Tariquidar (XR9576)

Tariquidar vertoont een hoge affiniteitsbinding aan P-gp met een B_max van 275 pmol/mg. Deze verbinding toont een niet-competitieve interactie met de P-gp substraten. Het verhoogt de steady-state accumulatie van deze cytotoxica in CH^rB30-cellen tot niveaus waargenomen in niet-P-gp-expresserende AuxB1-cellen met een EC50 van 487 nM. Deze chemische stof is in staat de vanadaat-gevoelige ATPase-activiteit van P-gp met 60-70% te remmen, met potente IC50-waarden van 43 nM. [1] Het kan andere resistentiemechanismen bij hogere concentraties remmen. 1 µM van deze verbinding heft ABCG2 (BCRP)-gemedieerde resistentie tegen camptothecines in vitro op. [2] Het potentieert de cytotoxiciteit van verschillende geneesmiddelen, waaronder doxorubicine; volledige omkering van resistentie wordt bereikt in aanwezigheid van 25-80 nM van deze chemische stof. In MC26, een murine coloncarcinoomcellijn met intrinsieke chemoresistentie, is de doxorubicine IC50 vijf keer lager in aanwezigheid van 0,1 µM van deze verbinding (36 vs 7 nM). In murine mammacarcinoom, menselijke kleincellige longcarcinoom en menselijke ovariumcarcinoomcellijnen met verworven chemotherapeutische resistentie (EMT6/AR1.0, H69/LX4 en 2780 AD), is de in vitro doxorubicine IC50 22-150 keer lager in aanwezigheid van 0,1 µM van deze chemische stof. P-gp-remming houdt 23 uur aan na verwijdering ervan uit het kweeksysteem. [3] Het herstelde de cytotoxiciteit van doxorubicine in het National Cancer Institute (NCI)/ADR^RES meercellige tumorsferoïdemodel, afgeleid van de MCF7^WT borstkankercellijn. [4]

Tariquidar (2-8 mg/kg p.o.) blijkt de antitumoractiviteit van doxorubicine (5 mg/kg, i.v.) tegen MC26 murine coloncarcinoom in vivo significant te potentiëren. Bij humane carcinoom xenograften herstelde gelijktijdige toediening van deze verbinding (6-12 mg/kg p.o.) de antitumoractiviteit volledig tegen twee sterk resistente MDR humane tumor xenograften (2780AD, H69/LX4) in naakte muizen. [3]

• Steady-state medicijnaccumulatie assay

  Cellen worden geïncubeerd in een reactievolume van 1 mL gedurende 60 min bij 37 ℃ onder 5% CO₂ om de steady-state te bereiken. Het effect van de modulatoren XR9576 op de [³H]-ligandaccumulatie wordt onderzocht in het concentratiebereik 10^-9 - 10^-6 M. Deze verbinding wordt toegevoegd vanuit een DMSO-stockoplossing, wat resulteert in een uiteindelijke oplosmiddelconcentratie van 0,2 % (v/v). Na het oogsten van de cellen wordt het geaccumuleerde medicijn gemeten door vloeistofscintillatietelling en genormaliseerd voor het celproteïnegehalte. Grafieken van de geaccumuleerde hoeveelheid als functie van de modulatorconcentratie worden gefit met de algemene dosis-responsvergelijking: Y={(a-b)/(1+(X/c)^d)}+b Waar: Y=respons; a=initiële respons; b=finale respons; c=EC50-concentratie; d=hellingswaarde; X=medicijnconcentratie.

• Cellijnen

  Murine mammary carcinoma cell line MDR EMT6/AR1.0

• Concentraties

  ~100 nM Tariquidar

• Incubatietijd

  4 days

• Methode

  Cells are seeded into 96-well plates at 800/well, in 100 μL of medium and incubated for 4 h at 37 ℃. Varying concentrations of this compound or solvent control (50 μL/well) are subsequently added and incubated for an additional 1 h before the addition of the cytotoxic drug. The cytotoxic drug (50 μL) is added to give a range of final concentrations in quadruplicate wells. After incubation for an additional 4 days, cell proliferation of adherent cells is assessed using the sulforhodamine B assay.

• Dierlijke modellen

  Murine colon carcinoma xenografts MC26

• Doseringen

  8 mg/kg

• Toediening

  Coadministration of Tariquidar (p.o.) with doxorubicin (5 mg/kg, i.v.)