Tofacitinib (CP-690550)

CatalogusnummerS2789 Batch:S278907

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C16H20N6O
Moleculair gewicht 312.37 CAS-nr. 477600-75-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 62 mg/mL (198.48 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 3.100mg/ml (9.92mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 62 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Tofacitinib is een nieuwe remmer van JAK3 met een IC50 van 1 nM in celvrije assays, 20- tot 100-voudig minder potent tegen JAK2 en JAK1. Deze verbinding remt de expressie van antiapoptotisch BCL-A1 en BCL-XL in humane plasmacytoïde dendritische cellen (PDC) en induceert PDC apoptose.
Doelen
JAK3
(Cell-free assay)		 JAK2
(Cell-free assay)		 JAK1
(Cell-free assay)
1 nM 20 nM 112 nM
In vitro CP-690550 is een specifieke, orale remmer van JAK3, het is 20- tot 100-voudig minder potent voor JAK2 en JAK1 met een IC50 van respectievelijk 20 nM en 112 nM. Deze verbinding heeft geen potente activiteit tegen 30 andere kinasen (alle mediane IC50 > 3000 nM). Het remt IL-2-geïnduceerde proliferatie met een 30-voudig grotere potentie dan de effecten op GM-CSF-geïnduceerde proliferatie. Deze chemische stof remt effectief een muizen gemengde lymfocytenreactie (MLR) (IC50 = 91 nM). Het remt potent de IL-4-geïnduceerde opregulatie van CD23 (IC50=57 nM) en de expressie van het klasse II major histocompatibility complex (MHCII) (IC50=71 nM) op muizen B-cellen. Recent onderzoek wijst uit dat een lage dosis van deze verbinding het begin van experimentele auto-immune encefalomyelitis versnelt door Th17-differentiatie te potentiëren.
In vivo In een muizenmodel van heterotopische harttransplantatie (DBA2 donorhart in C57/BL6 gastheer), resulteert Tofacitinib in een dosisafhankelijke toename van de overleving van getransplanteerde harten. De EC50 (medicijnconcentratie in bloed waarbij 50% van de muizen hun transplantaat >28 dagen zal behouden) is ~60 ng/mL. Deze verbinding voorkomt afstoting van allogene nieren bij niet-menselijke primaten (NHP's, Macaca fascicularis) (MST van 62 en 83 dagen voor respectievelijk de groepen van 50 tot 100 ng/ml en 200 tot 400 ng/ml). Muizen die chronisch met deze verbinding werden gedoseerd (1,5-15 mg/kg/dag) vertoonden dosis- en tijdsafhankelijke veranderingen in lymfocytensubsets bij onderzoek door flowcytometrie. De meest dramatische waargenomen verandering was een reductie van 96% in het aantal splenische NK1.1+TCRb-cellen na 21 dagen behandeling. Vertraagde-type overgevoeligheidsreacties (DTH) bij gesensibiliseerde muizen werden dosisafhankelijk verminderd na behandeling met deze chemische stof (1,87–30 mg/kg, s.c.). Verlengde overleving van neonatale Balb/c-harten geïmplanteerd in de oorschelp van MHC-mismatch C3H/HEN-muizen werd waargenomen met deze verbinding monotherapie (10–30 mg/kg/dag), maar verbeterde bij combinatie met cyclosporine (10 mg/kg/dag).

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • JAK3 Kinase Assay

    Een fragment dat het katalytische domein van humaan JAK3 codeert (785aa tot 1125aa, JH1 katalytisch domein) wordt met PCR geamplificeerd uit het volledige cDNA en gekloneerd in de EcoRI-site van de baculovirus-transfervector pVL1393. Recombinant baculovirus wordt gebruikt om Sf9 (Spodoptera frugipedra) cellen te infecteren en recombinant GSTJAK3 fusie-eiwit wordt geïsoleerd op glutathion sepharose. Het fusie-eiwit wordt geëlueerd met gereduceerd glutathion en opgeslagen in buffer die 50 mM Tris, pH 7,5, 10 mM DTT en 10% glycerol bevat. De JAK3 kinase-activiteit wordt gemeten met ELISA als volgt: Platen worden 's nachts gecoat met een willekeurig L-glutaminezuur- en tyrosine-copolymeer (4:1) (100 ug/mL). De platen worden gewassen en recombinant JAK3 JH1:GST (100 ng/well) met of zonder remmers wordt gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geïncubeerd, waarna HRP-geconjugeerde PY20 anti-fosfotyrosine-antilichaam (ICN) wordt toegevoegd en ontwikkeld door TMB (3,3',5,5'-tetramethylbenzidine). Andere kinasen (Tabel 1) worden geproduceerd in E. coli of in insectencellen, afhankelijk van wat optimaal bevonden wordt voor de betreffende kinase. De katalytische activiteit van tyrosinekinasen wordt gemeten met de bovengenoemde ELISA, terwijl serine/threoninekinasen worden geanalyseerd met radioactieve enzymassays.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    Human T blasts cell

