TAK-632

CatalogusnummerS7291 Batch:S729101

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C27H18F4N4O3S
Moleculair gewicht 554.52 CAS-nr. 1228591-30-7
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 100 mg/mL (180.33 mM)
Ethanol 2 mg/mL (3.6 mM)
Water Insoluble
In vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving TAK-632 is een krachtige pan-Raf-remmer met een IC50 van respectievelijk 8,3 nM en 1,4 nM voor B-Raf(wt) en C-Raf in celvrije assays, en toont minder of geen remming tegen andere geteste kinases.
Doelen
C-Raf
(Cell-free assay)		 B-Raf
(Cell-free assay)		 Aurora B
(Cell-free assay)		 PDGFRβ
(Cell-free assay)		 FGFR3
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
1.4 nM 8.3 nM 66 nM 120 nM 280 nM
In vitro TAK-632 remt de fosforylering van MEK en ERK in melanoom A375-cellen (BRAFV600E) met een IC50 van respectievelijk 12 nM en 16 nM. In menselijke melanoom HMVII-cellen (NRASQ61K/BRAFG469V) vertoont deze verbinding ook een sterke remming van pMEK en pERK met een IC50 van respectievelijk 49 nM en 50 nM. Bovendien vertoont het ook antiproliferatieve activiteit in zowel A375- als HMVII-cellen met een GI50 van respectievelijk 66 nM en 200 nM. Deze chemische stof induceert RAF-dimerisatie, maar remt de kinase-activiteit van het RAF-dimeer vanwege de langzame dissociatie van RAF. De combinatie van deze verbinding en TAK-733 vertoont synergetische antiproliferatieve effecten in BRAF- en NRAS-gemuteerde melanoomcellen.
In vivo TAK-632 vertoont een superieure orale biologische beschikbaarheid bij zowel ratten als honden. Dit compound (3,9–24,1 mg/kg, p.o.) vertoont dosisafhankelijke antitumorale werkzaamheid zonder ernstige gewichtsvermindering in een melanoom A375 (BRAFV600E) xenograftmodel en een humaan melanoom HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V) xenograft bij ratten. In een NRAS-mutant melanoom SK-MEL-2 xenograftmodel vertoont deze chemische stof (60 of 120 mg/kg, p.o.) ook krachtige antitumorale werkzaamheid zonder ernstige toxiciteit.
Kenmerken Oraal biologisch beschikbare, pan-raf-remmer die zowel wild-type als mutante vormen aanpakt.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Kinaseprofielassay

    Assays voor serine/threoninekinasen met behulp van radiogemerkt [γ-33P] ATP worden uitgevoerd in 96-wellplaten. BRAF en c-RAF worden tot expressie gebracht als N-terminale FLAG-getagde proteïne met behulp van een baculovirus-expressiesysteem. De reactiecondities zijn geoptimaliseerd voor elk kinase: BRAF (25 ng/well enzym, 1 μg/well GST-MEK1(K96R), 0,1 μCi/well [γ-32P] ATP, kamertemperatuur, 20 min reactie); c-RAF (25 ng/well enzym, 1 μg/well GST-MEK1 (K96R), 0,1 μCi/well [γ-32P] ATP, kamertemperatuur, 20 min reactie). Enzymreacties worden uitgevoerd in 25 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM magnesiumacetaat, 1 mM dithiothreitol en 0,5 μM ATP, met een geoptimaliseerde concentratie enzym, substraat en radiogemerkt ATP zoals hierboven beschreven, in een totaal volume van 50 μL. Voorafgaand aan de kinasereactie worden dit compound en enzym gedurende 5 min geïncubeerd bij de hierboven beschreven reactietemperatuur. De kinasereacties worden geïnitieerd door toevoeging van ATP. Na de hierboven beschreven reactieperiode worden de reacties beëindigd door toevoeging van 10% (eindconcentratie) trichloorazijnzuur. De [γ-33P]- of [γ-32P]-gefosforyleerde eiwitten worden gefilterd in GFC-filterplaten met een Cell Harvester en vervolgens worden de platen gewassen met 3% fosforzuur. De platen worden gedroogd, gevolgd door toevoeging van 40 μL MicroScint0. De radioactiviteit wordt geteld met een TopCount scintillatieteller.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    A375 and HMVII cells

