Name: RAF265 (CHIR-265)
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2161
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Lot : Pureté : 99.98%

99.98

Cibles apparentées	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Autre Raf Inhibiteurs	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 TAK-632 GW5074 PLX8394 (Plixorafenib, FORE8394)

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Concentration	Temps dincubation	Description de lactivité	PMID
SK-MEL-28	Growth inhibition assay			Growth inhibition of SK-MEL-28 cells, IC50=0.14μM.	21576023
MALME-3M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of MALME-3M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375M	Growth inhibition assay			Growth inhibition of A375M cells, IC50=0.14μM.	21576023
A375	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human A375 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
Malme-3M	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human Malme-3M cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
WM-1799	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human WM-1799 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.04μM.	26396681
MALME-3M	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human MALME-3M cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
A375	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human A375 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
WM1799	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human WM1799 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.04μM.	26396681
SK-MEL-28	Function assay			Inhibition of B-RAF V600E mutant in human SK-MEL-28 cells assessed as phosphorylation of ERK, IC50=0.14μM.	26396681
SK-MEL-28	Antiproliferative assay			Antiproliferative activity against human SK-MEL-28 cells harboring B-RAF V600E mutant, IC50=0.16μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg		fCmin in mouse xenografted with human A375M cells at 100 mg/kg, po q2d, fCmin=0.5μM.	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q24 after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	100 mg/kg	48 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 100 mg/kg, po q2d after 48 hrs by Western blot analysis	26396681
A375M	Function assay	30 to 100 mg/kg	4 hrs	Inhibition of B-RAF V600E mutant in mouse xenografted with human A375M cells assessed as reduction of phospho-MEK level in tumor at 30 to 100 mg/kg, po q2d measured after 4 hrs post-third dose by Western blot analysis	26396681
A375M	Antitumor assay	10 to 100 mg/kg	30 days	Antitumor activity against human A375M cells xenografted in mouse assessed as tumor regression at 10 to 100 mg/kg, po q2d measured up to 30 days	26396681
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for TC32 cells	29435139
DAOY	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells	29435139
SJ-GBM2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells	29435139
A673	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-37 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells	29435139
U-2 OS	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for U-2 OS cells	29435139
Saos-2	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells	29435139
SK-N-SH	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-SH cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells	29435139
BT-12	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells	29435139
RD	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells	29435139
NB1643	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB1643 cells	29435139
SK-N-MC	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for SK-N-MC cells	29435139
LAN-5	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for LAN-5 cells	29435139
NB-EBc1	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for NB-EBc1 cells	29435139
BT-37	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for BT-37 cells	29435139
TC32	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for TC32 cells	29435139
MG 63 (6-TG R)	qHTS assay			qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Confirmatory screen for MG 63 (6-TG R) cells	29435139
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Toxicity CC50 against VERO-E6 cells determined at 48 hours by high content imaging (same conditions as 2_LEY without exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus), CC50=9.19μM.	ChEMBL
VERO-E6	Function assay		48 hrs	Determination of IC50 values for inhibition of SARS-CoV-2 induced cytotoxicity of VERO-E6 cells after 48 hours exposure to 0.01 MOI SARS CoV-2 virus by high content imaging, IC50=14.64μM.	ChEMBL
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	518.41	Formule	C₂₄H₁₆F₆N₆O	Stockage (À partir de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	927880-90-8	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	N/A			Smiles	CN1C2=C(C=C(C=C2)OC3=CC(=NC=C3)C4=NC=C(N4)C(F)(F)F)N=C1NC5=CC=C(C=C5)C(F)(F)F

