C=C5)Cl

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 76 mg/mL (199.52 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 28 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Molecuulgewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	10%DMSO 1 40%PEG300 2 5%TWEEN80 3 45%ddH2O Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	24.000mg/ml (63.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 100 μL of 240 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 450 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH₂O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC₅₀/Ki	SphK2 (Cell-free assay) 60 μM
In vitro	Opaganib (ABC294640) verandert de verhouding ceramide/S1P significant, wat consistent is met de remming van SK-activiteit in MDA-MB-231 cellen. Het remt de proliferatie van tumorcellen met IC50-waarden variërend van ongeveer 6 tot 48 μM, en belemmert de migratie van tumorcellen gelijktijdig met verlies van microfilamenten. Deze verbinding induceert niet-apoptotische celdood, morfologische veranderingen in lysosomen, vorming van autofagosomen en toenames in zure vesikels in A-498, PC-3 en MDA-MB-231 cellen. Zowel in MCF-7 als in ER-getransfecteerde HEK293 cellen vermindert het de E2-gestimuleerde ERE-luciferase-activiteit.
Kinase Assay	Sfingosine Kinase Assays
Kinase Assay	De IC50-waarden voor Opaganib (ABC294640) en DMS worden bepaald door een nieuw ontwikkelde HPLC-gebaseerde SK-activiteitsassay. Kortom, de testverbindingen worden geïncubeerd met recombinant SK1 of SK2 en NBD-Sph in de isozym-selectieve assaybuffers die hieronder gedetailleerd zijn, met 1 mg/ml vetzuurvrij bovine serumalbumine, 100 μM ATP en 400 μM MgCl₂. Het product, d.w.z. NBD-S1P, wordt gescheiden van NBD-Sph door HPLC als volgt: Waters 2795 HPLC-systeem met een Waters 2495 fluorescentiedetector, C8 Chromolith RP-8e kolom (100 × 4.6 mm), 1 ml/min mobiele fase (acetonitril/20 mM natriumfosfaatbuffer, pH 2.5, bij 45:55). Fluorescentie wordt gemonitord met excitatie bij 465 nm en emissie bij 531 nm. De verhouding NBD-S1P/(NBD-Sph + NBD-S1P) wordt gebruikt als maat voor SK-activiteit. SK-isozym-selectieve assaybuffers bevatten elk 20 mM Tris, pH 7.4, 5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 3 mM β-mercaptoethanol, 5% glycerol, 1× protease-remmers en 1× fosfataseremmers. Voor de SK1 assaybuffer wordt 0.25% (uiteindelijk) Triton X-100 toegevoegd; en voor de SK2 buffer wordt 1 M (uiteindelijk) KCl toegevoegd. Assays worden 2 uur bij kamertemperatuur uitgevoerd, en vervolgens wordt 1.5 volume methanol toegevoegd om de kinasereactie te beëindigen. Na 10 min worden de monsters gecentrifugeerd bij 20.000 g om het geprecipiteerde eiwit te pelleteren, en de supernatanten worden geanalyseerd door HPLC. In experimenten om de Ki voor de remming van SK2 door deze verbinding te bepalen, wordt het ADP Quest assay-systeem gebruikt om de kinase-activiteit te meten in aanwezigheid van variërende concentraties sphingosine en het. Om de effecten van Opaganib op cellulaire SK-activiteit te bepalen, worden bijna-confluente MDA-MB-231 cellen 's nachts serum-verhongerd en vervolgens behandeld met variërende concentraties ervan. De cellen worden vervolgens geïncubeerd met [³H]sphingosine bij een uiteindelijke concentratie van 1 μM. De cellen nemen de exogene sphingosine op, die via SK-activiteit wordt omgezet in S1P, en [³H]S1P wordt gescheiden van [³H]sphingosine door extractie en gekwantificeerd door scintillatietelling.
In vivo	Opaganib (ABC294640) vermindert de tumorgroei significant in muizen met mammacarcinoom xenotransplantaten, geassocieerd met uitputting van S1P-niveaus. In ernstige gecombineerde immuundeficiënte muizen met A-498 xenotransplantaten vertraagt het de tumorgroei en verhoogt het autofagiemarkers. Deze verbinding beschermt ook tegen door levertransplantatie geïnduceerde ontsteking en cross-talk tussen aangeboren en adaptieve immuniteiten, belangrijke gebeurtenissen die graftletsel veroorzaken en verergeren, en verbetert de leverfunctie en overleving.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20061445/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20179157/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20861237/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22848628/

Toepassingen

Methoden	Biomarkers	Afbeeldingen	PMID
Western blot	c-Myc pRb / Rb H3K9ac / p21 p-STAT3 / STAT3		27517489
Growth inhibition assay	Cell proliferation		25122609

Informatie over klinische proeven

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer	Werving	Aandoeningen	Sponsor/medewerkers	Startdatum	Fasen
NCT02939807	Withdrawn	Carcinoma Hepatocellular	Medical University of South Carolina\|National Cancer Institute (NCI)\|Apogee Biotechnology Corporation	September 30 2019	Phase 2
NCT03377179	Completed	Cholangiocarcinoma\|Cholangiocarcinoma Non-resectable\|Cholangiocarcinoma Perihilar\|Cholangiocarcinoma Extrahepatic\|Cholangiocarcinoma Intrahepatic	RedHill Biopharma Limited	March 7 2018	Phase 2
NCT02757326	Terminated	Multiple Myeloma	RedHill Biopharma Limited\|Apogee Biotechnology Corporation\|Duke University\|National Cancer Institute (NCI)	December 13 2016	Phase 1\|Phase 2
NCT02229981	Withdrawn	Diffuse Large B Cell Lymphoma\|Kaposi Sarcoma	RedHill Biopharma Limited\|Louisiana State University Health Sciences Center in New Orleans\|Apogee Biotechnology Corporation	July 2014	Phase 1\|Phase 2
NCT01488513	Completed	Pancreatic Cancer\|Unspecified Adult Solid Tumor Protocol Specific	RedHill Biopharma Limited\|Apogee Biotechnology Corporation\|Medical University of South Carolina\|FDA Office of Orphan Products Development\|National Cancer Institute (NCI)	August 2011	Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 380.91