Name: EPZ004777
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7353
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Contrôle qualité

Lot : Pureté : 99.09%

99.09

Cibles apparentées	HDAC JAK BET PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK Histone Acetyltransferase
Autre Histone Methyltransferase Inhibiteurs	Pinometostat (EPZ5676) 3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride BIX-01294 trihydrochloride UNC1999 EPZ015666 (GSK3235025) MM-102 (HMTase Inhibitor IX) Chaetocin SGC 0946 EPZ005687 UNC0638

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Temps dincubation	Description de lactivité	PMID
MOLM13	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MV4-11	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM.	23879463
THP1	Antiproliferative assay		Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM.	23879463
MCF10A	Function assay		Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM.	25406853
MLL	Function assay		Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
MLL	Function assay		Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM.	23879463
Sf9	Function assay		Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM.	25893041
BHK	Antiviral assay	8 days	Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM.	30170321
MV4-11	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
MOLM13	Function assay	6 days	Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM.	ChEMBL
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	539.67	Formule	C₂₈H₄₁N₇O₄	Stockage (À partir de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	1338466-77-5	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	N/A			Smiles	CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 100 mg/mL (185.29 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 100 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	5.000mg/ml (9.26mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to make it clear; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	DOT1L (Cell-free assay) 0.4 nM
In vitro	EPZ004777 inhibe sélectivement la méthylation H3K79 cellulaire et inhibe l'expression des gènes cibles de fusion MLL clés. Après inhibition de DOT1L, ce composé inhibe sélectivement la prolifération des lignées cellulaires MLL-réarrangées et des cellules hématopoïétiques murines transformées par MLL-AF9. De plus, il induit également la différenciation et l'apoptose dans les cellules MLL-réarrangées. Ce produit chimique inhibe sélectivement la prolifération des cellules de moelle osseuse murines transformées par MLL–AF10 et CALM–AF10. L'inhibition de DOT1L par cet agent entraîne une prolifération significativement diminuée, une expression diminuée des gènes cibles de MLL-AF6 et un arrêt du cycle cellulaire des cellules transformées par MLL-AF6.
Kinase Assay	Détermination des valeurs d'IC50 de l'inhibiteur
Kinase Assay	EPZ004777 est dilué en série 3 fois dans du DMSO pour un total de dix concentrations, en commençant à 1 mM. Une aliquote de 1 μL de chaque dilution d'inhibiteur est déposée dans une plaque de microtitration à 384 puits. Le contrôle d'inhibition à 100 % consistait en une concentration finale de 2,5 mM de l'inhibiteur de produit S-adénosyl-L-homocystéine (SAH). Ce composé est incubé pendant 30 min avec 40 ml par puits de 0,25 nM de DOT1L(1-416) dans un tampon d'essai (20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0,002 % Tween 20, 0,005 % gélatine de peau bovine, 100 mM KCl et 0,5 mM DTT). 10 ml par puits de mélange de substrat comprenant un tampon d'essai avec 200 nM de ³H-SAM (American Radiolabeled Chemicals : 80 Ci/mmol), 600 nM de SAM non marqué et 20 nM de nucléosomes sont ajoutés pour initier la réaction (les deux substrats sont présents dans le mélange réactionnel final à leurs valeurs KM respectives). Les réactions sont incubées pendant 120 min et éteintes avec 10 ml par puits de 800 mM de SAM. L'incorporation de radioactivité dans le substrat de nucléosome est mesurée dans une flashplate. Les valeurs d'IC50 pour les enzymes du panneau Histone Methyltransferase sont déterminées dans des conditions d'essai équilibrées similaires avec le SAM et le substrat protéique/peptidique présents à des concentrations égales à leurs valeurs KM respectives.
In vivo	EPZ004777 produit une puissante efficacité antitumorale et augmente significativement la survie médiane dans un modèle de xénogreffe de souris de leucémie MLL.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21741596/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23138183/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23361907/

Applications

Méthodes	Biomarqueurs	Images	PMID
Western blot	H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2		23138183
Growth inhibition assay	Cell viability		25596271