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 100 mg/mL (192.89 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 33 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe de vente pour des tests personnalisés.	30.000mg/ml (57.87mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Entrez les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Entrez la formulation in vivo (Ceci nest que le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuiteμL PEG300, mélanger et clarifier, ajouter ensuiteμL Tween 80, mélanger et clarifier, ajouter ensuite μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, ajouter ensuite μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Remarque : 1. Assurez-vous que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue lors de lajout précédent est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	VEGFR2 (Cell-free assay) 30 nM(EC50) B-Raf (Cell-free assay) 3 nM-60 nM
In vitro	RAF265 (CHIR-265) inhibe C-Raf, le B-Raf de type sauvage et le B-Raf mutant (V600E). Ce composé bloque efficacement la phosphorylation des substrats en aval de Raf, MEK et ERK, dans les cellules et tue également les lignées cellulaires de mélanome et de cancer colorectal hébergeant des mutations B-Raf indépendamment du statut de mutation de PTEN. L'inhibition de la kinase Raf par cet agent dans les lignées cellulaires de mélanome B-Raf mutantes provoque un arrêt du cycle cellulaire et induit l'apoptose, imitant l'effet de l'ARN interférent de Raf dans ces cellules. Il inhibe également puissamment la phosphorylation de VEGFR2 et la prolifération des hMVEC stimulées par le VEGF. Dans les cellules HT29 et MDAMB231, cette substance chimique montre une activité inhibitrice avec un IC20 de 1 à 3 μM et un IC50 de 5 à 10 μM, respectivement. Alors qu'elle entraîne une diminution significative de la survie clonogénique dans toutes les lignées cellulaires testées, ce qui signifie que ce composé induit un effet dominant sur la survie clonogénique. L'ajout de cet agent à RAD001 dans les cellules HCT116 pourrait entraîner une diminution modérée de la phosphorylation d'AKT, de la protéine S6 et de 4EBP1. Il réduit considérablement le niveau de protéine de Bcl-2 et est fortement inhibiteur dans les cellules CM- et NCI-H727, tout en n'ayant aucun effet sur la sensibilité des cellules BON1 et GOT1 au TRAIL. La protéine kinase D3 (PRKD3) qui, lorsqu'elle est supprimée, pourrait améliorer la destruction cellulaire par ce composé dans les cellules de mélanome A2058, ce qui empêche la réactivation de la signalisation MAPK, induit le clivage de PARP, augmente l'activité de la caspase, interrompt la progression du cycle cellulaire et inhibe la formation de colonies.
Kinase Assay	Protocole d'essai
Kinase Assay	Raf et Mek sont combinés à 2 × les concentrations finales dans le tampon d'essai (50 mM Tris, pH 7.5, 15 mM MgCl₂. 0.1 mM EDTA et 1 mM DTT) et distribués à raison de 15 μL par puits dans des plaques d'essai en polypropylène. Les niveaux de fond sont déterminés dans des puits contenant du Mek et du DMSO sans Raf. Aux puits contenant Raf/Mek, on ajoute 3 μL de 10 × de ce composé dilué dans 100% de DMSO. La réaction d'activité de la kinase Raf est initiée par l'ajout de 12 μL par puits de 2.5 × ³³P-ATP dilué dans le tampon d'essai. Après 45-60 minutes, les réactions sont arrêtées par l'ajout de 70 μL de réactif d'arrêt (30 mM EDTA). Les plaques de filtration sont pré-humidifiées pendant 5 min avec 70% d'éthanol, puis rincées par filtration avec le tampon de lavage. Les échantillons (90 μL) des puits de réaction sont ensuite transférés dans les plaques de filtration. Les plaques de filtration sont lavées 6 × avec le tampon de lavage à l'aide d'un appareil de filtration Millipore. Les plaques sont séchées et 100 μL par puits de liquide de scintillation sont ajoutés. Le CPM est ensuite déterminé à l'aide d'un lecteur Wallac Microbeta 1450.
In vivo	RAF265 (CHIR-265) montre 71% à 72% de TVI% (pourcentage d'inhibition du volume tumoral) dans les xénogreffes HCT116 à 12 mg/kg. Tandis que la combinaison de ce composé et de RAD001 montre une activité antitumorale améliorée avec une augmentation du T10 (temps pour atteindre un volume tumoral relatif de 10 fois le volume tumoral initial) et un délai de croissance tumorale. La combinaison de RAD001 et de ce produit chimique améliore également significativement l'activation de la caspase-3 dans les xénogreffes HCT116 et MDAMB231 mais pas dans les xénogreffes A549. Ce composé inhibe l'accumulation de FDG (2-désoxy-2-[¹⁸F]fluoro-d-glucose) et diminue les volumes tumoraux dans les xénogreffes A375M par une dose orale de 100 mg/kg.
Références	[1] http://www.aacrmeetingabstracts.org/cgi/content/meeting_abstract/2008/1_Annual_Meeting/4876 [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20124452/ [3] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21317202/ [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21527556/ [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21390189/

Informations sur lessai clinique

(données de https://clinicaltrials.gov, mis à jour le 2024-05-22)

Numéro NCT	Recrutement	Conditions	Sponsor/Collaborateurs	Date de début	Phases
NCT01352273	Completed	Advanced Solid Tumors	Array Biopharma now a wholly owned subsidiary of Pfizer\|Array BioPharma	June 2011	Phase 1

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

RAF265 (CHIR-265) Raf inhibiteur

Structure chimique

Poids moléculaire: 518.41