SAR131675

SAR131675 remt dosisafhankelijk de proliferatie van primaire menselijke lymfecellen, geïnduceerd door de VEGFR-3-liganden VEGFC en VEGFD, met een IC50 van ongeveer 20 nM. Deze verbinding remt dosisafhankelijk de rh-VEGFR-3–TK-activiteit met een IC50 van 23 nM. Het remt de VEGR-3–TK-activiteit met een K_i van ongeveer 12 nM. Het remt de VEGFR-1–TK-activiteit met een IC50 van > 3 μM en de VEGFR-2–TK-activiteit met een IC50 van 235 nM. Het remt de autofosforylering van VEGFR-1 met een IC50 van ongeveer 1 μM en van VEGFR-2 met een IC50 van ongeveer 280 nM. Het remt VEGFR-2 matig en heeft zeer weinig effect op VEGFR-1, wat een goede selectiviteit voor VEGFR-3 aantoont. Het remt VEGFA-geïnduceerde VEGFR-2-fosforylering op een dosisafhankelijke manier, met een IC50 van 239 nM. Het remt potent de overleving van lymfecellen geïnduceerd door VEGFC en VEGFD met IC50 van respectievelijk 14 nM en 17 nM. Het remt VEGFA-geïnduceerde overleving met een IC50 van 664 nM. Het remt significant en dosisafhankelijk de VEGFC-geïnduceerde Erk-fosforylering, met een IC50 van ongeveer 30 nM. [1]

In embryonale angiogenese met behulp van het zebravissenmodel, SAR131675 verstoort efficiënt de embryonale vasculogenese. Deze verbinding bij 100 mg/kg/d heeft de niveaus van VEGFR-3 en hemoglobinegehalte met ongeveer 50% significant verlaagd. Het heft lymfangiogenese en angiogenese geïnduceerd in vivo door FGF2 efficiënt op. Deze chemische stof in een dosis van 300 mg/kg is in staat om zowel VEGFR-2 als VEGFR-3 signalering te remmen. In de preventiestudie wordt 5 weken behandeling met deze verbinding goed verdragen en het aantal angiogene eilandjes in de alvleesklier van met SAR131675 behandelde muizen is significant met 42% verminderd, vergeleken met de met vehikel behandelde groep. In de interventiestudie veroorzaakt dagelijkse orale toediening van deze chemische stof van week 10 tot week 12,5 een significante afname van de tumorlast met 62%. Behandeling ermee vermindert het tumorvolume significant met 24% en 50% bij respectievelijk 30 mg/kg/d en 100 mg/kg/d. [1]

• Tyrosinekinase-assay

  Multiwellplaten worden voorbehandeld met een synthetisch polymeersubstraat poly-Glu-Tyr (polyGT 4:1). De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van kinasebuffer (10 ×: 50 mM HEPES-buffer, pH 7,4, 20 mM MgCl₂, 0,1 mM MnCl₂ en 0,2 mM Na₃VO₄) aangevuld met ATP en dimethylsulfoxide (DMSO) voor de positieve controle (C⁺) of SAR131675 (variërend van 3 nM–1.000 nM). ATP wordt gebruikt bij 30 μM voor VEGFR-1 en VEGFR-3 en bij 15 μM voor VEGFR-2. Het gefosforyleerde poly-GT wordt gedetecteerd met een fosfotyrosine-specifieke monoklonale antilichaam (mAb) geconjugeerd aan mierikswortelperoxidase (HRP; 1/30.000) en ontwikkeld in het donker met het HRP-chromogene substraat (OPD). De reactie wordt vervolgens gestopt door de toevoeging van 100 μL 1,25 M H₂SO₄, en de absorptie wordt bepaald met een Envision-spectrofotometer bij 492 nm.

• Cellijnen

  HEK cells

• Concentraties

  20 nM

• Incubatietijd

  30 minutes

• Methode

  Cells were treated with various concentrations of SAR131675.

• Dierlijke modellen

  BALB/c mice with 4T1 cells

• Doseringen

  30 mg/kg/d, 100 mg/kg/d, and 300 mg/kg/d

• Toediening

  Oral