Home TGF-beta/Smad PKC remmer Sotrastaurin (AEB071)

uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Sotrastaurin (AEB071) PKC remmer

Cat.Nr.S2791

Een krachtige en selectieve pan-PKC-remmer, Sotrastaurin (AEB071), richt zich voornamelijk op PKCθ met een Ki van 0,22 nM in een celvrije test; het is inactief voor PKCζ. Deze verbinding heeft Fase 2 bereikt.
Sotrastaurin (AEB071) PKC remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 438.48

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: Zuiverheid: 99.97%
99.97

Celkweek, behandeling & werkconcentratie

Cellijnen Assaytype Concentratie Incubatietijd Formulering Activiteitsbeschrijving PMID
T cell Function Assay 100 nM 3 h DMSO inhibits rRNA synthesis 25691158
HUVECs  Function Assay 500nM 1 h Reduces DTX-Triggered Endothelial Dysfunction 25634538
A549 Function Assay 0.1 μM 24 h decreases the relative PKC-α level on cell membrane cotreated AS-IV 25218161
A549 Function Assay 0.1 μM 24 h reduces the expression levels of MMP-2, MMP-9 and integrin β1 25218161
A549 Growth Inhibition Assay 0.1 μM 24 h enhances growth inhibition cotreated with AS-IV 25218161
Mel202 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO enhances IR-induced reduction in cell viability 24595385
92.1 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO enhances IR-induced reduction in cell viability 24595385
OCM3 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO enhances IR-induced reduction in cell viability 24595385
Mel202 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO increases IR-induced cell cycle arrest  24595385
92.1 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO increases IR-induced cell cycle arrest  24595385
OCM3 Growth Inhibition Assay 0.5 μM 3 h DMSO increases IR-induced cell cycle arrest  24595385
Jeko-1 Growth Inhibition Assay 0-4 μM DMSO inhibits cell growth dose dependently 24362935
Mino Growth Inhibition Assay 0-4 μM DMSO inhibits cell growth dose dependently 24362935
Rec-1 Growth Inhibition Assay 0-4 μM DMSO inhibits cell growth dose dependently 24362935
SP49 Growth Inhibition Assay 0-4 μM DMSO inhibits cell growth dose dependently 24362935
Jeko-1 Function Assay 2.5 μM  12 h DMSO downregulates NF-κB target genes 24362935
Mino Function Assay 2.5 μM  12 h DMSO downregulates NF-κB target genes 24362935
Rec-1 Function Assay 2.5 μM  12 h DMSO downregulates NF-κB target genes 24362935
SP49 Function Assay 2.5 μM  12 h DMSO downregulates NF-κB target genes 24362935
CD3+ T  Function Assay 0-500 nM 1 h inhibits NF-κB phosphorylation in a dose dependent manner 23573283
Mel202 Growth Inhibition Assay 0-5 μM 72 h DMSO inhibits cell growth dose dependently 22653968
Omm1.3 Growth Inhibition Assay 0-5 μM 72 h DMSO inhibits cell growth dose dependently 22653968
92.1 Growth Inhibition Assay 0-5 μM 72 h DMSO inhibits cell growth dose dependently 22653968
Mel202 Growth Inhibition Assay 5 μM 24 h DMSO induces G1 arrest  22653968
Omm1.3 Growth Inhibition Assay 5 μM 24 h DMSO induces G1 arrest  22653968
92.1 Growth Inhibition Assay 5 μM 24 h DMSO induces G1 arrest  22653968
Mel202 Apoptosis Assay 5 μM 72 h DMSO induces apoptosis slightly 22653968
Omm1.3 Apoptosis Assay 5 μM 72 h DMSO induces apoptosis 22653968
92.1 Apoptosis Assay 5 μM 72 h DMSO induces apoptosis signifcantly 22653968
Mel202 Function Assay 5 μM 24 h inhibits expression and phosphorylation of PKC isoforms 22653968
Omm1.3 Function Assay 5 μM 24 h inhibits expression and phosphorylation of PKC isoforms 22653968
92.1 Function Assay 5 μM 24 h inhibits expression and phosphorylation of PKC isoforms 22653968
HBL1 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50=0.5 μM 21324920
TMD8 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50=0.2 μM 21324920
OCI-Ly10 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50=1.3 μM 21324920
U2932 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50=10 μM 21324920
OCI-Ly3 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50＞20 μM 21324920
SuDHL2 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50＞20 μM 21324920
SuDHL4 Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50＞20 μM 21324920
DB Growth Inhibition Assay 0.16-20 μM 5 d IC50＞20 μM 21324920
Jurkat IL-2 Growth Inhibition Assay IC50=6.71 ± 3.76 μM 19940259
PBMC IL-2 Growth Inhibition Assay IC50=4.84 ± 1.70 μM 19940259
Jurkat Function assay Inhibition of TCR/CD28-mediated human T cell activation in Jurkat cells expressing human IL2 promoter by luciferase reporter gene assay, IC50 = 0.054 μM. 19827831
Jurkat T Function assay 5 hrs Inhibition of PKCtheta in human Jurkat T cells assessed as reduction in anti-CD3/CD28 antibody-induced T-cell activation by measuring decrease in IL-2 secretion after 5 hrs by luciferase reporter gene assay, IC50 = 0.081 μM. 28131714
B-cells Function assay Inhibition of PKCbeta in mouse B cells assessed as reduction in IgM-stimulated cell proliferation, IC50 = 0.234 μM. 28131714
bone marrow cells Antiproliferative assay 4 days Antiproliferative activity against CBA mouse bone marrow cells assessed as inhibition of [3H]thymidine incorporation after 4 days, IC50 = 3.7 μM. 19827831
Klik om meer experimentele gegevens over de cellijn te bekijken

