Home PI3K/Akt/mTOR PDPK1 Remmer OSU-03012 (AR-12)

alleen voor onderzoeksdoeleinden

OSU-03012 (AR-12) PDPK1 Remmer

Cat.nr.: S1106

OSU-03012 (AR-12) is een potente remmer van recombinant PDK-1 (fosfoinositide-afhankelijke kinase 1) met een IC50 van 5 μM in een celvrije test, met een 2-voudige toename in potentie ten opzichte van OSU-02067.
OSU-03012 (AR-12) PDPK1 Remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Molecuulgewicht: 460.45

Spring naar

Kwaliteitscontrole (Quality Control)

Batch: Zuiverheid: 99.22%
99.22

Celkweek, behandeling & werkzame concentratie
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
mouse RAW264.7 cells Function assay 8 h Antimicrobial activity against Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028 infected in mouse RAW264.7 cells assessed as inhibition of intracellular bacterial growth after 8 hrs, IC50=0.2 μM
mouse RAW264.7 cells Cytotoxic assay 24 h Cytotoxicity against mouse RAW264.7 cells assessed as cell viability after 24 hrs by MTT assay, IC50=10 μM
Klik om meer experimentele gegevens over cellijnen te bekijken

Chemische informatie, opslag en stabiliteit (Chemical Information, Storage & Stability)

Molecuulgewicht 460.45 Formule

C26H19F3N4O

 Opslag (vanaf de datum van ontvangst)
CAS-nr. 742112-33-0 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles C1=CC=C2C(=C1)C=CC3=C2C=CC(=C3)C4=CC(=NN4C5=CC=C(C=C5)NC(=O)CN)C(F)(F)F

Oplosbaarheid (Solubility)

In vitro
Batch:

DMSO : 92 mg/mL (199.8 mM)
(Met vocht verontreinigd DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 6 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Molecuulgewicht
Verdunningscalculator Molecuulgewichtcalculator

In vivo
Batch:

In vivo formulatiecalculator (heldere oplossing)

Stap 1: Voer onderstaande informatie in (Aanbevolen: een extra dier om rekening te houden met verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in de sectie oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-moedervloeistof: mg geneesmiddel vooropgelost in μL DMSO ( Concentratie moedervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de batch van het geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toeμL PEG300, mengen en verhelderen, daarna toevoegenμL Tween 80, mengen en verhelderen, daarna toevoegen μL ddH2O, mengen en verhelderen.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO moedervloeistof, voeg daarna toe μL Maïsolie, mengen en verhelderen.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysieke methoden zoals vortexen, ultrasoon of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PDPK1
(Cell-free assay)
5 μM
In vitro

OSU-03012 (AR-12) induces apoptotic death in PC-3 cells with IC50 of 5 µM and reduces the activity of immunoprecipitated p70S6K. It completely suppresses cell growth in a diverse range of tumor cell lines at concentrations of 3–5 μm, as compared with the concentration of at least 50 μm. This compound promotes cell killing to a greater extent in glioma cells than in nontransformed astrocytes. It causes a dose-dependent induction of cell death that is not altered by p53 mutation, expression of ERBB1 VIII, or loss of phosphatase and tensin function due to a homolog deletion on chromosome 10. OSU-03012 and ionizing radiation cause an additive, caspase-independent elevation in cell killing. Its lethality as a single agent or when combined with signaling modulators is not modified in cells lacking expression of BIM or of BAX/BAK. It promotes the release of cathepsin B from the lysosomal compartment and that of AIF from mitochondria. The lethality of this compound is attenuated in protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase-/- cells, which correlated with the reduced cleavage of BID and suppression of cathepsin B and AIF release into the cytosol. It inhibits thyroid cancer cell (NPA, WRO, and ARO cells) proliferation, migration and induces apoptosis, which results in an increase of cells in the S phase without an increase of cells in G2. OSU-03012 is an ATP-competitive inhibitor of PAK activity and suppresses the phosphorylation of AKT in thyroid cancer cells. It inhibits cell growth of hepatocellular carcinoma cell lines including Huh7, Hep3B and HepG2 cells with IC50 values below 1 μM. This compound does not suppress PDK1 or AKT activity or induce cellular apoptosis but induces autophagy in Huh7 cells. Moreover, accumulation of reactive oxygen species (ROS) is detected after its treatment. A recent study shows that it could enhance the susceptibility of (Bcr)-Abl mutant cell lines to -induced apoptosis.

Kinase Assay
PDK-1 Kinase Test
Deze in vitro test wordt uitgevoerd met behulp van een PDK-1 kinase testkit. Deze celvrije test is gebaseerd op het vermogen van recombinant PDK-1, in aanwezigheid van DMSO-drager of OSU-03012 (AR-12), om zijn stroomafwaartse serum- en glucocorticoïd-gereguleerde kinase te activeren, dat op zijn beurt het Akt/serum- en glucocorticoïd-gereguleerde kinase-specifieke peptidesubstraat RPRAATF fosforyleert met [γ-32P]ATP. Het 32P-gefosforyleerde peptidesubstraat wordt vervolgens gescheiden van het resterende [γ-32P]-ATP door gebruik te maken van P81 fosfocellulosepapier en gekwantificeerd in een scintillatieteller na drie wassingen met 0,75% fosforzuur.
In vivo

OSU-03012 (AR-12) suppresses tumor growth by 57.59% and increases cleaved LC3 in Huh7 tumor xenografts at 200 mg/kg. This compound remarkably decreases expression of EGFR protein in the tumors by 48% compared with vehicle controls and also prevents YB-1 from binding to the EGFR promoter in MDA-MB-435/LCC6 xenografts. It is well tolerated and inhibits the growth of HMS-97 schwannoma xenografts by 55% after oral administration.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19010909/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15665113/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17595327/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19359162/

Toepassingen (Applications)

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-Akt / Akt
S1106-WB1
18413750
Growth inhibition assay Cell viability
S1106-viability1
18413750