alleen voor onderzoeksgebruik
Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel is een Proteïne A gezuiverd murien IgG2b Monoklonaal antilichaam dat covalent is gebonden aan sepharose 4B.
Sellecks Is geciteerd door 101 Publicaties
Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel is een Proteïne A gezuiverd murien IgG2b Monoklonaal antilichaam dat covalent is gebonden aan sepharose 4B.
| Antilichaam kloon | 1E6 |
|---|---|
| Antilichaam isotoop | Muis IgG2b |
| Antilichaamzuivering | Proteïne A gezuiverd |
| Gebonden antilichaam | NLT 7,5 gram antilichaam/liter gel |
| Toepassing | Eiwitzuivering, Immunoprecipitatie |
| Product samenstelling | Dit product is een 50% gelsuspensie bereid in een stockoplossing van 10 mM Na3PO4, 150 mM NaCl, 50% glycerol, pH 7,4, bevattende 0,02% (w/v) natriumazide |
| Aanbevolen volume | IP: 5 μl gel voor 500 μl ruwe eiwitoplossing |
| Bindingscapaciteit | Minimaal 1,1 mg van een DYKDDDDK Tag-fusie-eiwit geëlueerd per ml gepakte hars |
| Bindingseigenschappen | Met-N-terminaal DYKDDDDK Tag fusie-eiwit: Met-DYKDDDDK Tag–Eiwit N-terminaal DYKDDDDK Tag fusie-eiwit: DYKDDDDK Tag–Eiwit C-terminaal DYKDDDDK Tag fusie-eiwit: Eiwit-DYKDDDDK Tag |
Het ongeopende product is stabiel bij -20°C gedurende 2 jaar. Na gebruik moet de hars worden gereinigd en opgeslagen in 50% glycerol met 10mM natriumfosfaat, 150 mM natriumchloride, pH 7,4, bevattende 0,02% natriumazide om het product te beschermen. Niet invriezen zonder glycerol.
Dit voorbeeldprotocol wordt aanbevolen voor immunopreciptatie van DYKDDDDK-getagde (DYKDDDDK-tagged) eiwitten.
| Affiniteitsgel Voorbereiding |
1. Suspend de Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel grondig in het flesje, voor een uniforme suspensie van de hars. Breng snel 10 μl van de gelsuspensie (ongeveer 5 μl gepakt gelvolume) over naar een nieuw buisje. 2. Voeg 0,5 ml TBS toe. Suspend de Anti-DYKDDDDK Tag Affinity Gel grondig door te pipetteren. Centrifugeer de hars 30 seconden op 5000 tpm en verwijder voorzichtig het supernatant. Zorg ervoor dat alle wasbuffer wordt verwijderd zonder de hars weg te gooien. Herhaal 3-4 keer. 3. Voeg 500 μl celperiplasmatische extracten toe aan de gewassen hars. 4. Schud de monsters voorzichtig gedurende 2 uur bij 4°C. 5. Centrifugeer de hars gedurende 30 seconden op 5000 tpm. Breng de supernatanten over naar een nieuw buisje. 6. Was de hars met 0,5 ml TBS totdat de OD280 van het supernatant < 0,05 bedraagt. 7. Extreme pH-conditie of overtollige poly DYKDDDDK Tag-peptide kan op de hars worden aangebracht om het DYKDDDDK-getagde eiwit te elueren. Kies elutiemethoden volgens de kenmerken van het doeleiwit en de downstream-applicatie. 8. Voor directe detectie van doeleiwit, voeg 2x SDS-PAGE monsterlaadbuffer toe in een 1:1 verhouding tot 20 μl gelsuspensie. Kook het monster gedurende 5 minuten. Centrifugeer op 5000 tpm gedurende 30 seconden. Breng het supernatant voorzichtig over naar een nieuwe injectieflacon voor SDS-PAGE. |
| Monsterbinding | |
| Harswassen | |
| Elutie en detectie |
Selleck biedt Poly DYKDDDDK Tag Peptide lyophilized powder voor elutie van eiwitproducten.
Als u andere vragen heeft, laat dan een bericht achter.