Home Cell Cycle Chk remmer MK-8776 (SCH 900776)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

MK-8776 (SCH 900776) Chk remmer

Cat.Nr.S2735

MK-8776 (SCH 900776) is een selectieve Chk1-remmer met een IC50 van 3 nM in een celvrije test, met een 500-voudige selectiviteit tegen Chk2. Het bevindt zich in Fase 2.
MK-8776 (SCH 900776) Chk remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 376.25

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.98%
99.98

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
SKOV3 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
BxPC-3 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 10-1000 nM 24-48h enhances the chemosensitization to 23804422
H1299 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1993 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H1437 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
H23 Growth Inhibition Assay 500 nM 24 h DMSO enhances the chemosensitization to PMX 24113549
AsPC-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
TK10 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
A498 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U20S Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SNB19 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-435 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U87 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCC2998 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MDA-MB-231 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MiaPaCa-2 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
MCF10A Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT116 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
IGROV-1 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
SW620 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
HCT115 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
U251 Growth Inhibition Assay 200/2000 nM 24 h decreases the IC50 of 24359526
OVCAR-8 Growth Inhibition Assay 0.3 µM 8 d sensitizes the cell lines to 23548269
MV-4-11 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
U937 Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
MOLM-13  Apoptosis Assay 100-700 nM 48 h induces apoptosis dose dependently 23536721
A2058  Cell Viability Assay 37.5-300 nM 72 h DMSO reduces the MK-1775 EC50 by 5-fold to an average of 45 nM 23148684
H2009 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
Su.86.86 Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HRE Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
HMEC Cell Viability Assay 500 nM 72 h DMSO results in G1/S-phase accumulation combined with MK-1775 23148684
U2OS  Function Assay 2 µM 0-24 h induces phosphorylation of Chk1 at serine 345 at both concentrations as early as 2 h after administration 22937147
U2OS  Growth Inhibition Assay 0-10 µM 24/48 h inhibits cell growth dose dependently 22937147
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  decreases the cytarabine-induced Chk1 autophosphorylation at Ser296 and prevents Cdc25A downregulation 22869869
U937 Function Assay 100 nM 4 h  reverses the cytarabine-induced inhibition of 3H-thymidine incorporation into DNA 22869869
U937 Function Assay 100-500 nM 4 h  induces increased phosphorylation of H2AX 22869869
HL-60 Apoptosis Assay 30/100/300 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
ML-1 Apoptosis Assay 25/50/100 nM 24 h DMSO enhances cytarabine-induced apoptosis 22869869
HCT116 Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
U2OS Function Assay 1 µM 24 h abrogates of cell cycle arrest  22510560
Sf9 Function assay Inhibition of recombinant CDK2/Cyclin A expressed in insect Sf9 cells assessed as inhibition of [33P]-ATP incorporation into biotinylated histone H1 after 1 hr by liquid scintillation counting, IC50 = 0.16 μM. 21094607
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 376.25 Formule

C15H18BrN7

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 891494-63-6 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CN1C=C(C=N1)C2=C3N=C(C(=C(N3N=C2)N)Br)C4CCCNC4

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 75 mg/mL (199.33 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
Chk1
(Cell-free assay)
3 nM
CDK2
(Cell-free assay)
0.16 μM
In vitro

MK-8776 (SCH 900776) is een minder potente remmer van Chk2 en CDK2 met respectievelijk een IC50 van 1,5 μM en 0,16 μM. Het vertoont geen significante remming van cytochroom P450 humane lever microsomale isoformen 1A2, 2C9, 2C19, 2D6 en 3A4. In combinatie met een antimetaboliet induceert deze verbinding binnen 2 uur accumulatie van γ-H2AX, wat wijst op replicatievorkinstorting en dubbelstrengs DNA-breuken. Bovendien onderdrukt het de accumulatie van de Chk1 pS296 autofosforylering op een dosisafhankelijke manier. Blootstelling van prolifererende WS1-cellen aan SCH 900776 gaat gepaard met een snelle, dosisafhankelijke accumulatie van Chk1 pS345, wat aangeeft dat cyclerende populaties van normale cellen Chk1 pS345 induceren na blootstelling eraan als onderdeel van een nutteloze cyclus, mogelijk gedreven door AT-familiekinasen en DNA-PK.
Kinase Assay
Chk1 SPA-analyse
Een in vitro-analyse waarbij recombinante His-Chk1, uitgedrukt in het baculovirus-expressiesysteem, als enzymbron wordt gebruikt en een gebiotinyleerd peptide op basis van CDC25C als substraat. His-Chk1 wordt verdund tot 32 nM in kinasebuffer die 50 mM Tris pH 8.0, 10 mM MgCl2 en 1 mM DTT bevat. CDC25C (CDC25 Ser216 C-term gebiotinyleerd peptide) peptide wordt verdund tot 1,93 μM in kinasebuffer. Voor elke kinasereactie worden 20 μL van 32 nM Chk1-enzymoplossing en 20 μL van 1,926 μM CDC25C gemengd en gecombineerd met 10 μL MK-8776 (SCH 900776), verdund in 10% DMSO, wat resulteert in uiteindelijke reactieconcentraties van 6,2 nM Chk1, 385 nM CDC25C en 1% DMSO na toevoeging van startoplossing. De reactie wordt gestart door toevoeging van 50 μL startoplossing bestaande uit 2 μM ATP en 0,2 μCi 33P-ATP, wat een uiteindelijke reactieconcentratie van 1 μM ATP oplevert, met 0,2 μCi 33P-ATP per reactie. Kinasereacties lopen 2 uur bij kamertemperatuur en worden gestopt door toevoeging van 100 μL stopoplossing bestaande uit 2 M NaCl, 1% H3PO4 en 5 mg/mL met streptavidine gecoate SPA-kralen. SPA-kralen worden opgevangen met behulp van een 96-wells GF/B-filterplaat en een Filtermate universele oogster. Kralen worden tweemaal gewassen met 2 M NaCl en tweemaal met 2 M NaCl met 1% fosforzuur. Het signaal wordt vervolgens geanalyseerd met behulp van een TopCount 96-wells vloeibare scintillatieteller. Dosis-respons-curven worden gegenereerd uit dubbele 8-punts seriële verdunningen van deze verbinding. IC50-waarden worden afgeleid door niet-lineaire regressieanalyse.
In vivo

Dosisverhoging van MK-8776 (SCH 900776) (16 mg/kg en 32 mg/kg) induceert incrementele verbeteringen in de tumorrespons. Belangrijk is dat doses van deze verbinding die geassocieerd zijn met robuuste biomarkeractivatie en een verbeterde tumorrespons, niet geassocieerd zijn met verhoogde toxiciteit op hematologische parameters bij BALB/c-muizen.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34267371/

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot Cyclin E / pY15-CDK / γH2AX p-chk1(ser345) / CDC25A
S2735-WB2
26595527

Informatie klinische proef

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT00779584 Completed
Hodgkin Disease|Lymphoma Non-Hodgkin|Neoplasms
Merck Sharp & Dohme LLC
 October 17 2008 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
I would like to know whether your product S2735 is the optically pure R enantiomer or whether it is a racemic mix.

Antwoord:
It is the R enantiomer of our S2735.