Cetuximab (anti-EGFR)

Cetuximab-behandeling verhoogt de mitochondriale priming van EGFR-expresserende HeLa-cellen, maar niet in EGFR-expresserende MDA-MD-231-cellen.[2]

Cellen werden gelyseerd met een dichtheid van 1 x 10⁶/50 μL in lysisbuffer (0,25 M Tris-HCl, 2% natriumdodecylsulfaat, 4% β-mercaptoethanol, 10% glycerol, 0,02% broomfenolblauw) aangevuld met 1 X protease/fosfatase remmer cocktail. Cellysaten werden vervolgens geladen op polyacrylamidegels met natriumdodecylsulfaat. Na elektroforese werden eiwitten overgebracht naar polyvinylideenfluoride (PVDF) membranen. De geblotte membranen werden 1 uur geblokkeerd en vervolgens 's nachts bij 4 ℃ geïncubeerd met geschikte primaire antilichamen. De volgende dag werden de membranen driemaal gewassen gedurende in totaal 30 minuten en vervolgens geïncubeerd met IRDye 680RD Donkey anti-Rabbit IgG (H + L) of IRDye 800CW Donkey anti-Mouse IgG (H + L) in het donker bij kamertemperatuur gedurende 1 uur. Na nog drie wasbeurten werden immunoblotmembranen gescand en de bandintensiteit gekwantificeerd.

C225 verbeterde de antitumoractiviteit van verschillende chemotherapeutische geneesmiddelen in muis-xenograftmodellen[1]. Cetuximab oefent zijn antitumorale werkzaamheid uit via meerdere mechanismen, waaronder de remming van de celcyclusprogressie door arrest in de G1-fase en een verminderd aantal cellen in de S-fase. Celcyclusarrest in de G1-fase induceert ook apoptose door de inductie en activering van pro-apoptotische moleculen. Cetuximab alleen en in synergie met carboplatine resulteerde in een afname van tumorgrootte, metastatische verspreiding en MVD in NCI-N87 tumoren met EGFR-celoppervlakteexpressie en afwezigheid van mutaties in BRAF en K-ras, terwijl Cetuximab minimale in vitro effecten en geen in vivo behandelingseffectiviteit had in tumoren afgeleid van MKN-45, waarin het fenotype ook BRAF en K-ras wildtype was, maar die slechts een zwakke cytoplasmatische EGFR-eiwitexpressie hadden[3].

Doel: Antitumoractiviteit van Cetuximab in een murien maagkankermodel
Dierlijke modellen: Naaktmuismodel voor menselijke maagkanker (CD-1/nu-nu muizen)
Formulering: 0,9% NaCl
Doseringen: 1 mg/kg
Toediening: i.p.
Referentie: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22011788

Doel: Onderzoeken van de relatie tussen EGFR-niveaus en de respons op Cetuximab-behandeling in humane kankerenograftmodellen
Dierlijke modellen: Vrouwelijke athymische, naaktmuizen werden s.c. geïmplanteerd met ~1 mm3 tumorfragmenten
Formulering: PBS
Doseringen: 0,25, 0,5 of 1 mg/muis
Toediening: i.p.
Referentie: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27186886

Cetuximab kan worden toegepast op naaktmuizen, diverse kankercellijnen en andere gerelateerde assays (Alleen ter Referentie)