Name: TAK-632
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7291
Rating: 5 (34 reviews)

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.59%

99.59

Gerelateerde doelwitten	ERK p38 MAPK JNK MEK Ras KRas S6 Kinase MAP4K TAK1 Mixed Lineage Kinase
Overige Raf Inhibitoren	LY3009120 Exarafenib (KIN-2787) GDC-0879 Avutometinib (Ro5126766, CH5126766) PLX-4720 AZ 628 SB590885 GW5074 RAF265 (CHIR-265) PLX8394 (Plixorafenib, FORE8394)

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen	Assaytype	Incubatietijd	Activiteitsbeschrijving
human A375 cells	Function assay	2 h	Inhibition of BRAF V600E mutant in human A375 cells assessed as phosphorylation of MEK after 2 hrs by Western blotting analysis, IC50=12 nM
human HMVII cells	Function assay	2 h	Inhibition of NRASQ61k/BRAFG469V-mutant in human HMVII cells assessed as phosphorylation of MEK after 2 hrs by Western blotting analysis, IC50=49 nM
human HT-29 cells	Function assay		Inhibition of BRAF V600E mutant in human HT-29 cells assessed as phosphorylation of MEK, IC50=75 nM
human HMVII cells	Proliferation assay	72 h	Antiproliferative activity against human HMVII cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by chemi-luminescence cell viability assay, GI50=0.2 μM
293 cells	Function assay	20 mins	Inhibition of N-terminal GST-tagged MEK1 (unknown origin) expressed in 293 cells using GST-ERK1(K71A) as substrate after 20 mins, IC50=3.7 μM
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht	554.52	Formule	C₂₇H₁₈F₄N₄O₃S	Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)	3 jaar-20°Cpoeder
CAS-nr.	1228591-30-7	SDF downloaden		Opslag van stamoplossingen	1 jaar-80°Cin oplosmiddel 1 maand-20°Cin oplosmiddel
Synoniemen	N/A			Smiles	C1CC1C(=O)NC2=NC3=C(S2)C(=C(C=C3)OC4=CC(=C(C=C4)F)NC(=O)CC5=CC(=CC=C5)C(F)(F)F)C#N

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 100 mg/mL (180.33 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa	Concentratie	Volume	Moleculair gewicht
=	×	×

Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo Batch:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 Corn oil Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor aangepaste tests.	5.000mg/ml (9.02mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

Dosering: mg/kg Gemiddeld gewicht van dieren: g Doseervolume per dier:μL Aantal dieren:

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH₂O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken	Orally bioavailable, pan-raf inhibitor that targets both wild-type and mutant forms.
Targets/IC₅₀/Ki	C-Raf (Cell-free assay) 1.4 nM B-Raf (Cell-free assay) 8.3 nM Aurora B (Cell-free assay) 66 nM PDGFRβ (Cell-free assay) 120 nM FGFR3 (Cell-free assay) 280 nM GSK-3β (Cell-free assay) 500 nM CDK2 (Cell-free assay) 580 nM p38α (Cell-free assay) 600 nM PDGFRα (Cell-free assay) 610 nM
In vitro	TAK-632 remt de fosforylering van MEK en ERK in melanoom A375-cellen (BRAFV600E) met een IC50 van respectievelijk 12 nM en 16 nM. In menselijke melanoom HMVII-cellen (NRASQ61K/BRAFG469V) vertoont deze verbinding ook een sterke remming van pMEK en pERK met een IC50 van respectievelijk 49 nM en 50 nM. Bovendien vertoont het ook antiproliferatieve activiteit in zowel A375- als HMVII-cellen met een GI50 van respectievelijk 66 nM en 200 nM. Deze chemische stof induceert RAF-dimerisatie, maar remt de kinaseactiviteit van het RAF-dimeer vanwege de trage dissociatie van RAF. De combinatie van deze verbinding en TAK-733 vertoont synergetische antiproliferatieve effecten in BRAF- en NRAS-gemuteerde melanoomcellen.
Kinase Assay	Kinaseprofielbepaling
Kinase Assay	Assays voor serine/threoninekinasen met radiogelabeld [γ-³³P] ATP worden uitgevoerd in 96-wellplaten. BRAF en c-RAF worden tot expressie gebracht als N-terminale FLAG-getagde eiwitten met behulp van een baculovirusexpressiesysteem. De reactieomstandigheden zijn geoptimaliseerd voor elk kinase: BRAF (25 ng/well enzym, 1 μg/well GST-MEK1(K96R), 0,1 μCi/well [γ-³²P] ATP, kamertemperatuur, 20 min reactie); c-RAF (25 ng/well enzym, 1 μg/well GST-MEK1 (K96R), 0,1 μCi/well [γ-³²P] ATP, kamertemperatuur, 20 min reactie). Enzymreacties worden uitgevoerd in 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM magnesiumacetaat, 1 mM dithiothreïtol en 0,5 μM ATP, met geoptimaliseerde concentratie van enzym, substraat en radiogelabeld ATP zoals hierboven beschreven in een totaal volume van 50 μL. Voor de kinasereactie worden deze verbinding en het enzym gedurende 5 min geïncubeerd bij de reactietemperatuur zoals hierboven beschreven. De kinasereacties worden geïnitieerd door ATP toe te voegen. Na de reactieperiode zoals hierboven beschreven, worden de reacties beëindigd door toevoeging van 10% (eindconcentratie) trichloorazijnzuur. De [γ-³³P] of [γ-³²P]-gefosforyleerde eiwitten worden gefilterd in GFC-filterplaten met een Cell Harvester en vervolgens worden de platen uitgewassen met 3% fosforzuur. De platen worden gedroogd, gevolgd door toevoeging van 40 μL MicroScint0. De radioactiviteit wordt geteld met een TopCount scintillatieteller.
In vivo	TAK-632 vertoont een superieure orale biologische beschikbaarheid bij zowel ratten als honden. Deze verbinding (3,9–24,1 mg/kg, p.o.) vertoont dosisafhankelijke antitumorale werkzaamheid zonder ernstige gewichtsvermindering in een melanoom A375 (BRAFV600E) xenograftmodel en een menselijk melanoom HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V) xenograft bij ratten. In het NRAS-mutant melanoom SK-MEL-2 xenograftmodel vertoont deze chemische stof (60 of 120 mg/kg, p.o.) ook een krachtige antitumorale werkzaamheid zonder ernstige toxiciteit.
Referenties	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23906342/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24121489/

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

TAK-632 Raf remmer

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 554.52