  • Concentraties

    ~2 μM

  • Incubatietijd

    72 hours

  • Methode

    The cells are proliferated in appropriate medium (vender recommended) supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS) and antibiotics, in tissue culture dishes placed in a humidified incubator maintained at 37°C in an atmosphere of 5% CO2 and 95% air. The anti-proliferative activity of this compound is determined by treating cell lines with this compound for 3 days, followed by measurement of viable cell number in the Cell Titer-Glo assay. The cells are seeded in a 96-multiwell plate at 1500 to 4000 cells per well in medium containing FBS and cells allowed to sit down overnight. After 18–20 h, this compound at various concentrations by serial dilution are added to the cells and were cultured for 3 days in chamber. After the treatment culture, cellular proliferation is determined by a Cell Titer-Glo Luminescent Cell Viability Assay. In brief, 100 bL/well of Cell Titer-Glo Substrate solution is added to each well and the cells were cultured for an additional 10 minutes (approximately). The chemi-luminescence value is measured using a Luminescence Counter 1420 ARVO MX Light. Concentration response curves are generated by calculating the decrease in chemi-luminescence values in compound-treated samples relative to the vehicle (DMSO) treated controls.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Human melanoma A375 (BRAFV600E) xenograft model and human melanoma HMVII (NRASQ61K/BRAFG469V) xenograft model in rats.

  • Doseringen

    ~24.1 mg/kg

  • Toediening

    Oral administration

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23906342/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24121489/

Klantproductvalidatie

Graph showing a concentration-dependent response of hypoxia-induced HIF-1α-NanoLuc activity to RAS-RAF-MEK-ERK pathway inhibitors: GDC-0994, PD-184352, selumetinib, TAK632, trametinib, and vemurafenib.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2016, 7(7):8172-83 ]

Sellecks TAK-632 Is geciteerd door 34 Publicaties

A structure-based modelling approach identifies effective drug combinations for RAS-mutant acute myeloid leukemia [ bioRxiv, 2025, 2025.04.29.651188] PubMed: 40654850
Cell-specific models reveal conformation-specific RAF inhibitor combinations that synergistically inhibit ERK signaling in pancreatic cancer cells [ Cell Rep, 2024, 43(9):114710] PubMed: 39240715
Hypoxia drives HIF2-dependent reversible macrophage cell cycle entry [ Cell Rep, 2024, 43(7):114471] PubMed: 38996069
HDAC Inhibition Restores Response to HER2-Targeted Therapy in Breast Cancer via PHLDA1 Induction [ Int J Mol Sci, 2023, 24(7)6228] PubMed: 37047202
A Combination of Conformation-Specific RAF Inhibitors Overcome Drug Resistance Brought about by RAF Overexpression [ Biomolecules, 2023, 13(8)1212] PubMed: 37627277
BRAFΔβ3-αC in-frame deletion mutants differ in their dimerization propensity, HSP90 dependence, and druggability [ Sci Adv, 2023, 9(35):eade7486] PubMed: 37656784
Systematic analysis of the MAPK signaling network reveals MAP3K-driven control of cell fate [ Cell Syst, 2022, 13(11):885-894.e4] PubMed: 36356576
Strategies to inhibit FGFR4 V550L-driven rhabdomyosarcoma [ Br J Cancer, 2022, 10.1038/s41416-022-01973-6] PubMed: 36097178
A Systems Biology Approach to Investigate Kinase Signal Transduction Networks That Are Involved in Triple Negative Breast Cancer Resistance to Cisplatin [ J Pers Med, 2022, 12-81277] PubMed: 36013226
Proteasomal down-regulation of the proapoptotic MST2 pathway contributes to BRAF inhibitor resistance in melanoma [ Life Sci Alliance, 2022, 5(10)e202201445] PubMed: 36038253

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.