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 438.48 Formule

C25H22N6O2

 Opslag (Vanaf de ontvangstdatum)
CAS-nr. 425637-18-9 SDF downloaden Opslag van stamoplossingen

Synoniemen N/A Smiles CN1CCN(CC1)C2=NC3=CC=CC=C3C(=N2)C4=C(C(=O)NC4=O)C5=CNC6=CC=CC=C65

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 87 mg/mL (198.41 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 40 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Kenmerken
Unlike former PKC inhibitors, Sotrastaurin does not enhance apoptosis of murine T-cell blasts in a model of activation-induced cell death.
Targets/IC50/Ki
PKCθ
(Cell-free assay)
0.22 nM(Ki)
PKCβ1
(Cell-free assay)
0.64 nM(Ki)
PKCα
(Cell-free assay)
0.95 nM(Ki)
PKCη
(Cell-free assay)
1.8 nM(Ki)
PKCδ
(Cell-free assay)
2.1 nM(Ki)
PKCε
(Cell-free assay)
3.2 nM(Ki)
In vitro

Behandeling met Sotrastaurin (AEB071) in concentraties onder 10 μM annuleerde effectief markers van vroege T-celactivering – zoals interleukine-2-secretie en CD25-expressie – in primaire menselijke en muizen-T-cellen op lage nanomolaire niveaus. Bij 200 nM remt het CD3/CD28-antilichaam- en alloantigeen-geïnduceerde T-celproliferatie zonder niet-specifieke antiproliferatieve effecten. Bovendien belemmert deze verbinding (<3 μM) de lymfocytfunctie-geassocieerde antigeen-1-gemedieerde T-celadhesie aanzienlijk.

Bij concentraties onder 20 μM belemmert het selectief de proliferatie van CD79-mutante ABC DLBCL-cellijnen, wat correleert met verminderde NF-κB-signaleringsactiviteit. Een concentratie van 5 μM induceert G1-arrest en/of celdood in CD79-mutante cellen.
Kinase Assay
Proteïnekinase-assays
Sotrastaurin (AEB071) werd getest op klassieke en nieuwe PKC-isotypes met behulp van scintillatie nabijheidsassay-technologie. Kortom, de assay wordt uitgevoerd in 20 mM Tris-HCl-buffer, pH 7,4, en 0,1% bovine serumalbumine door 1,5 μM van het peptidesubstraat te incuberen met 10 μM [33P]ATP, 10 mM Mg (NO3)2, 0,2 mM CaCl2, en PKC bij een proteïneconcentratie variërend van 25 tot 400 ng/mL, en lipidemembranen die 30 mol% fosfatidylserine, 5 mol% diacylglycerol (DAG) en 65 mol% fosfatidylcholine bevatten bij een uiteindelijke lipideconcentratie van 0,5 μM. Incubatie wordt uitgevoerd gedurende 60 min bij kamertemperatuur. De reactie wordt gestopt door toevoeging van 50 μl van een mengsel dat 100 mM EDTA, 200 μM ATP, 0,1% Triton X-100 en 0,375 μg/well streptavidine-gecoate scintillatie nabijheidsassay-kralen in PBS zonder Ca2+ en Mg2+ bevat. De geïncorporeerde radioactiviteit wordt gedurende 1 min gemeten in een MicroBetaTrilux-teller.
In vivo

In een subcutaan TMD8-xenograftmodel in SCID-muizen resulteert Sotrastaurin (AEB071) (80 mg/kg) in een significante remming van de in vivo tumorgroei.

Oraal toegediend bij 10 mg/kg en 30 mg/kg tweemaal daags, vertoont deze verbinding een dosisafhankelijk immunosuppressief effect dat leidt tot een uitgesproken verlenging van de overleving van hartallotransplantaten bij ratten.

Referenties
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35352024/

Toepassingen

Methoden Biomarkers Afbeeldingen PMID
Western blot p-Marcks / p-ERK / p-AKT / p-S6 / Marcks / ERK / AKT / S6 PKCα / PKCδ / PKCβ / PKCε / PKCθ Bcl-xl / XIAP / Survivin Cyclin D1 / p27(Kip1) pPKCδ/θ / phosphorylated MARCKS / p53 / MDM2 / PUMA / p21
S2791-WB5
22653968
Growth inhibition assay Cell viability
S2791-viability1
22653968

Informatie klinische proef

(gegevens van https://clinicaltrials.gov, bijgewerkt op 2024-05-22)

NCT-nummer Rekrutering Aandoeningen Sponsor/Medewerkers Startdatum Fasen
NCT02273219 Completed
Uveal Melanoma
Columbia University
 November 19 2014 Phase 1
NCT01801358 Terminated
Uveal Melanoma
Array Biopharma now a wholly owned subsidiary of Pfizer|Array BioPharma
 August 2013 Phase 1|Phase 2
NCT01430416 Completed
Uveal Melanoma
Novartis Pharmaceuticals|Novartis
 December 20 2011 Phase 1
NCT01402440 Terminated
Diffuse Large B-Cell Lymphoma
Novartis Pharmaceuticals|Novartis
 November 2011 Phase 1

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.

Veelgestelde vragen

Vraag 1:
Could you give me the information about how to prepare it for oral administration in mice?

Antwoord:
It can be dissolved in 2% DMSO/30% PEG 300/ddH2O at 10 mg/ml as a clear solution which can be used for injection, and in 2% DMSO/corn oil at 10 mg/ml as a suspension for oral administration.