  • Concentraties

    0-4000 nM

  • Incubatietijd

    4 days

  • Methode

    To measure IL-2-dependent proliferation, isolated lymphocytes are resuspended to a cell density of 1-2 × 106/mL in complete RPMI medium (RPMI 1640 containing 10% (w/v) fetal calf serum (FCS), 1%(w/v) penicillin and treptomycin).Phytohemagluttinin (PHA) is added to a final concentration of 10mg/mL, and the culture incubated for 3 days at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator to upregulate IL-2R and JAK3 expression. IL-2 (200U/mL), with or without this compound is then added and the cells are incubated for 72 hours at 37 °C in a humidified 5% (v/v) CO2 incubator, after which 50 mL of 3H-thymidine (5mCi/mL) is added. The plates are incubated for an additional 18 hours, harvested with a 96-well harvester, and counted on a scintillation counter. HUO3 cells are maintained in culture with granulocyte-macrophage colony stimulating factor and human foreskin fibroblasts are maintained in culture with 10% fetal calf serum. This compound is added to freshly plated cells and cultured for 4 days. 3Hthymidine is added during the last 18 hours of the culture period.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    DBA/2 and C57/BL6 mice

  • Doseringen

    0-136 ng/mL

  • Toediening

    Administered via osmotic minipump infusion

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14593182/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18242596/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22252297/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16378072/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14678034/

Klantproductvalidatie

TRAP-positive multinucleated cell differentiation depends on JAK and is inhibited by tofacitinib in vitro. Effect of tofacitinib on the differentiation of TRAP-positive multi-nucleated cells in vitro (n =3 wells/experiment). Original magnification x 100.

Gegevens van [ Arthritis Rheumatol , 2014 , 66(1), 121-9 ]

Effect of a panel of IFN inhibitors on BUNΔNSs virus growth in A549 cells. The inhibitor panel consists of small molecules that target the IKK2 (TPCA-1) and TBK1 (BX795, MRT6884, MRT6707) components of the IFN induction pathway and JAK1 (Cyt387, AZD1480, Ruxolitinib, Tofacitinib) a component of the IFN signaling pathway. Effect of the inhibitors was compared with A549 cells constitutively expressing viral IFN antagonists that block IFN production (BVDV-Npro) or IFN signaling (PIV5-V). Effect of various inhibitor concentrations on plaque size formation. Plaques were visualized 2 days post-infection by crystal violet staining.

Gegevens van [ PLoS One , 2014 , 9(11), e112014 ]

Effects of CP-690550 on NKTCL cell lines. NK-S1, KHYG-1 cells were treated with CP-690550 for 48 hours, and the effect on STAT5 phosphorylation was evaluated by Western blotting.

Gegevens van [ Cancer Discov , 2012 , 2(7), 591-7 ]

AE cells were treated with vehicle control (DMSO), a MEK inhibitor (PD98059), a PI3K inhibitor (LY294002) or a JAK2 inhibitor (CP690550) at indicated concentrations for 24 hours, followed by lysis for immunoblotting.

Gegevens van [ Blood , 2012 , 120(4), 709-19 ]

Sellecks Tofacitinib (CP-690550) Is geciteerd door 195 Publicaties

A patient-derived T cell lymphoma biorepository uncovers pathogenetic mechanisms and host-related therapeutic vulnerabilities [ Cell Rep Med, 2025, S2666-3791(25)00102-8] PubMed: 40147445
In silico modeling guides identification of novel JAK1 variants associated with immune dysregulation [ EMBO Mol Med, 2025, 10.1038/s44321-025-00317-0] PubMed: 41136770
Differential effects of tofacitinib on macrophage activation contribute to lack of response in ulcerative colitis patients [ J Crohns Colitis, 2025, 19(6)jjaf076] PubMed: 40320713
Keloids and inflammation: the crucial role of IL-33 in epidermal changes [ Front Immunol, 2025, 16:1514618] PubMed: 40230853
Rheumatoid arthritis associated cytokines and therapeutics modulate immune checkpoint receptor expression on T cells [ Front Immunol, 2025, 16:1534462] PubMed: 39981237
Polarization of Vδ2 T cells to a Th2-like phenotype promotes plasmablast differentiation and possesses pro-fibrotic properties in IgG4-related disease [ Front Immunol, 2025, 16:1550405] PubMed: 40213561
Membrane-bound IL-15 co-expression powers a potent and persistent CD70-targeted TRuC T-cell therapy [ Front Immunol, 2025, 16:1609658] PubMed: 40519930
Associations between ionomic profile and metabolic abnormalities in a murine model of sodium sulfide induced alopecia areata [ Front Pharmacol, 2025, 16:1507348] PubMed: 40438604
Targeting interferon responses in juvenile dermatomyositis: Siglec-1 as an in vitro biomarker for JAK inhibitor efficacy [ Rheumatology (Oxford), 2025, keaf227] PubMed: 40372702
Unidirectional Crosstalk Between NTRK1 and IGF2 Drives ER Stress in Chronic Pain [ Biomedicines, 2025, 13(7)1632] PubMed: 40722704

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.