Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder

Productvergelijking

Beschrijving

Poly DYKDDDDK Tag Peptide gelyofiliseerd poeder (3X DYKDDDDK Tag Peptide) is een polypeptide bestaande uit 23 aminozuren met een molecuulgewicht van 2864 Da, dat via competitie Anti-DYKDDDDK Tag antilichaam kan binden, zodat het aan Anti-DYKDDDDK Tag antilichaam gebonden antilichaam kan worden geëlueerd tijdens immunoprecipitatie van het DYKDDDDK Tag fusie-expressie-eiwit. Het motief Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp in het polypeptide wordt driemaal herhaald, en de 8 aminozuren aan de koolstof-terminus vormen de klassieke DYKDDDDK Tag (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).

Eigenschappen

Toepassing

Voor gebruik bij competitieve elutie van DYKDDDDK fusie-eiwitten van het ANTI-DYKDDDDK Tag monoklonale antilichaam in oplossing of gebonden aan agarose op de Anti-DYKDDDDK beads.

Let op

1. Lees de gebruiksaanwijzing zorgvuldig door voor het eerste gebruik;

2. Vermijd bevriezen, drogen en snelle centrifugatie tijdens gebruik en opslag van de beads;

3. Dit product is alleen voor R&D-gebruik, niet voor medicijnen, huishoudelijk of ander gebruik. Raadpleeg het Veiligheidsinformatieblad voor informatie over gevaren en veilige hanteringspraktijken.

Procedure

Peptide-elutie van DYKDDDDK fusie-eiwit van Anti-DYKDDDDK beads

1. Suspend de Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel grondig in het flesje, voor een uniforme suspensie van de hars. Breng snel 10 μl van de gelsuspensie (ongeveer 5 μl van het gepakte gelvolume) over naar een nieuw buisje.

2. Voeg 0,6 mL TBS toe. Suspend de Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel grondig door te pipetteren. Centrifugeer de hars 30 seconden bij 5000 tpm en verwijder voorzichtig het supernatant. Zorg ervoor dat alle wasbuffer wordt verwijderd zonder de hars weg te gooien. Herhaal 3-4 keer.

3. Voeg 500 μL cellulaire periplasmatische extracten toe aan de gewassen hars.

4. Roer de monsters voorzichtig 2 uur bij 4°C.

5. Centrifugeer de hars 30 seconden bij 5000 tpm. Breng de supernatanten over naar een nieuw buisje.

6. Was de hars met 0,5 mL TBS totdat de OD280 van het supernatant <0,05 is.

7. Elutie van DYKDDDDK fusie-eiwit door competitie met Poly DYKDDDDK Peptide. Elueer het gebonden DYKDDDDK fusie-eiwit door competitieve elutie met vijf aliquots van één kolomvolume van een oplossing die 200-400 ug/mL Poly DYKDDDDK Peptide in TBS bevat.

8. Recyclen van de Anti-DYKDDDDK beads
Poly DYKDDDDK Peptide kan mogelijk niet alle aan Anti-DYKDDDDK beads gebonden DYKDDDDK fusie-eiwitten elueren. Het wordt aanbevolen de Anti-DYKDDDDK beads onmiddellijk na gebruik te regenereren door te wassen met drie aliquots van 5 mL van 0,1 M glycine HCl, pH 3,5. De gel moet onmiddellijk opnieuw in evenwicht worden gebracht in TBS totdat het effluent een neutrale pH heeft.

Opmerking: Laat de Anti-DYKDDDDK beads niet langer dan 20 minuten in glycine HCl.
9. Opslag van de Anti-DYKDDDDK beads Was de Anti-DYKDDDDK beads driemaal met 5 mL 50% glycerol met 10 mM natriumfosfaat, 150 mM natriumchloride, pH 7,4, dat 0,02% (w/v) natriumazide bevat. Voeg vervolgens nog eens 5 mL 50% glycerol met 10 mM natriumfosfaat, 150 mM natriumchloride, pH 7,4, dat 0,02% (w/v) natriumazide bevat, toe en bewaar bij -20°C zonder af te tappen.

Opslag (vanaf ontvangstdatum)

Bestand downloaden

Gerelateerde andere producten